Sistemas D¿ Verificación.docx

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SISTEMAS DE CONTROL DE CALIDAD Profesores: M en C Aura Hernández Olicón M en C Elizabeth Jiménez Gutierrez M en C Hilda Pérez Cervantes Dr. Luis R. Carreno Durón Autor: Suarez Gómez Alexis Gabriel Práctica: Vetificación y evaluación del uso y funcionamiento de instrumentos de medición columétrica Grupo: 5QM2 Sección: 4 Equipo: 10 Ciclo escolar 2019 Fecha de entrega Ciudad de México, 21 de febrero de 2018

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INTRODUCCIÓN Dado a la necesidad de garantizar que la adición de la cantidad de volumen fuera la medida a lo largo del tiempo se implementaron instrumentos para garantizarlo, como es el de las micropipetas las cuales vierte volúmenes desde 1 a 1000 L, que pueden ser de volumen fijo o volumen cambiable. El líquido se aloja en una punta de plástico desechable. Las puntas de polipropileno son estables a la mayoría de las diluciones acuosas y de muchos disolventes orgánicos, excepto el cloroformo. Las puntas no son resistentes a los ácidos nítrico o sulfúrico concentrados. El volumen de líquido tomado en una punta depende del ángulo con el que se sujete la pipeta y la profundidad a la que se sumerja al tomar el líquido. Cada persona consigue una precisión y exactitud algo diferentes al utilizar una misma micropipeta, es decir, si se somete a una prueba al analista una dia y semanas después se somete otra vez, tendrá valores distintos de exactitud y precisión, no es constante (Daniel C. Harris, 2003) Acorde con las características de esta clase de equipos semiautomatizados han implicado una revolución tecnológica, en su funcionamiento regido por la maquinaria del aparato asi como el sistema eyector de puntas, botón control dosificación, etc, con lo que se ha logrado una mejor regulación y un mayor control del proceso analítico evitando así los errores como el de toma de muestra, ya que con estos aparatos aumenta la probabilidad de que el volumen con el que ajustamos la micropipeta es el que tomamos. Pero para ello es necesario que este bien calibrada la micropipeta, la calibración se refiere a la comparación contra un estándar o un patrón. Es decir que mediante el método gravimétrico o fotométrico se compara el volumen real que dosifica la pipeta, contra el estándar internacional. Esto quiere decir que si la pipeta no pasa la calibración, el movimiento del pistón es ajustable y podemos llevar la pipeta a volúmenes correctos nuevamente (ISO 8655). OBJETIVO Conocer y aplicar el método correcto de utilizar las pipetas de vidrio y las pipetas semiautomáticas, así como evaluar la eficiencia de dichos instrumentos y otros sistemas de medición de volúmenes, para determinar la precisión y la exactitud del analista a partir de un método sencillo de dos pasos y detectar los puntos críticos del proceso y plantear las posibles soluciones antes de realizar la determinación de un mensurando y garantizar un resultado analítico confiable. FUNDAMENTO La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir pequeños volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas científicas. Operación del Equipo. Técnica de pipeteo para líquidos claros: a. Se presiona el botón superior suavemente hasta el primer tope. b. Se sumerge la punta, en la solución que se necesita pipetear estando seguros que la punta este bien colocada y que no haya ningún tipo de residuos entre la punta y el cuerpo de la pipeta.

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c. Mantenga la pipeta verticalmente mientras toma la solución. d. Para descartar la solución de la punta presione el botón hasta el segundo tope. e. Descarte las puntas utilizando el eyector que traen las pipetas. Técnica de pipeteo para líquidos con alta viscosidad: a. Presione el botón superior hasta el segundo tope. b. Sumerja la punta en la solución (2-3 mm) y suelte el botón despacio. La punta tiene que estar bien llena. c. Descarte el líquido de la punta presionando suavemente el botón superior hasta el primer tope. Cuidados y Mantenimiento del Equipo a. Iniciar el día limpiando la parte externa de las pipetas de polvo o suciedad. b. Use solamente etanol al 70% para la limpieza de la pipeta. Otro tipo de solvente no es aconsejable. c. Utilizar las puntas adecuadas a las pipetas y a la cantidad de solución que se va a medir. d. El pistón y el cilindro pueden ser chequeados dos veces al año si la pipeta es usada diariamente. El mantenimiento preventivo de la pipeta tiene que ser realizado por personal especializado de mantenimiento. PREGUNTA EXTRA

