Histologi

Histologi •Histos : Jaringan •Logos : Ilmu Ilmu yang mempelajari tentang struktur jaringan Anatomi Mikroskopik

Cara Penggunaan Mikroskop  Atur cermin untuk mendapatkan cahaya  Buka diafragma supaya cahaya terang  Taruh slaid di meja sediaan, gerakkan slaid dengan memutar tombol meja sediaan  Sediaan kering (Histologi,PA,PK): kondesor di naikkan sampai di bawah meja sediaan  Sediaan basah (Parasit,PK): kondensor di turunkan  Lihat dengan obyektif kecil (4x,10x) perjelas fokus dengan makrometer  Untuk melihat sel putar revolver ke obyektif 40x, perjelas fokus dengan mikrometer

 Untuk melihat sel darah/protozoa putar revolver ke obyektif 10x, beri mkinyak imersi ke titik yang sudah di lihat dengan obyektif 40x, lalu putar ke obyektif 100x, perjelas fokus dengan mikrometer

Pembuatan Sediaan Histologi • • • • •

Staining : Pewarnaan Mounting : Pita di letakkan di obyek glass Pembuatan blok parafin Water bath Sectioning : Blok parafin di potong tipis dengan mikrotom setebal 5-10µ → Pita • Embedding : Jaringan di benamkan dalam parafin cair suhu 58-60°C. Xylol akan menguap dan parafin masuk ke celah-celah jaringan.

• Fiksasi : Mempertahankan struktur jaringan seperti keadaan pada saat masih hidup. Contoh : Formalin Buffer Netral 10% • Dehidrasi : Mengeluarkan air dari jaringan. Menggunakan serangkaian alkohol yang naik bertahap dari konsentrasi 50%-100% • Clearing : Membuat jaringan menjadi transparan dan menghilangkan sisa alkohol. Menggunakan Xylol.

Pewarnaan • Jaringan tubuh bening → Pewarnaan • Komponen jaringan yang asam (asam nukleat,glikosaminoglikan dan asam glikoprotein) akan menarik zat warna basa → basofilik • Komponen jaringan yang bersifat basa (sitoplasm,kolagen) akan menarik zat warna asam → asidofilik • Zat Pewarna Basa : Hematoxylin, Toluidine Blue dan Methylene Blue • Zat Pewarna Asam : Eosin, Orange G, Acid Fuchsin • Dengan Hematoxylin Eosin (HE); Inti: biru, Sitoplasma: merah

Reagen

Hasil

Hematoxylin

Biru: Inti, matriks tulang rawan

Eosin

Merah Muda: Sitoplasma, kolagen

Masson’s Trichrome

Biru gelap: Inti Merah: Otot keratin, Sitoplasma Biru Muda: Musin, Kolagen

Orcein

Coklat: Serat Elastin

Weigert’s

Biru: Serat Elastin

AgNO3

Hitam: Serat Retikulin

Periodic Acid-Schiff

Magenta: Glikogen, Molekul

Wright’s & Giemsa

Merah Muda: Eritrosit, Eosinofil Biru: Sitoplasma Monosit & Limfosit