Pendahuluan.docx

  • Uploaded by: Meri Eka Feby Agustin
  • 0
  • 0
  • April 2020
  • PDF

This document was uploaded by user and they confirmed that they have the permission to share it. If you are author or own the copyright of this book, please report to us by using this DMCA report form. Report DMCA


Overview

Download & View Pendahuluan.docx as PDF for free.

More details

  • Words: 661
  • Pages: 2
Pendahuluan Terapi kanker yang ditargetkan memberikan dokter cara alternatif untuk menyesuaikan pengobatan kanker dengan hasil pasien yang lebih baik dan efek samping yang lebih sedikit. DDX3, anggota keluarga RNA helicase DEAD-box, terlibat dalam respon stres seluler dengan mengendalikan apoptosis, transformasi seluler, proliferasi melalui jalur Wnt, dan non-homolog akhirnya bergabung. Karena itu, DDX3 bisa menjadi target yang menarik dalam terapi kanker. Senyawa baru yang menghambat aktivitas DDX3 telah dikembangkan baru-baru ini, dengan diimidazo trisiklik 5: 7: 5-difusi [4,5-d: 40,50-f] cincin diazepine (ditunjuk sebagai RK-33) untuk pengobatan kanker. RK-33 secara efektif menghambat DDX3 dan terbukti menginduksi penangkapan G1 dengan sedikit atau tanpa toksisitas pada tikus. Namun, karena hidrofobisitas RK-33, kami memulai pengembangan formulasi alternatif RK-33 menggunakan nanopartikel (NP). NP memungkinkan enkapsulasi berbagai macam obat, seperti obat hidrofilik, obat hidrofobik, makromolekul, dan pada saat yang sama meningkatkan sifat fisikokimia dan farmakokinetik mereka. Polimer biodegradable yang paling banyak digunakan untuk NP adalah poli (asam laktat-ko-glikolat) (PLGA), yang terdiri dari poli (asam laktat) (PLA) dan poli (asam glikolat) (PGA). PLGA dihidrolisis menjadi monomer dan mudah dimetabolisme, sehingga memastikan toksisitas sistemik minimal PLGA. NP PLGA telah terbukti cocok untuk pengiriman sistemik dan pelepasan terkontrol agen terapi hidrofobik di sejumlah aplikasi biomedis. Dalam penelitian ini, kami menyiapkan dan mengkarakterisasi NP berbasis PLGA dari RK-33 untuk memaksimalkan utilitas klinis masa depan dari RK-33.

material dan metode Bahan kimia, garis sel, dan hewan Kopolimer poli (D, L-laktida-ko-glikolida) (PLGA, MW = 40-75 kDa), poli (etilena glikol) -blok-poli (propilen glikol) -blockpoly (etileneglikol) (PEG-PPG-PEG, rata-rata MW = 8,4 kDa) dibeli dari Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA). Tikus athric NCr-nu / nu betina (4-5 minggu) dibeli dari NCI Frederick. Tikus dipelihara dalam kondisi bebas patogen dan diberi makanan dan air sesuai dengan pedoman dari Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan Universitas Johns Hopkins.

Persiapan nanopartikel PLK RK-33 NP PLGA yang menggabungkan RK-33 disiapkan menggunakan metode penguapan pelarut emulsi. Secara singkat, 200 mg PLGA dan 10 mg RK-33 dilarutkan dalam 20 Ml

diklorometana dan perlahan-lahan ditambahkan ke 30 mL PBS yang mengandung 1% PVA, 0,2% PEG-PPG-PEG, 1% NaCl sementara disonikasi pada es selama 8 menit. Selanjutnya, diklorometana diuapkan, dan NP dicuci dengan air murni lima kali, diliofilisasi, dan disimpan pada suhu -20 ° C sampai digunakan. Untuk mengoptimalkan enkapsulasi RK-33, kami menyiapkan NP dengan dua rasio PLGA-RK-33 yang berbeda: 20: 1 (5%) dan 10: 1 (10%).

Karakterisasi nano partikel PLGA Untuk menentukan ukuran partikel, distribusi ukuran, dan potential-potensial dari PLGA NP, pengukuran laser-lightscat dinamis (DLS) dilakukan menggunakan Zetasizer Nano-ZS90 dengan sistem laser He-Ne , yang dioperasikan pada 633nm dan 25 ± 1 ° C, dan cahaya yang tersebar diukur pada sudut 90°. Untuk menentukan potensi ζ, NP didispersikan dalam 10 mM NaCl. Morfologi NP PLGA ditandai dengan mikroskop elektron pemindaian. Untuk persiapan sampel, NP PLGA didispersikan dalam air murni (0,05 mg/mL), dan tetesan-tetesan tersebut dikeringkan pada permukaan kaca penutup pada suhu kamar, dan kemudian dilapisi dengan kotoran emas dari vapo pada pelapis halus otomatis. Jumlah pemuatan RK-33 ditentukan oleh kromatografi cair kinerja tinggi reversefase (HPLC) dengan detektor UV. Analisis kuantifikasi dengan HPLC dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya, dengan modifikasi kecil. Untuk rilis burst, 0,5mg PLGA dilarutkan dalam asetonitril 1mL. Untuk karakteristik rilis, 1.6mg

NP didispersikan dalam 2mL

PBS/1% Tween 20 dan dibagi menjadi lima tabung terpisah. Sampel-sampel ini diinkubasi dalam shaker pada suhu 37 °C, dan alikuot dari masing-masing sampel dianalisis pada titik waktu yang telah ditentukan. NP pertama kali dipintal, setelah itu 30 μL supernatan ditambahkan ke asetonitril 70 μL. Setelah vorteks, 20 μL larutan sampel disuntikkan langsung ke pompa HPLC biner Waters 1525 yang dilengkapi dengan kolom fase terbalik Waters Symmetry® C18 (4,6 mm × 150 mm) dan Kolom Penjaga Waters Ultrahydrogel Waters (6,0 mm × 40 mm). Detektor absorbansi dual λ Waters 2487 ditetapkan pada 390 nm. Asetonitril dan HO digunakan sebagai fase gerak masing-masing pada 75 dan 25%. Laju aliran adalah 1 mL / menit, dan analisis HPLC dilakukan pada suhu kamar. Program Breeze 3.30 digunakan sebagai perangkat lunak akuisisi dan analisis. Eksperimen mengenai karakteristik pelepasan diulangi dengan dua batch berbeda.

More Documents from "Meri Eka Feby Agustin"