Biochimie LT 9. Cunoaşterea valorilor de referinţă pentru testele de laborator: sânge, urină, lichid cefalorahidian (LCR) Analizele medicale au valori ce se incadreaza in anumite limite normale. Cresterea acestor valori sau scaderea lor sub limitele normalului sunt considerate anormale sau patologice. Sunt frecvent intalnite situatiile, exceptand boala in sine, care pot modifica valorile normale ale analizelor.
Diagnosticul clinic biochimic de laborator – utilizează datele obţinute pentru : • determinarea devierilor de la normă, • determinarea diagnozei, prognozei maladiilor, • estimarea eficacităţii tratamentului, • efectuarea controlului asupra terapiei medicamentoase, • profilaxia patologiilor. Diagnosticul clinic de laborator include mai multe direcţii : Biochimie clinică, hematologie clinică, citologie, imunologie, microbiologie, micologie, parazitologie, toxicologie clinică. 75% din toate investigaţiile clinice în prezent se efectuează cu aplicarea metodelor de biochimie clinică, deoarece a fost demonstrat, că la baza patogeniei majorităţii maladiilor stau dereglări primare sau secundare ale metabolismului Obiectele de cercetare clinico-biochimică sunt: • Lichidele biologice: sângele, lichidul cefalorahidian, transudatele, exudatele, urina, saliva; • Ţesuturile. Exudat - Permeabilitate crescută a membranei (inflamație) Transudat- Dezechilibru între forțele hidrostatice din cele 2 părți ale membranei ( Presiunile oncotică, hidrostatică) Etapele investigaţiilor de laborator
Preanalitică
Analitică
Postanalitică
57%
15%
18%
Etapa preanalitică include: • Selectarea şi solicitarea investigaţiei de laborator; • Alegerea termenilor optimali pentru efectuarea investigaţiei; • Pregătirea pacientului pentru recoltarea probei biologice; • Recoltarea adecvată a probei biologice; • Prelucrarea primară a probei, transportul şi păstrarea ei. Etapa analitică constă în: • Prelucrarea preliminară specială a probei biologice; • Efectuarea testului de laborator; • Controlul calităţii investigaţiilor. Etapa postanalitică include: • Primirea rezultatelor investigaţiei de către medicul-clinician; • Interpretarea rezultatelor obţinute; 1
Biochimie • Luarea deciziei referitor la necesitatea testărilor suplimentare; • Prescrierea tratamentului Reguli importante în alegerea termenilor optimali pentru efectuarea investigaţiei de laborator : • Recoltarea probelor biologice se efectuează de obicei între orele 7 şi 9 dimineaţa. • Recoltarea probelor se efectuează după 8-12 ore de inaniţie (în stare bazală). • Recoltarea probelor se efectuează înainte de procedurile diagnostice şi terapeutice, capabile să influenţeze rezultatele testelor. • În cazul administrării medicamentelor este necesar de a lua în consideraţie posibilele efecte ale preparatului asupra parametrului testat şi de a alege perioada de timp când aceste efecte sunt minime. • Obligatoriu se indică timpul exact de recoltare a probei în documentele corespunzătoare. La alegerea termenilor optimali pentru efectuarea investigaţiei de laborator este necesar de a se lua în consideraţie că conţinutul diferitor compuşi în sânge variază în functie de: - ritmul circadian (diurn, sezonier) - fazele ciclului menstrual (la femei) Parametrii sanguini a căror nivel variază esenţial în decursul zilei: Hormoni: Adrenalina, Aldosterona, Testosterona, ACTH, Somatotropina, Cortozolul, Prolactina, Tiroxina, Noradrenalina Electrolitii: Fier, Sodiu, Potasiu, Fosfatii Elemente figurate: eritrocite, eozinofile Parametrii sanguini a căror nivel variază esenţial în functie de fazele ciclului menstrual: - Hormonul foliculostimulant, aldosterona - cresc înainte de ovulaţie - Colesterolul – scade la ovulatie - Fosfatii si fierul – scad la menstruatie Factorii, ce influenţează asupra rezultatelor investigaţiilor de laborator sunt: alimentatia (Ex. produsele bogate in lipide cresc : K+, trigliceride, fosfataza alcalina), efort fizic (Ex. creste : lactatul, glucoza, acizii grasi liberi, transaminazele), fumat (ex. cresc acizii grasi liberi si lipoproteinele (LDL)), medicamente (Ex. fenobarbitalul scade bilirubina, contraceptivele cresc nivelul de calciu). Recoltarea materialului biologic primar pentru investigare În calitate de material biologic pentru investigaţiile clinice de laborator cel mai frecvent este utilizat sângele. Recoltarea sângelui se efectuează prin: - Venepunctie - Recoltarea sangelui capilar (din deget) Sângele venos constituie materialul biologic preferenţial pentru investigaţiile biochimice, hormonale, serologice, imunologice, precum şi pentru investigaţiile hematologice. Recoltarea sângelui venos se efectuează cu ajutorul unor sisteme speciale cu vacuum, care: • exclud complet contactul cu materialul biologic şi asigură securitatea atât a pacientului, cât şi a personalului medical, • exclud contactul sângelui cu mediul extern, • preîntâmpină destrucţia celulelor sanguine, • asigură un raport optim sânge/stabilizator, - aceasta permite de a evita defecte ale materialului biologic, contribuie la stabilitatea analiţilor şi obţinerea unui rezultat corect al testului de laborator. 1.ac special bidirectionat cu o supapa 2. holder vacutainer 3. eprubeta sterile cu continut dozat de vacuum
2
Biochimie Influenţa duratei de aplicare a garoului la venepuncţie asupra rezultatelor testelor de laborator: Durata aplicării garoului, min. Parametrul 0
2
4
6
Calciu, mmol/l
2,38
2,45
2,52
2,58
Proteina totală, g/l
72
74
77
80
Albumina, g/l
39
40
42
43
Succesiunea de recoltare a sângelui în diferite tipuri de eprubete:
• • •
№
Eprubeta
Material biologic
Investigaţiile
Culoarea
1.
