Splicing Of Rnas

Procesamiento y Splicing de RNAs Harry Alices-Villanueva, Ph.D. Universidad Interamericana de Puerto Rico Recinto de Aguadilla

Transcripción

Procesamiento Post-transcripcional de RNA

RNA Procariótico • Los rRNA y tRNA bacterianos están listos para intervenir en traducción. • El mRNA bacterial puede comenzar a traducir antes de que termine la transcripción. • mRNA bacterial es policistronico: múltiples polipéptidos de un solo producto de TXN.

RNA Eucariótico • Los tres tipos de RNA contienen introns o secuencias no codificadoras que hay que remover para formar el RNA biologicamente activo (RNA Splicing). • El extremo 5’ de todo mRNA eucariótico sufre capping: enlace 5’  5’ a un residuo de 7metilguanosina. • Esta capa protege al RNA de exonucleasas y lo hace ser reconocido por proteínas especificas de traducción.

mRNAs se poliadeninan en el extremo 3’. Una secuencia específica AAUAAA es reconocida por la actividad endonucleasa de la polimerasa de poliadenilación que rompe el producto primario de TXN 11 a 30 bp de la secuencia. Se añaden de 20 – 250 residuos de Adenina al extremo 3’ por acción de la polimerasa.

Poliadenilación de mRNAs

En adición a la remoción de introns, se eliminan núcleotidos extras en los extremos 3’ y 5’. Se añade la secuencia 5’-CCA-3’ al extremo 3’ de todos los tRNAs y varios núcleotidos sufren modificaciones. Más de 60 bases modificadas han sido identificadas en tRNAs En pro- y eucarioticos los rRNA se sintetizan primero como pre-rRNA; en eucariotes el pre-rRNA 45S es precursor de los rRNAs 18S, 28S, y 5.8 S

Introns y Exons • Introns: secuencias de bp que no codifican para proteína. • Splicing: proceso por el cual los introns son removidos de la secuencia codificadora (exons) para así transcribir DNA a mRNA.

Tipos de Introns

Se encuentran en los genes de rRNA en el núcleo, mitocondrios y cloroplasto.

Tipos de Introns

Se encuentran en los genes de mRNA en el mitocondrio y cloroplasto.

Tipos de Introns

El splicing está catalizado por snRNPs. La clase más abundante en mRNAs nucleares.

Tipos de Introns

Se encuentran en ciertos tRNAs. EL splicing es catalizado por endonucleasas especificas que utilizan energía de ATP para catalizar la remoción de los introns y el ligamiento de los exons.

Nucleósidos

El tercer grupo de introns en mRNAs nucleares, sufre una reacción similar a los del Grupo II: forman el lariat. El splicing es catalizado por small nuclear ribonucleoprotein particles (snRNPs ó snurps)

snRNPs: U1, U2, U3, U4, U5, U6. Genes conservados en vertebrados, insectos, levadura y musgos.

Secuencias consenso han sido identificadas en muchos genes de mRNA altamente conservadas en los extremos 5’ y 3’ de los introns de mRNA.

Alternative RNA Splicing

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Pero antes . . .

El Código Genético

Arginina =R Triptofano =W Glutamina = Q Acido Glutamico= E Fenilalanina= F Tirosina= Y Lisina= K Acido Aspártico=D Asparagina= N