Lucrari-practice-1.docx

Lucrări practice 1. 1. Organizarea laboratorului clinic

1.1.Compartimentarea si echipamentul laboratorului clinic

Obligatoriu: Camera de lucru: -

masa de lucru – faiantata sau prevazuta cu suprafata lavabila, care se poate spala si dezinfecta cu solutiile de dezinfectie uzuale, sa reziste la eventualele acizi si baze, la substante corozive si la caldura;

-

nişa în flux laminar, de preferinta de clasa a II-a, care asigura si protectia personalului (prevazuta cu lampă UV, cu filtru HEPA, racordare la gaz, la nevoie);

-

incubator (cu CO2 şi temperatură reglabile);

-

microscop cu fază inversată;

-

microscop optic cu lumină vizibilă şi in fluorescentă;

-

centrifuge (cu rotor batant si rotor fix, 4000 rpm, timp şi temperatură reglabile, pentru tuburi de diferite mărimi, microplăci, citocentrifugare);

-

dulapuri cu sticlarie, respectiv cu consumabile sterile;

Camera pentru pastrarea mediilor si reactivilor la temperaturi potrivite: -

frigidere (+ 4-20 ºC; -70 ºC);

-

rezervoare cu azot lichid (-170ºC);

-

dulapuri la temperatura camerei;

Incaperi prevazute cu dulapuri speciale metalice pentru pastrarea reactivilor (acizi, baze, organice, coloranti etc); Incapere speciala pentru balante, prevazuta cu masa solida construita de preferinta din beton; Spălător (robinet cu apă curentă, rezervor cu apă distilată, detergenţi, dezinfectanţi); Spaţiu amenajat sterilizării (etuvă, autoclav); Prefiltru (cuiere pentru halate, prevăzut cu lampă UV).

1

Beneficial: -

numarator de celule (cell counter);

-

pompă de vid;

-

pH metru;

-

camere video, monitoare;

-

flow-citometru;

-

aparate automate pentru analize de laborator (hematologice, biochimice, imunologice etc);

-

cititor ELISA;

-

filtru pentru apă distilată;

-

calculatoare, internet.

Consumabile: -

vase de cultură (flacoane, plăci Petri, microplăci de unică folosinţă);

-

tuburi de centrifugă (15-50 ml, cu fund rotund, în V, gradate, negradate, rezistente la t şi p ridicate);

-

criotuburi (pentru congelarea specimenelor, 2 ml);

-

pipete automate (5-10 μl, 50-200 μl, 200-1000μl, 1-5 ml);

-

pipete de sticlă (10 ml), dispenser;

-

vârfuri de pipete (tipsuri de diferite mărimi);

-

lame, lamele, camere de numărat celule;

-

sticlărie (pahare Berzelius, baloane Erlenmeyer, cilindri gradaţi, pâlnii etc.) + sticlarie speciala pentru diverse analize;

-

ace, seringi;

-

markere rezistente la apa si temperaturi joase, hartie de filtru, leucoplast, pense, foarfeci;

-

stative pentru tuburi cu diverse diametre;

-

baterii pentru colorat lame;

-

galeti speciale pentru adunarea reziduurilor.

2

Materiale: - reactivi pentru tehnicile uzuale hematologice, biochimice sau imunologice; - medii de cultură (RPMI-1640; DMEM; F-12; speciale); - tampoane (PBS, HBSS); - ser fetal bovin (FCS); - antibiotice (Streptomicină, Penicilină, Gentamicină), antimicotice ( Fungizone); - suplimente de medii (aminoacizi-glutamină, factori de creştere); - coloranţi (Tripan-blue, Giemsa, May-Grunwald etc). 1.2. Măsuri de siguranţa personalului - igiena personalului: - halat (curat, sterilizat la UV); - papuci (sterilizate la UV); - părul prins; - mănuşi de protecţie; - mâini spălate şi dezinfectate cu alcool 70% - atenţie la : - sticlărie spartă, obiecte ascuţite, substanţe chimice, gaze naturale, azot lichid, foc, radiaţii (UV, gamma), probe biologice (sânge, biopsii, tumori), electricitate. 1.3. Asigurarea condiţiilor de asepsie şi sterilitate Asigurarea condiţiilor de asepsie în încăperi: -

spălare zilnică a pardoselii cu apă cu detergent;

-

dezinfectare zilnică a pardoselii cu un dezinfectant pe bază de clor;

-

spălare şi dezinfectare săptămânală a pereţilor şi a mobilierului;

-

dezinfectare zilnică a nişei şi a suprafeţelor cu dezinfectant special sau cu alcool 70%;

-

dezinfectare

săptămânală

a

incubatorului

(prin

flambarea

rafturilor,

dezinfectarea pereţilor interiori cu alcool 70%, expunere la UV 20 de minute pe ambele părţi a rafturilor); -

zilnic: dezinfectarea aerului cu lampa UV, 20 de minute, inainte si dupa terminarea lucrului. 3

Sterilizarea consumabilelor: -

mediile de cultura - gata sterilizate, cele preparate in laborator se sterilizeaza prin filtrare;

-

apă distilata sau bidistilata – filtrare;

-

instrumente metalice: alcool, flambare;

-

sticlărie: înmuiere în solutie Thor 0,5%, spălare cu perie, clătire cu apă, cu apă disilată, uscare, sterilizare la etuvă la 200 ºC, 20 de minute;

-

obiecte de plastic: înmuiere în solutie Thor 0,5%, spălare cu perie, clătire cu apă, cu apă disilată, uscare, sterilizare la autoclav (120º C, 15 minute) sau la vapori de etilenoxid.

4