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Número CAS 7778-50-9 Fórmula molecular K₂Cr₂O₇ Masa molar 294,2 g /mol Indicaciones de peligro H272 Puede agravar un incendio; comburente H301 Tóxico en caso de ingestión H312 Nocivo en contacto con la piel H314 Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves H317 Puede provocar una reacción alérgica en la piel H330 Mortal en caso de inhalación H334 Puede provocar síntomas de alergia o asma o dificultades respiratorias en caso de inhalación H335 Puede irritar las vías respiratorias H340 Puede provocar defectos genéticos H350 Puede provocar cáncer H360FD Puede perjudicar a la fertilidad. Puede dañar al feto H372 Provoca daños en los órganos tras exposiciones prolongadas o repetidas H410 Muy tóxico para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos Consejos de prudencia

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Consejos de prudencia - prevención P202 No manipular la sustancia antes de haber leído y comprendido todas las instrucciones de seguridad. P270 No comer, beber ni fumar durante su utilización. Consejos de prudencia - respuesta P302+P352 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con abundante agua. P304+P340 EN CASO DE INHALACIÓN: Transportar a la persona al aire libre y mantenerla enuna posición que le facilite la respiración. P305+P351+P338 EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Enjuagar con agua cuidadosamente durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto cuando estén presentes y pueda hacerse con facilidad. Proseguir con el lavado. P310 Llamar inmediatamente a un CENTRO DE TOXICOLOGĺA/médico NOM-008-SCFI-2002 Sistema General de Unidades de Medida Nota sobre las unidades de dimensión 1 (uno) La unidad coherente de cualquier magnitud adimensional es el número 1 (uno), cuando se expresa el valor de dicha magnitud, la unidad 1 (uno) generalmente no se escribe en forma explícita. No deben utilizarse prefijos para formar múltiplos o submúltiplos de la unidad, en lugar de prefijos deben usarse potencias de 10. Cuando se escribe el resultado de una medición, sea directa o indirecta, deben tomarse en cuenta las siguientes reglas para determinar el número de cifras significativas: 1) Todos los dígitos diferentes de cero son significativos. 2) Los ceros situados entre cifras significativas son significativos. 3) Los ceros a la izquierda del primer dígito diferente de cero, no son significativos. 4) Los ceros situados a la derecha son cifras significativas cuando se escribe el signo decimal.1 5) Si un número no tiene signo decimal y termina con uno o más ceros, dichos ceros pueden o no ser significativos. Para expresar que son significativos se recurre a escribir el número en notación científica. 6) Los números escritos en notación científica tienen tantas cifras significativas como dígitos existan en la cantidad

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asociada al coeficiente de la potencia base diez de la expresión. 1) Redondeo hacia abajo. Si el dígito siguiente al último lugar retenido es 0, 1, 2, 3 o 4 (seguido o no por otros dígitos), “consérvese” el valor del dígito situado en el último lugar retenido. Ejemplos. Redondeo a dos cifras significativas. 1.5496 se redondea a 1.5; 6.20 se redondea a 6.2 2) Redondeo hacia arriba. Si el dígito siguiente al último lugar retenido es 5 (seguido de otros dígitos no todos cero) o 6, 7, 8 o 9 (seguido o no de otros dígitos), “increméntese” el dígito existente en el último lugar retenido, en una unidad. Ejemplos. Redondeo a tres cifras significativas. 49.8501 se redondea a 49.9; 27.0864 se redondea a 27.1 3) Redondeo al valor “par” más próximo. Cuando el dígito siguiente al último lugar retenido es un 5 y no hay dígitos más allá de ese número o son solamente ceros, “increméntese” en una unidad el dígito en el último lugar a ser retenido si es impar, dejando el dígito sin cambio si es par. Esta regla se aplica también para valores positivos y negativos, considerando el “cero” como dígito par. Ejemplos. Redondeo a dos cifras significativas. 5.85 se redondea a 5.8; 2.1500 se redondea a 2.2 RESULTADOS Bitácora de Resultados Datos de la micropipeta Instrumento: Micropipeta Tipo de ajuste: Variable Marca: BIOHIT PROLINE Volumen de la micropipeta:2 -20 µL Unidades: µL Número de serie: 10118911 Numero de micropipeta (codificación propia del usuario) 9 Condiciones físicas de la micropipeta: Fluidez en botón En volumen medio En buenas condiciones físicas Calculo y tratamiento de los datos Tratamiento fotométrico Verificación de la precisión Reactivo utilizado: Dicromato de potasio Longitud de onda seleccionada: 500 nm Solución con la que se hizo las Agua destilada diluciones:

