Microbiologia Enterobacterias

SECCION ENTEROBACTERIAS

ENTEROBACTERIAS 40 géneros. 150 especies. 20 especies responsables de patología humana. Distribuidas en suelo, agua, alimentos. Flora normal del intestino de humanos y

ENTEROBACTERIAS

• MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES Bacilos cortos gram negativos, no esporulados, motiles (flagelos perítricos) o no, capsulados o no, pilis.

• BIOQUÍMICAS Anaerobios facultativos, catalasa positiva, oxidasa negativa, fermentan la glucosa, reducen nitratros nitritos.

ENTEROBACTERIAS • CULTIVO E IDENTIFICACIÓN MEDIOS DE CULTIVO 1. Medios no selectivos: agar sangre 2. Medios selectivos-diferenciales: agar McConkey, agar EMB McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa). Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa). 3. Medios altamente selectivos: SS agar, agar XLD, agar Hektoen entérico.

ENTEROBACTERIAS • CULTIVO E IDENTIFICACIÓN PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN 1. Pruebas bioquímicas 2. Pruebas serológicas 3. Pruebas de biología molecular

ENTEROBACTERIAS • CULTIVO E IDENTIFICACIÓN PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS Prueba TSI (triple azúcar hierro) Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g. Resultados: Superficie inclinada/fondo: - alcalina/alcalina: BGNF (Pseudomonas). - ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, etc

- alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.

TSI

TSI

ENTEROBACTERIAS OTRAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS Producción de ureasa Producción de indol Utilización del citrato Motilidad Descarboxilación de lisina, arginina, ornitina Producción de fenilalanina desaminasa Producción de H2S Prueba VP

ENTEROBACTERIAS ESTRUCTURA ANTIGÉNICA Antígeno O: Lipopolisacarido Antígeno K: Capsula Antígeno H: Flagelina

ENTEROBACTERIAS • Enterobacterias Enteropatógenas • Enterobacterias No Enteropatógenas

ENTEROBACTERIAS Enterobacterias enteropatógenas E. coli Salmonella Shigella Yersinia enterocolitica

ENTEROBACTERIAS Enterobacterias no enteropatógenas Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis Proteus vulgaris Enterobacter cloacae Cirobacter freundii Serratia marscence Morganella morgani Providencia

ENTEROBACTERIAS Enterobacterias no enteropatógenas Patologías Infección urinaria Meningitis Abscesos intraabdominales Neumonía Septicemia Abscesos cerebrales

ENTEROBACTERIAS

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Enterobacterias no enteropatógenas Factores de patogenicidad generales Endotoxina Cápsula Variación antigénica de fase (ag K y ag H) Sideróforos

ENTEROBACTERIAS E. coli Factores de patogenicidad específicos Pilis 1: manosa Pilis P: gal-gal (uroepitelio) Pilis de adherencia agregativa (AAF) (uroepitelio) Pilis AFC (factor de colonización) (epitelio intestinal) Pilis formadores de poros (BFP) (epitelio intestinal) Polisacárido capsular K1 (Acido sialico) antifagocitico Hemolisina alfa: formadora de poros

ENTEROBACTERIAS E. coli Patologías Infecciones urinarias Meningitis en RN Septicemia Neumonía Infección de heridas Infecciones intraabdominales Infecciones intestinales

E. coli

E. coli

ENTEROBACTERIAS Klebsiella Factores de patogenicidad específicos Pilis: adherencia a epitelios respiratorio y urinario. Cápsula antifagocítica Patologías K. pneumoniae y K. oxytoca: infecciones urinarias, neumonía y otras infecciones nosocomiales. K. rhinocleromatis: rinoecleroma K. ozaenae: ozena

Klebsiella pneumoniae

Klebsiella pneumoniae Cápsula

Klebsiella pneumoniae

ENTEROBACTERIAS Proteus Factores de patogenicidad específicos Pilis Ureasa Patologías Infecciones urinarias, bacteremia, neumonía. En pacientes debilitados.

Proteus

Proteus

ENTEROBACTERIAS Enterobacter Factores de patogenicidad específicos Pilis

Patologías Infecciones urinarias, septicemia.

Enterobacter

Enterobacter

ENTEROBACTERIAS Serratia Factores de patogenicidad específicos Pilis S. marcescens: pigmentos rojos Patologías Infecciones urinarias, bacteremia, neumonía. En pacientes debilitados.

Serratia

ENTEROBACTERIAS Enterobacterias no enteropatógenas Diagnóstico

- Muestras - Frotis - Cultivo e identificación: Cultivo: ASH, MacConkey o agar EMB (Lactosa positiva) Identificación: Prueba TSI: ácida/ácida Otras pruebas bioquímicas: Urea, citrato, indol, motilidad, descarboxilación de lisina, arginina, ornitina, VP.