Eprubetă fără aditivi, cu aditivi sau cu activatori ai coagulării
Ser
biochimice, serologice
Roşie
2.
Eprubetă citrat de Na
Plasma
coagulograma
Albastră
3.
Eprubetă cu Li-heparină sau heparină
Sânge integru /plasma
imunologice, electroliţi, EAB
Verde
4.
Eprubetă EDTA
cu
Sânge integru /plasma
Hematologice, PCR
Violetă
5.
Eprubetă inhibitor glicolizei
cu al
Plasma
glucoza, lactat
Sură (cenusie)
cu
Durata şi condiţiile de păstrare a sângelui recoltat: Se permite doar un singur ciclu de congelare-decongelare a serului Se interzice congelarea sângelui integru Materialul biologic se păstrează cu atât mai bine cu cât este mai joasă temperatura de păstrare
Cele mai frecvente cauze ale alterării materialului biologic după recoltare: – Hemoliza – Metabolismul celulelor sanguine – Reacţiile chimice din ser/plasmă – Acţiunea microorganismelor – Evaporarea apei/sublimarea – Procese osmotice – Acţiunea luminii – Difuzia gazelor
3
Biochimie In tabelele urmatoare sunt redate valorile normale, cantitative ale analizelor medicale exprimate in moli/l sau subunitatile acestora: milimoli/l (a mia parte dintr-un mol/l) sau micromoli/l (a miliona parte dintr-un mol/l). µ- micro, mg- miligrame
Valori in sange Substanta analizata
Valori normale in grame si submultiplii
Factorul de multiplicare
Valori normale in moli si submultiplii
Acidul uric
0.020-0.050 g/l 2.0-5.0 mg/100ml
mg/1X5.95 mg/100mlX59.5
119-297 µmol/l
Amoniacul
0.1-0.3 mg/l
mg/1X58.5
5.85-17.55 mcmol/l
Bilirubina indirecta
0.008-0.010 g/l 0.8-1 mg/100ml
mg/1X1.71
13.6-17.1 µmol/l
Bilirubina directa
0-0.0025 g/l 0-0.25 mg/100ml
mg/1X1.71
0-4.30 µmol/l
Bilirubina totala
0.008-0.0125 g/l 0.8-1.25mg/100ml
mg/1X1.71 mg/100mlX17
13.68-21.30 µmol/l
Calciul
0.090-0.110 g/l 9-11mg/100ml
mg/1X0.025
2.25-2.75 mmol/l
Clorul
3.34-3.95 g/l 334-395mg/100ml
g/1X28.2 mg/100mlX0.282
94-111 mmol/l
Colesterolul
1.2-2.6 g/l 120-260mg/100ml
g/1X2.58 mg/100mlX0.258
3.1-6.7 mmol/l
Creatinina
0.0005-0.012 g/l 0.5-1.2 mg/100ml
mg/1X8.85 mg/100mlX88.5
44-106 µmol/l
Fierul
0.5-1.8 g/l 50-180 mg/100ml
mg/1X17.9 mcg/100mlX0.179
9-32 µmol/l
Fosforul
0.030-0.045 g/l 3.0-4.5 mg/100ml
mg/1X0.032 mg/100mlX00.32
0.96-1.44 mmol/l
Glucoza
0.65-1.10 g/l 65-110 mg/100ml
g/1X5.56 mg/100mlX0.055
3.6-6.0 mmol/l
Hemoglobina
12-16 mg/100ml
g/1X0.621
7.45-9.93 mmol/l
Magneziul
0.020-0.040 g/l 2-4 mg/100ml
mg/1X0.041 mg/100mlX0.41
0.82-1.64 mmol/l
Potasiul
0.160-0.200 g/l 16-20 mg/100ml
g/1X25.6 mg/100mlX0.256
4.5-5.1 mmol/l
Sodiul
3.1-3.5 g/l 310-350 mg/100ml
g/1X43.5 mg/100mlX0.435
135-152 mmol/l
Trigliceridele
0.5-1.5 g/l 50-150 mg/100ml
g/1X1.14 mg/100mlX0.0114
0.57-1.71 mmol/l
Ureea
0.2-0.5 g/l 20-50 mg/100ml
mg/1X16.6 mg/100mlX0.116
3.30-8.30 mmol/l
Valori in urina Substanta analizata
Valori normale in grame/24 ore
Factorul de multiplicare
Valori normale in mol/24 ore