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Espectrofotómetro utilizado: Thermo scientific Genesis 20 Equipo 12 Ajuste del espectrofotómetro con: Agua destilada Método de pipeteo: sencillo Tabla 1 Datos de absorbancia Obtenidos por el método fotométrico No A No A No A 1 5 9 0.270 0.251 0.247 2 6 10 0.257 0.286 0.258 3 7 Estándar 0.281 0.231 0.251 4 8 0.237 0.219 Formula y cálculos de la media y del coeficiente de variación: Daniel 1-5. Alexis 6-10 ̅= X S

%CV= X̅ *100=

∑ni=1 Xi 0.286 + 0.231 + 0.219 + 0.247 + 0.258 = = 0.2482 N 5

0.02585 *100= 0.2482

10.14%

Absorbancia promedio: 0.2482 Desviación estándar: 0.02585 %CV: 10.14% ¿Qué representa el coeficiente de variación?: El grado de precisión Hay imprecisión: si Verificación de la exactitud Reactivo con el que se realizó el estándar relativo: Dicromato de potasio Material de vidrio utilizado para el estándar relativo: Matraz volumétrico Volumen preparado: 500 mL Longitud de onda seleccionada: 500 nm Absorbencia del estándar relativo: 0.251 Volumen nominal de la micropipeta: 10 µL Fórmula para calcular el volumen de la micropipeta: Volumen que mide la micropipeta en µL= (A promedio x VNP)/A del estándar relativo Volumen que mide la micropipeta en µL= (0.2482x 10)/0.251 = 9.88 Volumen que mide la micropipeta: 9.88µL

Verificación de la exactitud Formula y cálculos para calcular el % error: % de error= [(valor observado- valor real)/valor real]x100 % de error= [(9.88-10)/10]x100 % error calculado: -1.2% Volumen de la micropipeta (µL) 2-20 µL

Volumen seleccionado (VNP) (µL) 10 µL

Vol que mide la micropipeta (µL)

% Error

9.88 µL

-1.2%

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Observaciones y puntos críticos observados en el procedimiento: Pipeteo del agua destilada con la pipeta graduada Pipeteo del dicromato de potasio Homogenización Acciones correctivas: Medir las alícuotas a la altura de los ojos para evitar paralaje Verificar que se está tomando todo el volumen seleccionado con la micropipeta, evitar la formación de burbujas de aire al tomar la muestra Datos obtenidos por el método gravimétrico: Instrumento: Balanza analítica Tipo de ajuste: Variable Marca: DORDLAB Número de serie: 181127223 Unidades: g Decimales: 4 Sensibilidad: 0.0001G Codificación propia del usuario: Condiciones físicas de la balanza: Optimas Calibración del instrumento: NA Recipiente utilizado: Tapa de plástico Método de pesas utilizado: NA Peso del recipiente (w1): NA Temperatura de control: 22°C Método de pipeteo: Sencillo Datos Obtenidos: Tabla 2 Datos Obtenidos por el método gravimétrico No g No g No g 1 5 9 0.0095 0.0097 0.0375 2 6 10 0.0097 0.0090 0.0467 3 7 0.0096 0.0180 4 8 0.0097 0.0275 Obtener el peso en gramos restando los acumulados No 2- No1, No 3- No2, No4No3, No5-No4 Alexis1-5. Daniel6-10 Media de los datos obtenidos: 0.00964g Desviación estándar: 0.0000894 coeficiente de variación: 0.92% % de error: -3.3% Factor Z: 1.0040 mL/g Formula y cálculos para obtener el volumen real de la micropipeta: V= *Z V= 0.00964g*1.004mL/g Volumen real de la micropipeta: 0.00967 µL Observaciones y puntos riticos identificados en el procedimiento: Deposito completo de la alícuota Acciones correctivas: Verificar que la gota se deposite totalmente y dentro del recipiente

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Micropipeta Método fotométrico Método gravimétrico Volumen de la 2 -20 µL 2 -20 µL micropipeta (µL) Volumen seleccionado 10 µL 10 µL (VNP) (µL) Volumen que mide la 9.88µL 9.67 µL micropipeta (µL) % Error -1.2% -3.3% Método primario para la determinación de volumen y verificación de los instrumentos: Gravimétrico Verificación de la micropipeta: la micropipeta se encuentra calibrada Observaciones generales: Debe mejorarse la toma de alícuotas con pipeta graduada Recomendaciones para el uso de la micropipeta: Se debe verificar el volumen tomado sea el correcto y que este a su vez se deposite completamente en el recipiente. La toma de las alícuotas se debe realizar a la altura de los ojos para evitar paralaje.