ENTEROBACTERIAS Enterobacterias no enteropatógenas Tratamiento Antibiótico según antibioticograma Resistencia cromosomica Resistencia plasmidial

ENTEROBACTERIAS Enterobacterias enteropatógenas Escherichia coli Antígenos O: 150 diferentes Antígenos K Antígenos H Ej: E. coli O111:K76:H7

ENTEROBACTERIAS Enterobacterias enteropatógenas Escherichia coli Clasificación de las cepas productoras de diarrea E. coli enterotoxigénica E. coli enteropatógena E. coli enterohemorrágica E. coli enteroinvasiva E. coli enteroagregante

ENTEROBACTERIAS E. COLI EN TER OTO XIGÉNI CA Epidemiología: Diarrea infantil en países subdesarrollados Diarrea del viajero Serotipos O: 6, 8, 25, 78,115, 128 Patogénesis: Colonización del intestino delgado (pilis AFC) Enterotoxina LT y enterotoxina ET Aumento del AMPc Salida de agua y electrolitos Diarrea acuosa

ENTEROBACTERIAS E. CO LI EN TER OTO XI GÉN ICA Inmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración Tratamiento: Hidratación Oral o Parenteral Muchas veces no requiere antibióticos

ENTEROBACTERIAS E. COLI ENTEROPAT ÓGENA Epidemiología: Diarrea infantil en países subdesarrollados Diarrea en menores de 1 año (20 %) Transmisión oral-fecal Serotipos O: 26, 111, 55, 119, 128 Patogénesis: Colonización del intestino delgado Lesión de fijación/borramiento: pilis BFP, proteínas de secreción proteína intimina. Modificaciones del citoesqueleto: destrucción de actina de las microvellosidades. Alteración de la absorción Diarrea acuosa

ENTEROBACTERIAS E. CO LI EN TER OPA TÓ GE NA Inmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración Tratamiento: Hidratación Oral o Parenteral Antibióticos

ENTEROBACTERIAS E. C OL I E NT ER OHE MOR RÁGIC A Epidemiología: Diarrea en países desarrollados Asociado al consumo de carne bovina E. coli O: 157 H:7 Dosis infectante baja: 100 a 200 microorganismos

ENTEROBACTERIAS E. C OLI E NTE ROHEM ORRÁG ICA Patogénesis: Colonización del intestino grueso Pili AFC Lesión de fijación y borramiento Producción de una hemolisina Producción de toxina tipo Shiga o Verotoxina Lesiones hemorrágicas Diarrea con sangre Fijación de citotoxina al glomérulo renal y las plaquetas de la microcirculación. Síndrome Urémico-Hemolítico

ENTEROBACTERIAS E. COLI EN TER OHEMO RRÁ GIC A Tratamiento: Hidratación Oral o Parenteral Síndrome urémico-hemolítico: hospitalización No dar antibióticos

ENTEROBACTERIAS E. CO LI E NT ERO INVA SORA Epidemiología Diarrea con moco y sangre en niños menores de 5 años Relacionada con las Shigellas Trasmisión oral-fecal Único reservorio el hombre Serotipos O: 28, 29, 112, 143, 164 Patogénesis: Colonización de la mucosa del intestino grueso Proteínas Ipa: capacidad de invadir y producir úlceras en la mucosa colonica Dosis infectante alta Diarrea con moco y sangre (Síndrome disentérico)

ENTEROBACTERIAS E. CO LI E NT ERO AGREGAN TE Epidemiología: Diarrea con moco Diarrea crónica + 14 días Trasmisión oral-fecal Niños y lactantes Patogénesis: Colonización del intestino delgado (pilis adherencia agregativa) Formación de biopelícula mucosa Diarrea con moco

ENTEROBACTERIAS Diagnóstico de E. coli productoras de diarrea - Aglutinación en lámina con antisueros (Todas) - ELISA y sondas de ADN para detección de toxinas (ECET) - McConkey sorbitol: sorbitol negativa (ECEH) - Prueba de potencial enteroinvasivo en cultivos celulares (ECEI). - Sondas de ADN, patrones de adherencia agregativa en cultivos celulares (ECEAg)

ENTEROBACTERIAS Tratamiento

Quinolonas Trimetropin sulfa Ampicilina Prevención Hervir el agua Cocinar los alimentos Eliminar insectos como moscas Quimioprofilaxis

ENTEROBACTERIAS Enterobacterias enteropatógenas Shigella S. dysenteriae S. flexneri S. sonnei S. boydi

Shigella

ENTEROBACTERIAS Shigella

Epidemiología: Sólo infecta al hombre Dosis infectante de 200 microorganismos Niños de países subdesarrollados Hacinamiento Moscas y cucarachas Algunas cepas son toxigénicas (Toxina de Shiga) La especie más frecuente es S. flexneri La especie más virulenta es S. disenteriae

ENTEROBACTERIAS Shigella

Patogenia: Acido resistencia Invasión de las células M del colon Transcitosis Antígenos de invasión IpaA, IpaB, IpaC (plasmidos) Polimerización de la actina Lisis de la membrana Invasión de los enterocitos adyacentes Inducción de apoptosis Formación de las úlceras y microabscesos Toxina de Shiga: enterotóxica, citotóxica y neurotóxica Síndrome disentérico: diarrea con moco, sangre y pus

Shigella

ENTEROBACTERIAS Shigella Diagnóstico Muestra Frotis Cultivo: McConkey: lactosa negativo Agar SS: Salmonella-shigella agar Agar XLD: Xilosa-lisina-dexosicolato Identificación: TSI: alcalina/ácida, H2S negativo Serología: aglutinación en lámina con antisueros específicos.

