Material De Calibración Y Material Para Control De Calidad..docx

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

SISTEMAS DE CONTROL DE CALIDAD Profesores: M en C Aura Hernández Olicón M en C Elizabeth Jiménez Gutierrez M en C Hilda Pérez Cervantes Dr. Luis R. Carreno Durón Autor: Suarez Gómez Alexis Gabriel Práctica: Material de calibración y material para control de calidad. Grupo: 5QM2 Sección: 4 Equipo: 10 Ciclo escolar 2019 Fecha de entrega Ciudad de México, 29 de febrero de 2018

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INTRODUCCIÓN Existen varios métodos para determinar un mesurado de interés. En el argot de la química menciona que se utilizan dos métodos: el método definitivo y el método de referencia .Se considera que el método definitivo es de difícil accesibilidad, debido a que utiliza metodologías caras en cuanto a equipos y reactivos y con frecuencia requiere de analistas especializados .Por ello, en la determinación analítica rutinaria de un mensurado se utilizan metodologías de mayor accesibilidad de reactivos y equipos, además de ser fáciles de realizar por el analista, sin embargo, antes de ser utilizadas se deben de comparar con el método de referencia, el cual se considera de bastante exactitud. En el laboratorio, es de interés evitar desviaciones analíticas al determinar un mensurado; para asegurar los resultados es necesario verificar el buen funcionamiento de los métodos, realizando la calibración del método analítico con el uso de especímenes de una sustancia de concentración conocida, relacionado de forma matemática la lectura analítica con el valor nominal de la sustancia que se mide .Asimismo, la preparación de los materiales de calibración debe hacerse con el mayor cuidado posible, ya que la exactitud del calibrador afecta directamente a la exactitud de los resultados. Para la realización de una metodología química, se requiere de materiales primarios que son utilizados para la preparación de estándares a partir de los cuales se pueden preparar soluciones de concentraciones conocidas llamadas calibradores (estándar de calibración) que contengan una cantidad conocida del componente que se analiza, los cuales se utilizan en todas las medidas cuantitativas.

OBJETIVOS  

Realizar una corrida analítica completa para la determinación de un mensurado de interés controlando el proceso analítico y la calidad de los resultados, a través de comprender la diferencia entre calibradores y controles. Establecer la importancia del uso de los calibradores y controles para validar y vigilar el proceso analítico.

FUNDAMENTO Haciendo referencia a los materiales de control son preparaciones utilizadas para evaluar la exactitud y la precisión de substancias empleadas en las mediciones de diversos componentes en fluidos, secreciones, excresiones o tejidos corporales. Estos se utilizan para la comparación de métodos, sin embargo tienen un alto grado de sensibilidad dado a que los resultados pueden verse influenciados por la manipulación, los procedimientos en el laboratorio.

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RESULTADOS BITÁCORA DE RESULTADOS FECHA: 10 de abril de 2018 Material de calibración y material para control de calidad Resultados y observaciones Corrida analítica Determinación de: Glucosa sérica Método: Glucosa oxidasa Unidades: mg/dl Blanco utilizado: Solución de glucosa oxidasa λ seleccionada: 510 nm Datos del estándar: Estándar utilizado: Estándar de glucosa

Estándar

Concentración del estándar (mg/dL)

Absorbancia obtenida

1 50 2 100 3 200 4 300 5 400 6 700 Linealidad: Si hay linealidad.

0.163 0.326 0.631 0.932 1.191 1.645

Concentración del estándar calculada (mg/dL) 49.99 99.99 193.55 285.88 365.32 504.58

%error -0.02 -0.01 -3.22 -4.70 -8.67 -27.91

Calculos para la obtención de la concentración calculada del estándar en mg/dL Fórmula para calcular las concentraciones de las diluciones: Conc. de tubo[100] Factor = A100 100 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 = = 306.74 0.326 Ecuación empírica para calcular las concentraciones calculadas Concentracion calculada = Factor ∗ Absorbancia [ ] = 306.74 ∗ 0.163 = 49.99 Tomando en cuenta los valores observados se determinó mediante la siguiente ecuación el porciento de error: %E=

valor observado- valor real valor real

=

49.99- 50 50

x100= -0.02%

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Datos del suero control. Suero control

Conc. del suero mg/dL

Normal Patológico

Intervalos mg/dL

Absorbancia obtenida

238-324 95.1-129

0.245 0.761

Conc. del estándar calculada ec recta mg/dL 72 244

Conc. del estándar calculada factor mg/dL 75.15 233.42

Conc. del estándar calculada interpolar mg/dL 70 235

Ecuación de reacta: y=a+bx 𝑦 = 0.003𝑥 + 0.029 Ecuación empírica para calcular las concentraciones 𝑦−𝑎 𝑥= 𝑏 0.245 − 0.029 𝑥= = 72 0.003 Factor utilizado: 306.74 mg/dL 100 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 = = 306.74 0.326 Ecuación empírica para calcular las concentraciones calculadas Concentracion calculada = Factor ∗ Absorbancia [ ] = 306.74 ∗ 0.245 = 75.15

Datos de las muestras: Conc. Obtenida de la muestra Muestra problema

M3

Absorbancia

Curva tipo (interpolado) mg/dL

Ecuación de la recta mg/dL

Factor mg/dL

0.745

240

238.66

228.66

Características de la muestra: se observó que el suero presentaba una coloración muy amarillenta . Ecuación de reacta: y=a+bx 𝑦 = 0.003𝑥 + 0.029 Ecuación empírica para calcular las concentraciones 𝑦−𝑎 𝑥= 𝑏 0.745−0.029 𝑥 = 0.003 =238.66 Factor utilizado: 306.74 mg/dL 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 =

