Bab Iii.docx

BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Rumus MPN 1. Perhitungan dengan menggunakan tabel Rumus : ¿ Niai MPN berdasarkan tabel x

10 Volume Tes

2. Perhitungan tidak menggunakan table Rumus : ¿

Jumlah ml tabung positif x 100 √ Jumlah ml tabung negatif x jumlah ml tabung Tabel 3.1 Nilai MPN (Most Probable Number)

3.2 Alat dan Bahan 3.2.1 Tes Pendugaan (Presumtive Test) Tabel 3.2 Alat dan Bahan Tes Pendugaan (Presumtive Test) No.

Nama Alat

Ukuran

Jumlah

Nama Bahan

Jumlah

1.

Tabung Reaksi Tabung

-

9

Larutan Laktosa

-

-

9

Sampel Air

-

2.

Durham

3.

Kawat Ose

-

1

-

-

4.

Korek Api

-

1

-

-

5.

Bunsen

-

1

-

-

3.2.2 Tes Konfirmatif (Confirmed Test) Tabel 3.3 Alat dan Bahan Test Konfirmatif (Confirmed Test) No.

Nama Alat

Ukuran

Jumlah

1.

Tabung Reaksi

-

1

-

1

Medium BGLB

-

2.

Tabung Durham

Nama Bahan Sampel Positif Tes Pendugaan

Jumlah -

3.

Kawat Ose

-

1

Medium EMB

-

4.

Korek Api

-

1

-

-

5.

Bunsen

-

1

-

-

3.2.3 Tes Pelengkap (Completed Test) Tabel 3.4 Alat dan Bahan Tes Pelengkap (Completed Test) No.

Nama Alat

Ukuran

Jumlah

1.

Tabung Reaksi

-

1

Nama Bahan Sampel Positif Tes Konfirmatif

Jumlah -

No. 2.

Nama Alat Tabung Durham

Ukuran

Jumlah

-

1

3.

Kawat Ose

-

1

4.

Korek Api

-

1

Nama Bahan Larutan Kaldu Laktosa Medium Agar Miring Cawan Petri berisi sampel EMB dari

Jumlah -

-

tes sebelumnya 5.

Bunsen

-

1

-

-

6.

Pipet Mikron

-

1

-

-

3.2.5 Pewarnaan Gram Tabel 3.5 Alat dan Bahan Pewarnaan Gram No.

Nama Alat

Ukuran

Jumlah

Nama Bahan

Jumlah

1.

Tabung Reaksi

-

1

Aquades

-

-

1

Alkohol

-

2.

Tabung Durham

3.

Kawat Ose

-

1

Lodium gram

-

4.

Korek Api

-

1

Kristal Violet

-

5.

Bunsen

-

1

Safranin

-

6.

Mikroskop

-

1

Lugol

-

7.

Penjepit Kayu

-

1

-

-

8.

Glass Cover

-

1

-

-

9.

Kaca Preparat

-

1

-

-

3.3 Cara Kerja 3.3.1 Tes Pendugaan (Presumtive Test) Table 3.6 Cara Kerja Tes Pendugaan (Presumtive Test) No

Cara Kerja

Gambar

. 1.

Ambil 1 ml air sampel pada tabung reaksi.

2.

Ambil ketiga tabung reaksi yang berisi kaldu laktosa untuk pengenceran 10−1 .

3.

Masukkan 1 ml sampel ke dalam tiga tabung reaksi yang berisi kaldu

laktosa

untuk pengenceran 10−1 .

4.

Ulangi langkah tersebut untuk pengenceran 10−2

10−3 .

3.3.2 Tes Konfirmatif (Confirmed Test) Table 3.7 Cara Kerja Test Konfirmatif (Confirmed Test) No . 1.

Cara Kerja

Gambar

Ambil kawat ose, kemudian sterilkan diatas bunsen.

2.

Ambil sampel pada tabung reaksi berisi tes pendugaan

paling

positif

dengan

menggunakan kawat ose.

3.

Osekan sampel yang paling positif ke cawan petri berisi EMB. Lalu inkubasikan pada suhu 37oC selama 48 jam.

4.

Ambil sampel pada tabung reaksi berisi tes pendugaan

paling

positif

dengan

menggunakan pipet mikron sebanyak 1 ml.

No . 5.

Cara Kerja

Gambar

Masukkan sampel pada tabung reaksi berisi tes pendugaan paling positif kedalam larutan BGLB. Lalu inkubasikan pada suhu 37oC selama 48 jam.

3.3.3 Tes Pelengkap (Completed Test) Table 3.8 Cara Kerja Tes Pelengkap (Completed Test) No . 1.

Cara Kerja

Gambar

Siapkan satu medium agar miring dan kaldu laktosa.