ENTEROBACTERIAS Shigella Tratamiento

Antibióticos Ampicilina, Trimetropin-sulfa, Quinolonas, Cef de 3° g No usar antiespasmódicos ni antidiarreicos Prevención Saneamiento ambiental Control de insectos Cocción de los alimentos

ENTEROBACTERIAS Enterobacterias enteropatógenas Salmonella Clasificación S. enterica, subespecie enterica Serotipos S. enteritidis S. typhimurium S. typhi S. paratyphi A S. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri) S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)

Salmonella

ENTEROBACTERIAS Salmonella Epidemiología: Todas los serotipos, excepto S. typhi y S. paratyphi, infectan al hombre y animales como mamíferos, aves y anfibios Dosis infectantes 1000 microorganismos Productos aviarios: huevos crudos Sociedades industrializadas Más frecuente en época de calor El uso de antiácidos aumenta la incidencia Niños menores de 5 años y mayores de 70 años. Portadores crónicos (vesícula biliar) Mascotas como tortugas o ranas Producen diarrea o fiebre entérica

Salmonella

ENTEROBACTERIAS Salmonella Patogénesis: La adherencia produce ondulaciones en la superficie celular Invade células M del intestino delgado y grueso Sistema de invasión PAI (invA, invB, spaP, spaQ) Formación de una vacuola endocitica Trascitosis Fagocitosis por los macrófagos intestinales Invasión del torrente linfático y luego circulatorio Apoptosis Inflamación y ulceración

ENTEROBACTERIAS Salmonella

Epidemiología : El reservorio es el Hombre Se trasmite únicamente Hombre-Hombre Portador crónico en la vesícula biliar Trasmisión oral-fecal Manipuladores de alimentos Dosis infectante moderada 105 a 106 Patogénesis de la Fiebre Tifoidea Factor de virulencia Vi (capsula) inhibe la fagocitosis por los PMN Invade células M del intestino delgado y grueso Transcitosis Fagocitosis por los macrófagos intestinales Multiplicación dentro del macrófago Invasión del torrente linfático: Colonización de los órganos del SER (ganglios mesentéricos, bazo, hígado y medula ósea), invade torrente circulatorio y siembra a distancia

ENTEROBACTERIAS Salmonella Patologías: Gastroenteritis Bacteriemia e infección a distancia Fiebre tifoidea o paratifoidea

Fiebre tifoidea

Fiebre tifoidea

Fiebre tifoidea

ENTEROBACTERIAS Salmonella enteritidis Diagnóstico Coprocultivo Agar MacConkey lactosa negativo SSA Agar XLD TSI: alcalina/ácida y formación de H2S Serología

ENTEROBACTERIAS S. typhi Diagnóstico - Cultivos: Primera semana: hemocultivo Segunda semana: coprocultivo Tercera semana: urocultivo Cuarta semana: mielocultivo - Prueba de Widal

SALMONELLA SSA

Salmonella XLD

ENTEROBACTERIAS Salmonella Tratamiento Síndrome diarreico uso discutido de antibióticos Fiebre tifoidea: cloranfenicol, cefalosporinas, quinolonas

ENTEROBACTERIAS Salmonella Prevención Higiene ambiental Higiene personal Cocción de los alimentos Vacuna de bacterias inactivadas Vacuna de bacterias vivas atenuadas Eliminación de los portadores sanos de S. typhi

ENTEROBACTERIAS Enterobacter ias enteropatógenas Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis Epidemiología: Animal-Hombre Alimentos o aguas contaminadas Países Escandinavos y Europa Tasa baja de aislamiento

Yersinia enterocolitica

ENTEROBACTERIAS Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis Patogenia: Invaden las células M de la placas de Peyer Proteína invasina se fija a las integrinas Proteínas de la membrana exterior de Yersinia (pmeY) Efectos citotóxicos: alteración de procesos bioquímicos como desfosforilizacion, cinasa de la serina Genes PAI: sideroforos Multiplicación en las células del SER Ganglios mesentéricos Formación de microabscesos Diseminación

ENTEROBACTERIAS Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis Patologías Linfaadenitis mesentérica Enterocolitis Fiebre intestinal Síndrome poliartritico Ileitis terminal Tratamiento Ampicilina, cefalosporina, tetraciclina, cloranfenicol Y. enterocolitica resistente a penicilina y cefalosporina (betalactamasas)