Parte 3 Unidad 2

Proteínas plasmaticas…

Proteínas plasmáticas, funciones generales… Funciones generales de las proteínas plasmáticas. Transporte de compuestos endógenos/exógenos poco solubles en agua. Regulación de la presión oncótica y balance intra/extravasal de agua. Respuesta inflamatoria y control de la infección.

Métodos de estudio de proteínas

Purificación de Proteínas La necesidad de utilizar proteínas para diferentes efectos, a obligado a desarrollar diversos métodos para obtener proteínas puras o semipuras según las necesidades.

La purificación va a depender de las características de las proteínas y entre ellas están su solubilidad, tamaño, carga y la posibilidad de ser adsorbidas por diferentes sistemas.

Es importante mencionar que difícilmente un solo procedimiento rendirá una purificación adecuada, por lo que es común emplear una combinación de métodos, mismos que variarán en función de las características de las proteínas.

Ultrafiltración en gel Las diferencias en tamaño de las proteínas permite aplicar diversos métodos para lograr su purificación, pasando una mezcla por algún tamiz molecular. La ultrafiltración en gel es un poderoso método mediante el cual se logra la separación de proteínas por el retardo que sufren las proteínas al desplazarse por los microcanales que hay dentro de cada esfera de gel, Las moléculas mas grandes salen primero las mas pequeñas al final.

Resinas de intercambio iónico La carga de las proteínas puede ser utilizada para lograr su separación empleando para ello resinas de intercambio iónico

NR3+ NR3+ NR3+ NR3+ NR3+

Las resinas fijaran moléculas con carga opuesta a la propia, mientras que las de misma carga fluyen libremente saliendo del sistema.

NR3+ NR3+ NR3+ NR3+

Las proteínas unidas a la resina se liberan cambiandoles la carga variando el pH

Cromatografía de afinidad Muchas moléculas tienen afinidad específica entre sí, esto es aprovechado para lograr la separación de algunas proteínas. Un sistema muy común es empleando anticuerpos que son altamente específicos y que funcionan como anzuelo solamente para su molécula blanco. De este modo es posible seleccionar un solo tipo de molécula entre una mezcla muy compleja.

SDS - PAGE La electroforesis es otro procedimiento que permite la separación de proteínas en función de sus cargas y tamaño, mediante una corriente eléctrica

Revelado Carga de muestras

Corrimiento

Las proteínas deben atravesar una matriz tridimensional de poliacrilamida, las proteínas mas pequeñas avanzan mas, las mas grandes se rezagan, una vez terminado el corrimiento el gel se tiñe para observar las bandas de proteína.

Enzimas y sus propiedades Las enzimas son las unidades funcionales del metabolismo son catalizadores biológicos. Son altamente específicas. Son regulables. Aceleran la velocidad de transformación de sustrato a producto.

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