Siapkan: 1. Lysozyme 20 mg/ml 2. Dapar TE: 10 mM Tris HCl + 1 mM EDTA
Sentrifugasi suspensi bakteri 6000 rpm 5'
Buang supernatan sekering mungkin
Resuspensi dengan 100 µL dapar TE+2 µL lysozyme
Campur dengan pipetting
Tambah 450µL lysis solution RL
Campur dengan pipetting
Inkubasi 3' suhu ruang
sentrif kecepatan maks 1'
pindahkan supernatan ke spin filter D
Masukkan ke collection tube
sentrif 12000 rpm 2'
ganti collection tube
tambahkan 500 µL washing solution HS
sentrif 12000 rpm 1'
Buang filtrat
tambahkan 700 µL washing solution LS
sentrif 12000 rpm 1'
Buang filtrat
sentrif 12000 rpm 2'
Pindahkan spin filter ke elution tube
Tambahkan 100µL elution buffer
Inkubasi suhu ruang 1'
sentrif 8000 rpm 1'
simpan di 20°C
Persiapan suspensi bakteri (aslab)
Koloni E coli dari cawan 18 jam
Untuk 1 kelompok
inokulasi ke 100 ml LB cair
Inkubasi 18 jam 37°C shaker 200-250 rpm
Pindahkan 1.5 ml biakan ke tabung 1.5 ml
sentrif 6000 rpm 5'
buang supernatan
tambah 1 ml suspensi
buang supernatan
cuci dengan 1 ml aquabidest
sentrif 6000 rpm 5'
buang supernatan
Ulangi 2 kali
sentrif 6000 rpm 5'