2.

Hidupkan

api

pada

menggunakan korek api.

bunsen

dengan

No

Cara Kerja

. 3.

Sterilisasi kawat ose yang akan digunakan.

4.

Ambil sempel pada EMB menggunakan kawat ose.

5.

Masukkan sampel tersebut pada tabung reaksi dengan kawat ose yang berisi kaldu laktosa, kemudian diinkubasi selama 37°C selama 48 jam.

6.

Ambil menggunakan kawat ose pada cawan petri yang bersisi sampel EMB yang telah diinkubasi.

Gambar

No . 7.

Cara Kerja

Gambar

Masukkan sampel tersebut pada medium agar miring dengan digoreskan secara zigzag, kemudian diinkubasi selama 37°C selama 48 jam.

3.3.4 Tes Pewarnaan Gram Table 3.9 Cara Kerja Pewarnaan Gram No . 1.

Cara Kerja

Hidupkan

api

pada

bunsen

Gambar

kemudian

lakukan fiksasi pada kaca obyek.

2.

Sterilisasi kawat ose yang akan digunakan.

No . 3.

Cara Kerja Ambil sampel mikroba dengan kawat ose.

Gambar Percobaan minggu depan rabu 14 11 2018

3.

4.

Letakkan ose mikroba pada kaca preparat.

Teteskan pewarana kristal violet sebanyak 12 tetes, lalu ditunggu selama 1 menit

5.

Cuci kaca obyek dengan menggunakan air suling. Lalu keringkan kaca obyek dengan diangin-anginkan.

No . 6.

Cara Kerja

Gambar

Teteskan 1-2 tetes lugol, lalu diamkan selama 1 menit.

7.

Cuci kaca obyek dengan menggunakan alcohol setetes-setetes selama 45 detik. Lalu dikeringkan dengan diangin-anginkan.

8.

Teteskan pewarna Safrani, dan didiamkan selama 30 detik.

9.

Cuci

kembali

kaca

menggunakan air suling.

obyek

dengan

No . 10.

Cara Kerja

Gambar

Fiksasi kembali kaca obyek dengan cara mengangin-anginkan.

BAB IV HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Pengamatan 4.1.1 Tes Pendugaan Tabel 4.1 Hasil Pengamatan Tes Pendugaan No

Keteranga

. 1.

n Sampel 6

Hasil Pengamatan

−1

10

A1

B1

C1

Keterangan:

Keterangan:

Keterangan:

No

Keteranga

.

n

2.

Sampel 6

Hasil Pengamatan

−2

10

3.

A2

B2

C2

Keterangan:

Keterangan:

Keterangan:

A3

B3

C3

Keterangan:

Keterangan:

Keterangan:

Sampel 6 −3

10

4.1.2 Tes Konfirmasi Tabel 4.2 Hasil Pengamatan Tes Konfirmasi No .

Hasil Pengamatan

Gambar

1.

Sampel 6 - Keterangan: Warna mengkilap logam. - Hasil: Hampir pasti ada Fecal coliform.

Sampel EMB 2.

Sampel 6 - Keterangan: Keruh dan ada oksigen. - Hasil: Hampir pasti ada Fecal coliform.

Sampel BGLB

4.1.3 Tes Pelengkap Tabel 4.3 Hasil Pengamatan Tes Pelengkap No . 1.

Hasil Pengamatan - Media: Kaldu laktosa - Kekeruhan: +++ - Okesigen: ++

Gambar

2.

- Media: Na miring - Hasil: Tumbuh bakteri

4.1.4 Pewarnaan Gram Tabel 4.4 Hasil Pengamatan Pewarnaan Gram No . 1.

Kelompok

Hasil Pengamatan - Bentuk: - Gram: - Warna:

2.

- Bentuk: - Gram: - Warna:

3.

- Bentuk: - Gram: - Warna:

Gambar

No . 4.

Kelompok

Hasil Pengamatan - Bentuk: - Gram: - Warna:

5.

- Bentuk: - Gram: - Warna:

6.

- Bentuk: - Gram: - Warna:

7.

- Bentuk: - Gram: - Warna:

Gambar

No

Kelompok

. 8.

Hasil Pengamatan - Bentuk: - Gram: - Warna:

4.2 Perhitungan Menggunakan rumus MPN 1. Perhitungan dengan menggunakan tabel Rumus : 460 l x

10 =138,138 sel/100 ml 33,3

2. Perhitungan tidak menggunakan table Rumus : 33,1 x 100 =496,99 sel/100 ml √0,2 x 6,66

Gambar