Microbiologie médicale
I-
ECB du LCR
Aspect microscopique : L’examen du LCR est un examen d’urgence, le liquide céphalorachidien normal est normal est clair, appelé classiquement « Eau de Roche » et les modifications peuvent donner :
LCR hémorragique : Ce qui témoigne d’une extravasation sanguine au niveau des méninges, ceci peut être visible ou bien mis en évidence après centrifugation, dans ce cas on observe un culot surmonté d’un surnageant clair, si ce dernier est jaunâtre --> l’hémorragie est ancienne et il est appelé xanthochromique (Leptosperia). L’hémorragie méningée est facilement différenciée d’une hémorragie par piqure en réalisant le prélèvement sur trois tubes (seul le 1er et parfois le 2ème contiennent des hématies dues à la piqure).
Aspect trouble : C’est une modification due à une hyperleucocytose ; - Lymphocytaire : méningite virale ou tuberculeuse ; - Polynucléaire : méningite bactérienne.
II-
Cytologie quantitative : C’est la numération cellulaire qui se fait soit sur cellule de Malassez ou sur cellule de Nageotte. Apprécier les leucocytes, les hématies, la présence de bactéries et de certains parasites et faire la numération (x40).
III-
Cytologie qualitative : Elle se fera après coloration au MGG sur le culot de centrifugation du LCR (détermination du type de leucocytes). 5 mn de May-Grunwald ; rajouter la même quantité d’eau pendant 1 mn ; Rincer ; rajouter pendant 15 mn du Giemsa ; Rincer ; sécher. Observer au grossissement (x100), le cytoplasme rose et noyau en bleu, le surnageant servira à la recherche d’Ag solubles (agglutination de particules de Latex sensibilisées aux Ac spécifiques aux Ag). Lorsque le LCR est fortement hémorragique, on utilise la solution de LAZARUS qui : Elimine les hématies ; Colore les leucocytes.
IV-
Culture : Elle se fait sur deux milieux de cultures (gélose à sang frais et une autre à sang cuit) incubé sous CO2 pendant 24 à 48H à 37°C.
V-
Chimie : Elle consiste à faire 3 déterminations : -
Glucorachie ; Protéinorachie ; Chlorurachie.
La confrontation des analyses cytologiques, bactériologiques et chimiques permettra dans l’heur qui suit de déterminer le type de méningite. RAFUNIT | UDL
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ECB du LCR
Toutefois, il n’est pas rare que pour diverses raisons : Mise en œuvre prématurée d’un TRT antibiotique ; Rareté des éléments microbiens ; Rareté des cellules à l’examen direct. =>> Le diagnostique étiologique ne soit pas posé.
VI-
Caractéristiques des différentes méningites :
Aspect Protéïnorachie (0,3 < N < 0,5 g/l) Glucorachie 0,42 < N < 0,74 Chlorurachie 120 mEq/ml
Eau de Roche
Méningite purulente Trouble
< 0,30
Jusqu’à 3 g/l
Jusqu’à 1 g/l
N
Inférieure ou 0
Diminuée
Normale
120 m Eq/l
Normale
Normale ou basse
Normale
Cellule/mm3
0 à 2 C/mm3
> 103 C/mm3
100 – 500 C/mm3
≈100 C/mm3
Type cellulaire
Mononuclée
PN
LYM
LYM
Négative
(+)
(+)
Négative
Négative
(+)
(+)
Négative
LCR normal
Présence de bactéries. Présences de bactéries après culture. •
VII-
Méningite tuberculeuse Claire
Méningite virale Claire Elevé mais < 1 g/l
Cas particuliers : - Si le LCR est normal alors que la glucorachie est élevée (diabétique) ; - LCR pauvre en éléments nucléés et riche en germes => Méningite débutante ; - Méningite à Listeria => la formule est mixte (formule panachée PN + LYM).
Identification des germes : Elle est basée sur l’aspect macroscopique des colonies + Gram : - C GN Neisseria meningitidis (grain de café) ; - C GP Streptococcus pneumoniae (en flamme de bougie) ; Streptococcus β hémolytique grp B surtout chez le nouveau né (chaînette) ; Staphylococcus aureus (coagulase +)(grappe de raisin) ; - BGN E. Coli de sérotype K1 ; Pseudomonas aeruginosa ; Haemophilus influenzae ; - BGP Listeria monocytogenes ; - Bactérie spiralée Treponema pallidum ; Leptospira interrogans ; - Agents mycosiques Candida albicans ; Cryptococcus neoformans ; - Ne pas oublier les amibes libres (Acanthamoeba & Neglerria). RAFUNIT | UDL
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