Les Streptococcus
Aspect microscopique
Streptococoques: Coques en longue chaînette Gram +
Pneumocoques: Coques regroupés par 2 et capsulés Gram +
Entérococcus: Coques ovoïde regroupés en petite chaînette Gram +
Tests complémentaires à l’étude des Streptococcus Test de résistance à la bacitracine et à l’optochine
Ensemencer la gélose en quadrant
OPT
BAC
Déposer sur le quadrant 1 et 2: un disque antibiotique d’optochine un disque antibiotique de bacitracine
Incuber 24 heures à 37°C
Lecture de la résistance à la bacitracine Culture autour du disque d’antibiotique les bactéries sont résistantes à la bacitracine
Zone d’inhibition d’au moins 12 mm autour du disque d’antibiotique les bactéries sont sensibles à la bacitracine Remarque: un Streptococcus sensible à la bacitracine et β hémolytique suspicion de Streptococcus du groupe A (à confirmer avec un groupage)
Lecture de la résistance à l’optochine Culture autour du disque d’antibiotique ou zone d’inhibition peu importante les bactéries sont résistantes à l’optochine
Zone d’inhibition autour du disque d’antibiotique > 12 mm les bactéries sont sensibles à l’optochine Remarque: un Streptococcus sensible à l’optochine et α hémolytique suspicion d’un pneumocoque.(à confirmer par une identification antigénique)
Groupage des Streptococcus 1 ère étape: extraction de l’Ag à identifier Elle consiste en l’extraction de l’Ag polyosidique C sous l’action d’une enzyme. On obtient un extrait antigénique (solution contenant l’Ag). Prélever une colonie suspecte sur la gélose et l’émulsionner dans le réactif d’extraction
Incuber 15 min à 37°C
2nde étape: formation du complexe Ag-Ac
1 goutte de particule de latex sensibilisé anti A ou B … 1 goutte d’extrait
Réaction d’agglutination Identification du Streptococcus par rapport au latex sensibilisé.