100 = 306.74 0.326

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Ecuación empírica para calcular las concentraciones calculadas Concentracion calculada = Factor ∗ Absorbancia [ ] = 306.74 ∗ 0.745 = 49.99 Método con mayor error: Método con menor error: Método ideal para calcular la concentración de las muestras: Identificaciòn de puntos críticos del Acciones correctivas proceso  Errores en la toma de volúmenes.  Mejorar el trabajo experimental.  Falta de atención de mezclar el reactivo antes de usar. Acciones preventivas para los procedimientos: Dado a ser una simulación de trabajo con una reacción tipo colorimétrica, hay que tener en cuenta que para hacer una corrida analítica todos nuestros instrumentos deben estar calibrados para la obtención confiable de resultados. Importancia del uso de los materiales de control Calibradores Controles Sirve para construir curva tipo Sirve como apoyo para saber como estoy trabajando con muestra. Diferencias entre los materiales de control Calibradores Controles Ayuda a conocer la linealidad Valida funcionamiento del sistema analítico

2 1.8 1.6

Absorbncia

1.4 1.2 1 0.8

y = 0.0023x + 0.1438 R² = 0.9677

0.6 0.4 0.2 0 0

100

200

300

400

500

600

700

800

Conc. del estándar mg/dL

Figura 1. Curva tipo para la determinación de la concentración de glucosa sérica por el método de glucosa oxidasa en un intervalo de concentraciones de 50 a 700 mg/dL.

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1.4 1.2

Absorbancia

1 0.8 0.6 0.4

y = 0.003x + 0.029 R² = 0.9986

0.2 0 0

50

100

150

200

250

300

350

400

450

Conc. del estándar mg/dL

Concentración del estándar calculada (mg/dL)

Figura 2. Curva tipo ajustada para la determinación de la concentración de glucosa sérica por el método de glucosa oxidasa en un intervalo de concentraciones de 50 a 400 mg/dL.

400 350 300 250 200 150 y = 0.905x + 8.9032 R² = 0.9986

100 50 0 0

50

100

150

200

250

300

350

400

450

Concentración del estándar (mg/dL)

Figura 3. Verificación de la linealidad considerando un intervalo de concentraciones de 50 a 400 mg/dL.

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DISCUSIÓN Con respecto a la primer experiencia con una simulación de trabajo con una reacción tipo colorimétrica al hacer una corrida analítica desde estándares, suero control y muestra es necesario asegurar la linealidad mediante una curva tipo, para ello se midieron las absorbancias de los estándares obteniendo una curva tipo para la determinación de la concentración de glucosa sérica por el método de glucosa oxidasa al manejarlo en un intervalo de concentraciones de 50 a 700 mg, se observó que el coeficiente de correlación se alejaba del valor esperado para tener una linealidad por ello se modificó el intervalo de trabajo como se muestra en la figura 2 usando un intervalo de concentraciones de 50 a 400 mg/dL, teniendo una curva con un ángulo aproximado de 45 grados y un coeficiente de correlación cercano a uno por lo que podríamos inferir que se cumple con la linealidad, sin embargo la misma se verificó con la figura 3 considerando un intervalo de concentraciones de 50 a 400 comparando las concentraciones estándar y las concentraciones calculadas, se comprueba que hay una linealidad dado al valor del coeficiente de correlación que es cercano a 1 con una diferencia de 0.0014. Haciendo referencia a los valores de concentración de los controles obtenidos por distintos métodos: interpolación, multiplicación por factor y a partir de la ecuación de la recta, cabe mencionar que fue apartir del último que dio valores más acertados acercándose más al intervalo de concentraciones del suero control patológico obteniendo experimentalmente. Sin embargo cabe mencionar que ninguna de las concentraciones entran en el intervalo de los sueros por lo tanto no se puede reportar el resultado y por lo tanto no se valida el resultado.

CONCLUSIONES  

La curva tipo cumple con la ley de Bouger-Beer. No se puede reportar el resultado, ya que los controles no se encuentran dentro del intervalo y por lo tanto no se valida el resultado.

PREGUNTAS EXTRA Fundamento del método de la glucosa oxidasa La glucosa se determina después de una oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. Le peróxido de hidrógeno formado reacciona, catalizado por la peroxidasa, con fenol y 4-aminofenazona para formar un indicador de quinoneimina rojo-violeta.

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La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico. El peróxido de hidrógeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor cromogénico de oxígeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD): La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de glucosa presente en la muestra ensayada. r y r2. De manera general la diferencia entre los coeficientes de correlación lineal (r) y el de determinaciòn (r2), radica en que le primero mide el grado de relación que hay entre dos variables, mientras que la segunda corresponde al porcentaje de variación de la variable de respuesta

REFERENCIAS 

Arderiu Fuentes X., Lacambra Castiñeiras M. J., Compaño Queralto M. J., Bioquímica clínica y patología molecular, Vol. I., Ed. Reverte, ed. 2a, Barcelona, 1998.

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Archivo PDF, Randox: insertos de laboratorio, disponible en: http://sistemainterno.com/web/wpcontent/themes/aaaclientesflash/gaamsa2011/pdf/MANUAL_QC_2013.pdf