Separación De Colorantes Por Cromatografía En Capa Fina Y Columna Y Cuantificación Por Electrofotometría.docx

SEPARACIÓN DE COLORANTES POR CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA Y COLUMNA Y CUANTIFICACIÓN POR ELECTROFOTOMETRÍA.

Jessica Paola Zambrano Silva 1, Yeidy Viviana Basallo Quintero 2 RESUMEN : Los métodos cromatograficos son métodos de separación que involucran la transferencia reversible de un compuesto que esta adsorbido en una fase estacionaria (adsorbente) a una fase móvil (solvente) que fluye a través de la fase estacionaria y la espectrometría es la técnica espectroscópica para trazar la concentración o la cantidad de especies determinadas. En estos casos, el instrumento que realiza tales medidas es un espectrómetro

Objetivo : Separar adecuadamente los componentes de una mezcla de compuestos poco polares por medio de cromatografía en capa fina en columna y en cuantificación por espectrofotometría Materiales y métodos

Introducción Los métodos cromatograficos son métodos de separación que involucran la transferencia reversible de un compuesto que esta adsorbido en una fase estacionaria (adsorbente) a una fase móvil disolvente que fluye atraves de la fase estacionaria. La separación surge de las interacciones de los componentes de una muestra disolverte y adsorbente .El adsorbente está presente en un gran exceso con una gran superficie y con sitios polares capaces de unir reversiblemente pequeñas concentraciones de sustancias por un proceso esencialmente electroestático. Uno de los procesos por los cuales se realizan este tipo de procesos es por la llamada capa fina la cual consiste en una capa de vidrio de material delgado

Materiales y métodos Se empleó una columna cromatografíca en donde se le adiciono una suspensión entre la fase estacionaria (silicagel) y la fase móvil (acetato de etilo: etano7:3) sin dejar secar la columna, se dejó hasta que la mezcla llego al borde de la fase estacionaria, siguiente a esto se le agrego 1mL de la mezcla (n- nitroalinina, Rojo Congo) dejándola caer por las paredes, se mantuvo en hidratación constantemente con la fase móvil buscando obtener una buena elución. La sustancia fue recogida en un vaso de precipitado, se le midieron los componentes de pureza y absorbancia en el espectrofotómetro. Para la cuantificación del colorante se midió el patrón de m- nitroalinina de 200 ppm , con esta medida se realizaron diluciones seriadas agregando 5 mL de 200ppm con una pipeta aforada vertiéndolas en en un tubo de ensayo ,siguiente a eso se le agrego 5 mL del solvente (acetato de etilo 7:3 )obteniendo diluciones de concentraciones a 100ppm, 50ppmy 25 ppm .Se midió la absorbancia de la fracción obtenida en la columna cromatografía Resultados . I)

Separacion por CC Volumen fracción obtenida _______ Color de la fracciónamarilla Concentración Absorbancia

II) Concentracion 0.00mg/L (ppm) 25 mg /L (ppm)

Absorbancia

50 mg/L (ppm) 100 mg/L (ppm) 200 mg / L (ppm) Fracción Volumen de la Fraccion

Concentración de la fracción :_______ Concentración de la muestra en 1 mL _________

Conclusión 

En la cromatografía en columna se pudo evidenciar que este se basa en la diferencia de velocidades con que se desplazan los componentes de las mezclas de compuestos

Concentracion 25 50 100 200

Absorbancia 0.163 0.291 0.492 0.926