Tabla1. Registro de los parámetros estadísticos cálculos tanto del método fotométrico y gravimétrico. Analista

No. micropipet a

Alberto

3

Método fotométrico VN CV<2 Vol. P % que (μL) mid e (μL) 30 3.9 28

Carlos

3

30

1

29

-3.3

Daniel

9

10

4.5

9.3

-6.3

Alexis

9

10

3.45

9.8

-1.2

%E <5 %

-6.9

Método gravimétrico CV Volmid %E e (μL)

7.1 8 7.2 5 6.5 6 0.9 2

Calibrad o

35

7.18

Si

37

No

10.3

23.3 3 3.26

9.67

-3.3

No

No

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Christia n Daniel 2

6

30

12.17

29

17

30

7.0

21.7

Gabriel Diana

17 36

30 30

12.8 1.57

12.8 27.8

Sharon

33

30

1.98

26.8

Iris

33

30

6.20

Antonio

33

30

3.05

29.1

Luisa

6

30

3.80

28.9

Yolanda

1

20

7.15

18.4

Abril

1

20

2.77

19.5

2.1 3.33 1 9.4 26. 2 -57 2.8 10 9.6 8 9.5 8.6 3 7.8 5.89 3 2.94 3.68 5.3 6 5.1 7.63 6 11. 2.11 6

29

-3.3

No

21.7

9.4

No

12.8 27.42

28.6 8.6

No No

26.32

8.4

No

24.73

17.5 6

No

27.9

7.33

No

21.8

9.05

No

21.3

6.35

No

DISCUSIÓN Haciendo como referencia general a los datos obtenidos experimentalmente de manera individual con la serie de 5 mediciones gravimétricas y fotométricas, cabe mencionar que el uso de 5 representaciones no son estadísticamente significativas, dado a que para una media se necesita 7 como mínimo y una desviación estándar 20 como óptimos, sin embargo el número de representaciones usadas fueron bajas por lo que se aumenta el grado de incertidumbre y no es posible realizar un análisis más confiable sobre la verificación y evaluación del uso y funcionamiento de las micropipetas. Con respecto a mis valores cabe mencionar que con respecto al método fotométrico con respecto al porciento de correlación de varianzas se obtuvo un valor de 3.45 mayor al 2% por lo que no se usa adecuadamente la micropipeta, esto se debió a que no se tomaron las muestras en esta etapa al nivel de los ojos produciendo ese margen de dispersión del método, con respecto al porciento de error se obtuvieron valores menores al 5% negativos, a pesar de haber entrado el valor en el promedio había mucha impresición, lo cual significa que al tomar el volumen de la muestra en realidad se estaba tomando menos al deseado, Comparando los valores entre Daniel y Alexis quienes usaron la pipeta número 9, a pesar de trabajar con la misma pipeta e tienen distinto valores en los parámetros estadísticos cercanos en la medición del volumen que mide, y de la dispersión de los datos, por lo que cabe mencionar que no hay reproducibilidad entre analista como mencionado anteriormente por Daniel C. Harris quien menciona que cada persona consigue una precisión y exactitud algo diferentes al utilizar una misma micropipeta.

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Con respeto a los valores con un coeficiente de dispersión de 12.17 como fue el de Christian, cabe mencionar que dicho valor dilucida que la calibración de la micropipeta no fue la adecuada. Sharon, Diana y Carlos de acuerdo a la tabla 1 podemos mencionar que dichos analistas usan adecuadamente la pipeta y esta funciona de manera correcta. CONCLUSIONES   

La micropipeta se encuentra calibrada y el analista es preciso, tomando en consideración el CV y el % de error del método gravimétrico (de referencia). Las alícuotas se deben tomar a la altura de los ojos para evitar paralaje. Para tomar alícuotas con micropipeta se debe meter únicamente un poco la punta (en la superficie) e ir bajando poco a poco con forme va bajando el líquido, para evitar que se queden pequeñas gotas en la punta y esto nos produzca variación.

REFERENCIAS. 

NORMA Oficial Mexicana NOM-008-SCFI-2002, Sistema General de Unidades de Medida.

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CIFRAS SIGNIFICATIVAS. (año NA). Disponible en: http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Cifrassignificativas_34597.pdf (07/03/19) Daniel C. Harris. Análisis químico cuantitativo. REVERTE,S.A. México.pp. 33-35.

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