Practica No. 2 Determinaciòn De Cafeìna.docx

Preparaciòn del equipo

Preparaciòn de soluciòn madre

Preparaciòn de estandares

•Encender regulador •Encender espectrofotometro •Encender programa "Lamda 25"

•Se realizan los càlulos necesarios para preparar una soluciòn de cafeìna 100 ppm en etanol al 10 •Tomar una alicuota de cafeìna y en un matraz balon aforar a 10 con etanol al 10%

•Se realizan los càlculos necesarios para la preparaciòn de estandares de 5, 10, 15 y 20 ppm. •Se toma una alicuota de 0.5 mL y se coloca en un matraz aforado de 10 mL, y se afora con etanol al 10% tapar y agitar. •Se toma una alicuota de 1.0 mL y se coloca en un matraz aforado de 10 mL, y se afora con etanol al 10% tapar y agitar suavemente. •Se toma una alicuota de 1.5 mL y se coloca en un matraz aforado de 10 mL, y se afora con etanol al 10%, tapar y agitar suavemente. •Se toma una alicuota de 2.0 mL y se coloca en un matraz aforado de 10 mL, y se afora con etanol al 10%, tapar y agitar suavemente.

CONDICIONES DE TRABAJO 1 • Generar el nuevo espectrograma. e

• Definir condiciones: 2 • Velocidad de Barrido (Scan Speed): 240 nm

• • 3 • • •

Definir Condiciones: Rango máximo (Start Wavelenght): 300 nm Rango mínimo (End Wavelenght): 200 nm Ordenada máxima (Ordinate max): 1.05 Ordenada mínima (Ordinate min): 0.00

• Seleccionar el número de muestras (samples): 9 4 • Nombrar en el orden siguiente: 5 ppm 10 ppm, 15 ppm, 20 ppm coca, cafe, te

DIAGRAMA DE BLOQUES Estándar 5 ppm 1

• Lavar el interior de la celda de cuarzo con etanol y posteriormente enguajar estandar[5 ppm]

2

• Llenar la celda de cuarzo a tres cuartas partes con el estandar correspondiente a 5 ppm, e introducir dentro del espectrometro.

3

• Tomar la celda de cuarzo de frente (estandar 5 ppm), e introducirla dentro del espectrometro.

4 5

• Correr el espectrograma

• Generado el espectograma se procede a sacar el estandar.

Estándar 10 ppm 1

• Sacar la celda de cuarzo con el estandar [5 ppm], lavar el interior con etanol y `posteriormente enguajar estandar[15 ppm]

2

• Llenar la celda de cuarzo a tres cuartas partes con el estandar correspondiente a 10 ppm, e introducir dentro del espectrometro.

3

• Tomar la celda de cuarzo de frente (estandar 10 ppm), e introducirla dentro del espectrometro.

4 5

• Correr el espectrograma

• Generado el espectograma se procede a sacar el estandar.

Estándar 15 ppm 1

• Sacar la celda de cuarzo con el estandar [10 ppm], lavar el interior con etanol y posteriormente enguajar estandar[15 ppm]

2

• Llenar la celda de cuarzo a tres cuartas partes con el estandar correspondiente a 15 ppm, e introducir dentro del espectrometro.

3

• Tomar la celda de cuarzo de frente (estandar 15 ppm), e introducirla dentro del espectrometro.

4 5

• Correr el espectrograma

• Generado el espectograma se procede a sacar el estandar.

Estándar 20 ppm

1

• Sacar la celda de cuarzo con el estandar [15 ppm], lavar el interior con etanol y posteriormente enguajar estandar[20 ppm]

2

• Llenar la celda de cuarzo a tres cuartas partes con el estandar[20 ppm] e introducir dentro del espectrometro.

3

• Tomar la celda de cuarzo de frente (estandar 20 ppm), e introducirla dentro del espectrometro.

4 5 6

• Correr el espectrograma • Generado el espectograma se procede a sacar el estandar, el cual se vacìa en el recipiente para desechos.

• Lavar el interior de la celda de cuarzo con etanol al 10%.

MUESTRA PROBLEMA No. 1: COCA-COLA

1

• Llenar la celda de cuarzo a tres cuartas con solucion de coca-cola, e introducir dentro del espectrometro.

2

• Tomar la celda de cuarzo de frente (solucion de cocacola), e introducirla dentro del espectrometro.

3 4

• Correr el espectrograma • Generado el espectograma se procede a sacar el estandar.

MUESTRA PROBLEMA 2: CAFÉ 1

• Sacar la celda de cuarzo con la soluciòn de coca-cola, lavar el interior con etanol al 10% y posteriormente enguajar con soluciòn de cafè.

2

• Llenar la celda de cuarzo a tres cuartas partes con la soluciòn de cafè e introducir dentro del espectrometro.

3

• Tomar la celda de cuarzo de frente (soluciòn de cafè), e introducirla dentro del espectrometro.

4 5

• Correr el espectrograma

• Generado el espectograma se procede a sacar el estandar.

MUESTRA PROBLEMA 3: TÈ 1

• Sacar la celda de cuarzo con la soluciòn de tè, lavar el interior con etanol al 10% y posteriormente enguajar con soluciòn de cafè.

2

• Llenar la celda de cuarzo a tres cuartas partes con la soluciòn de tè e introducir dentro del espectrometro.

3

• Tomar la celda de cuarzo de frente (soluciòn de tè), e introducirla dentro del espectrometro.

4 5

6

• Correr el espectrograma • Generado el espectograma se procede a sacar el estandar. • Lavar el interior de la celda con etanol al 10%.

FINALMENTE

1

2

3

• Colocar el valor de cada pico obtenido.

• Nombrar el espectrogama "Determinaciòn de cafeìna.

• Sacar ambas celdas de cuarzo, vaciarlas y lavarla su interior con etanol al 10%.

Estándar Color de línea en la grafica Absorbancia Concentración ppm 5 Azul marino 0.26081 10 Rojo 0.63399 15 Verde 0.82048 20 Rosa 1.1965 Analito Color de línea en la grafica Absorbancia Coca-Cola Verde oscuro 0.366930 Café Café Té Rojo

CURVA DE CALIBRACIÒN Concentración ppm Absorbancia 5 0.26081 10 0.63399 15 0.82048 20 1.1965

CURVA DE CALIBRACION 1.4

Absorbancia

1.2 y = 0.0599x - 0.0204

1 0.8

0.6 0.4 0.2 0 0

5

10

15

Concentraciòn (ppm)

20

25