Acidul uric
0.30-0.80 g/24h
g/24hX5.95
1.8-4.8 mmol/24h
Acidul vanil mandelic
1.7-7.4 mg/24h
mg/24hX5.04
8.6-37.3 µmol/24h
Calciul
0.10-0.30 g/24h
mg/24hX0.025
2.5-7.5 mmol/24h
Clorul
6-8 g/24h
g/24hX28.2
169-225 mmol/24h
4
Biochimie Creatinina
1-2 g/24h
g/24hX8.85
8.85-17.7 µmol/24h
17-cetosteroizii
6-20 mg/24h
mg/24hX3.47
20-70 µmol/24h
Fosforul
0.5-1.5 g/24h
g/24hX32
16-48 mmol/24h
Magneziul
0.06-0.18 g/24h
g/24hX0.041
2.5-7.4 mmol/24h
Potasiul
2-3 g/24h
g/24hX25.6
51-77 mmol/24h
Sodiul
4-6 g/24h
g/24hX43.5
174-261 mmol/24h
Ureea
10-35 g/24h
g/24hX16.6
166-581 mmol/24h
Alte valori Hematocrit Hemoglobina Globule rosii Globule albe
- la barbati = 40-48%- la femei = 36-42%- la copii 215 ani = 36-39% - la barbati = 80-100% sau 13-16 g la 100 ml sange- la femei = 70-90% sau 11-15 g la 100 ml sange - barbati = 4,2-5,6 milioane pe 1 mm cub- femei =3,74,9 milioane pe 1 mm cub- copii (1-5 ani)= 4,5-4,8 milioane pe 1 mm cub - la adulti = 4000-8000 pe 1 mm cub- la copii (1-6 ani) = 4000-1000 pe 1 mm cub
Trombocite
- 150 000-300 000/mm cubi
Fibrinogen
- 200-400 mg la 100 ml sange
Lipide totale
- 550-750 ml/100 ml
Trigliceride
- 50-150mg/100 ml
Acizi grasi
- 200-450 mg/100 ml
Lipoproteine
- 150-250 mg/100 ml
Fosfataze alcaline
- 1,5-5 UB- 3-13 UK- 13-45 UI
Fosfataze acide
- 1 UB- 4 UK- 4-14 UI
Aldolaze
- 2-10 U/ml- la adulti = 4-6 U.S./ml (unitati Sibley) pe ml ser= 0,9-2,5 miliUI/ml SER- la copii = 9 UI/ml ser
Transaminaze
- 10-40 UK- 2-16 UI
Amilaza
- in sange = 8-32UW/1 ml ser= 230-2700 UI/l serin urina = 16-64 UW/ml urina= 8000-30000UW/24 ore sub 5500 UI/l
LDH
- 150-450 unitati Wrobleski- 120-240 U/l
Corticosteroizi Catecolamine Lipaza
- barbati = 10-20 mg/24 h- femei 6-15 mg/24 h- copii = 2-4 mg/24 h - in sange = 32 µmol/l- in urina = 10-100 µg/24 h= 0,05-0,55 µmol/24 h- AVM – urina = 1,7-7,4 mg/24 h= 8,6 – 37,3 µmol/24 h - 20-140 UI
LICHIDUL CEFALORAHIDIAN
5
Biochimie
Lichidul cefalorahidian (LCR) (rar, lichid cerebrospinal) este un lichid clar și transparent care umple sistemul ventricular cerebral, canalul ependimar, spațiile subarahnoidiene cerebrale și medulare. Compoziția LCR este: 99% apă, 115 mEq/L NaCl, 0,5 g/L glucoză și 0,4 g/L proteine (albumine, etc). Compoziția sa reflectă starea fiziopatologică a creierului (inflamație, infecție, etc). Lichidul cefalorahidian, obţinut prin puncţie lombară, este adesea cea mai bună probă pentru a testa prezenţa afecţiunilor sistemului nervos central (SNC), deoarece LCR înconjoară creierul şi măduva spinării. Modificările apărute în compoziţia LCR, datorate unor boli ale SNC sau alte afecţiuni grave, sunt adesea detectate în primul rând, şi cel mai uşor, într-un eşantion de LCR.
- recoltare prin puncţie spinal ă - lombar ă, suboccipital ă, ventricular ă - caracteristici - incolor, limpede - opalescent (tulbure) - infec ţii
6