Anticuerpos Antinucleares

ANTICUERPOS ANTINUCLEARES (ANA) SINONIMO •

ANA- ANF- FANA

MÉTODO Inmunofluorescencia indirecta. En estas técnicas el anticuerpo que reconoce el antígeno no está marcado sino que se utiliza un segundo anticuerpo conjugado con el fluorocromo y dirigido contra la especie del primero. Una variante de estas técnicas es la que utiliza el primer anticuerpo conjugado con biotina y posteriormente se añade avidina o estreptavidina conjugada con el fluorocromo.

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Inmunofluorescencia indirecta (IFI) sobre placas de tejidos o células monocapas. Los resultados pueden variar con el substrato de la prueba (SS-A/Ro puede ser detectados sobre células Hep-2) pero nó de riñon de ratón. Sustrato: -Hígado de rata -Células HEp- 2 (Hep-2 HUMAN EPITHELIOMA TYPE 2 CELLS CCL-23,de AMERICAN TYPE CULTURE COLLECTION)

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Las ventajas de utilizar HEp-2 sobre los tejidos de roedores son varias: • • • •

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1-Es un sustrato más sensible, permitiendo la identificación de más patrones fluorescentes, debido a la más alta concentración de antígenos. 2- Al ser de origen humano tiene mayor especificidad que los tejidos animales. 3- El núcleo y los nucleolos son más grandes y permiten la visualización de los detalles de los complejos nucleares, incluyendo proteínas y ácidos nucleicos. 4 -Presentan células en división, lo que permite detectar anticuerpos dirigidos contra antígenos sólo presentes en células con rápido proceso de división (ej. centrómero) y en base a estas células se pueden diferenciar imágenes. 5 -No hay oscurecimiento de la matriz intercelular. 6 -La distribución antigénica es uniforme.

MUESTRA: • Suero ALMACENAMIENTO: • Estable 2 días a temperatura ambiente; refrigerado: 7 días y congelado:1 año. CONTRAINDICACIONES: • Muestras severamente contaminadas, lipémicas y hemolisadas. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación. VALORE DE REFERENCIA: • •

Negativos. Si el test de fluorescencia para ANA es positivo, los anticuerpos se pueden cuantificar y especificar su tipo, para evidenciar el diagnóstico y el manejo de la enfermedad.

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La dilución de screening es de 1/20, 1/40 o 1/80, un pequeño porcentaje de pacientes con LES pueden tener un título menor que la dilución de screening. Más del 50 % de los mayores de 80 años tienen títulos bajos. Títulos mayores a1/160 indica presencia de LES activo. Imágenes de anticuerpos antinucleares por inmunofluorescencia

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GENERALIDADES Los ANA son globulinas gamma que reaccionan con las células del todos los órganos, ya sean de humanos o animales. Los ANA suelen pertenecer varias clases de inmunoglobulinas. Una prueba efectiva fluorescente de ANA detecta aproximadamente 95% de los casos de lupus eritrematoso generalizado (SLE). •

Esta prueba se utiliza en el diagnostico diferencial de las enfermedades reumáticas y para detectar antinucleoproteinas y patrones relacionados con ciertas enfermedades autoinmunitarias.

El SLE tiene un patrón específico de anticuerpos, que es distinto de la esclerodemia, del síndrome de Sjorgen, de la enfermedad de Raynaud, etc. Aunque al titulación de ANA no es siempre se correlaciona con el cuadro clínico, la mayoría de los pacientes con LES padecen titulaciones elevadas y el patrón de tinción es homogéneo y periférico (RIM). Sin embargo, también puede haber patrones moteados o nucleolares. UTILIDAD CLINICA 1. Este test se utiliza como tamizaje de enfermedades autoinmunes, de lupus eritematoso sistémico (LES) y hepatitis crónica activa. 2. Screening en poblaciones con sospecha clínica de enfermedades autoinmunes citados en el significado clínico.

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3. Screening para LES (por su falta de especificidad) y otras enfermedades reumáticas y autoinmunes, incluyendo tiroiditis y enfermedades hepáticas (ej. hepatitis autoinmunes) el ANA es un marcador de LES y desórdenes relacionados. 4. Cuando son negativos hacen el diagnóstico de LES improbable pero no lo descarta. Este test no es específico de ninguna enfermedad vascular del colágeno SIGNIFICADO CLINICO La prueba de ANA es positiva a una titulacion de 1.20 -1:40 (depende de cada laboratorio), principalmente mediante inmunofluoresecia indirecta. Un resultado positivo no necesariamente confirma determinada enfermedad. En individuos aparentemente sanos también se observan titulaciones bajas de anticuerpos antinucleares. Los resultados de las pruebas positivas de acuerdo con cada enfermedad son los siguientes: LES y hepatitis lupiode

>95%

Esclerodermia

60-70%

Artritis reumatoide

25-30%

Síndrome de sjorgen

50-60%

Dermatomiositis

10-50%

Poliarteritis

10%

OTRAS PRUEBAS QUE CONFIRMAN LES SON: • • •

Anti-dsDNA CH50 Biopsia renal o cutánea

Las pruebas control cuando se obtiene resultados positivos de ANA incluyen a los anticuerpos contra el DNA de cadena doble DNA (ds), contra antígenos nucleares esenciales (anti-RNP, anti-Smith), antiSSA, también conocido como Ro, anti-SSB, también conocido como La, antiesclerodermia Scl-70 y anti-centrómero, también conocido como anticuerpo CREST. INTERFERENCIAS Variables por drogas: •

Varios medicamentos pueden inducir una condición lupoide y elevados títulos de ANA.

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• •

Usualmente decrecen luego de sacar la droga. Los sujetos con lupus inducido por droga pueden tener anticuerpos antifosfolipídicos con complicaciones tromboembólicas.

Aumentado: captotril, labelatol, nitrofurantoína, fenitoína, propiltiouracilo, quinidina. Da falsos positivos con acebutalol, anticonvulsivantes, etosuximida, penicilina, anticonceptivos, metildopa, isoniacida, hidralazina, procainamida, clorpromazina, isoniacida, metildopa, atenolol, carbamazepina, labetolol, penicilamina, fenilbutazona, levodopa ,litio, mexiletina, oxyfenisatina, penicilamina ,fenitoina, tocainamida, trimetadiona, ácido paraaminosalicílico ,griseofulvin, mefenitoina, trimetadiona, grupo hidantoina, primidona.

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http://www.lablasamericas.com.co/newDB/examenes.php?codigo_examen=A456 http://www.uv.es/derma/CLindex/CLdermatopat/CLdermatopatologia.html http://www10.uniovi.es/citometria/Aplicacion1.htm http://www.farestaie.com.ar/te/bc/072.htm http://www.lablasamericas.com.co/newDB/examenes.php?codigo_examen=A456

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