Estudio Fitoquimico Del Sacha Inchi

ESTUDIO FITOQUÍMICO Y FARMACOLOGICO DE LA SEMILLA DE “SACHA INCHI” Plukenetia volúbilis linneo UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA Autor: MACHACA CAMPOMANES, Michael

RESUMEN El estudio de los diferente componentes de Plukenetia volúbilis linneo pretende aportar a las investigaciones realizadas respecto a estas especies, que validen científicamente sus propiedades farmacológicas. El fin de esta investigación implica el estudio de los diferentes componentes a través del tratamiento del extracto hidroalcohólico con alcohol de 96°. Las pruebas fotoquímicas desarrolladas permiten determinar que los componentes mayoritarios presentes en esta especie son los ácidos grasos, como: omega 3(acido linolenico) El monitoreo de la cromatografía de columna se ha realizado con la cromatografía de capa fina utilizando como eluyentes al cloroformo y etanol de 96° y el revelado con FeCl3 al 1%; no se observan manchas en la cromatoplaca. Y en la marcha de solubilidad se observa que solo son solubles con compuestos apolares.

ABSTRACT The study of them different components of Plukenetia volúbilis linneo tries to reach to the investigations realized with regard to these species, which validate scientific his pharmacological properties. The end of this investigation implies the study of the different components across the treatment of the extract hidroalcohólico with alcohol of 96 °. The photochemical developed tests allow determining that the majority present components in this species are the oily acids, since: omega 3 (acid linolenico). The monitoring of the column chromatography has been realized by the chromatography of thin cap using like elements to the chloroform and ethanol of 96 ° and the developing with FeCl3 to 1 %; spots are not observed in the cromatoplaca.

And in the march of solubility is observed that alone they are soluble with compounds apolares.

biología floral y reproductiva del cultivo de sacha inchi (plukenetia volúbilis l.) – “euphorbiaceae”, nos indican que el cultivo presenta un alto porcentaje de polinización cruzada, lo cual indica que se trata de una especie alegama, el conocimiento del tipo de reproducción es de una suma importancia para futuros trabajos de mejoramiento genético de la especie. En el sacha inchi se observan 2 tipos de flores:  Masculinas: son pequeñas, blanquecinas, dispuestas en racimos.  Femeninas: se encuentran en la base del racimo y ubicadas lateralmente de una a dos flores.

I. INTRODUCCIÓN Las posibilidades de encontrar nuevos medicamentos que alivien las diferentes enfermedades, han hecho que las plantas constituyan uno de los recursos terapéuticos de mayor uso. La gran diversidad de especies con variados principios activos, permiten hoy en día afianzar más las investigaciones con valor científico, teniendo el antecedente etnobotánico. Muchos de estos estudios están dedicados al aislamiento de principios activos que tienen uso terapéutico como es a partir de la semilla de sacha inchi. El estudio de los diferentes componentes de esta semilla pretende aportar a las investigaciones que se han podido realizar respecto a esta especie, que validen científicamente sus propiedades farmacológicas, teniendo como antecedente que esta especie es utilizada en la medicina tradicional con el nombre de sacha maní o maní del inca. Esta investigación además permitirá determinar a través de los análisis si estas especies tienen los metabolitos secundarios para los efectos terapéuticos.



Fruto: es una capsula, de 3.5 a 4.5 cm. De diámetro, con 4 lóbulos aristados (tetralobados) dentro de los cuales se encuentran 4 semillas. Excepcionalmente, algunos eco tipos presentan capsulas con 4 a 7 lóbulos.



Semilla: es ovalada, de color marrón oscuro, ligeramente abultadas en el centro y aplastadas hacia el borde. Según los eco tipos, el diámetro fluctúa entre 1.3 y 2.1 cm.

II. ESTUDIO BOTANICO.

FRUTO DE Plukenetia volúbilis linneo.

2.1. Plukenetia volúbilis l.



Planta: trepadora, voluble, semileñosa, de altura indeterminada.



Hojas: son alternas, de color verde oscuro, oval – elípticas, aserruchadas y pennitinervias, de 09 – 16 cm. de largo y 06 – 10cm. Ancho. El ápice es puntiagudo y la base es plana o semiarriñonada.



Flores: los resultados obtenidos a través del proyecto de tesis titulado”

SEMILLA DE Plukenetia volúbilis linneo. TAXONOMIA La clasificación botánica según Ayala, S.A. Y Field Museum… S.A (1996) de la planta es la siguiente:

Orden : Euphorbiales Familia : Euphorbiaceae Genero : Plukenetia Especie : Volúbilis Linneo Nombre científico: Plukenetia volúbilis linneo. Nombre vulgar: sacha inchi. La especie plukenetia volúbilis l. es conocida de acuerdo al idioma o lugar con los siguientes nombres: • Sacha inchic

• • • •

o sopa de res con maní), en los cuales reemplaza al maní.

Sacha maní Maní del monte Maní del inca Inca peanut

COMPOSICION QUIMICA DE LA SEMILLA DE

Plukenetia volúbilis linneo COMPONENTES Humedad

CONTENIDO (%) García Mejía 5,63 6,37

Proteína

24,39

24,21

Grasa

43,27

51,40

Fibra

16,53

11,30

Ceniza

7,72

2,69

Carbohidratos 2,80 Fuente: García 1992 y Mejía 1997.

4,03

III. ASPECTOS ETNOBOTANICOS Plukenetia volúbilis linneo dentro de la medicina tradicional y de acuerdo a la información bibliográfica e información directa de personas que utilizan estas especies en el tratamiento de diferentes enfermedades, cumplen un papel importante que se atribuye a los efectos terapéuticos. Las semillas tienen diferentes usos, tanto farmacológicos como nutritivos.

En épocas antiguas la semilla de Plukenetia volúbilis l. se considero un elemento importante tanto en la nutrición como en la medicina, es por ello que se represento en las armas de guerra así como el los huacos. IV. MÉTODOS DE ANALISIS 4.1 ANÁLISIS FITOQUIMICO. Se ha realizado la marcha fotoquímica que corresponde a las siguientes pruebas: prueba del cloruro férrico (fenoles), prueba de la gelatina (taninos), prueba de dragendorff y mayer (alcaloides), prueba de shinoda (flavonoles), prueba de seliwanoff (azucares), prueba de la espuma (saponinas). 4.4 MARCHA DE SOLUBILIDAD. Los ensayos de la solubilidad de un extracto, son importantes por que permite elegir el solvente adecuado para su extracción y determinar su polaridad de los constituyentes químicos. 4.3 CROMATOGRAFIA.

En medicina tradicional, las mujeres Mayorunas, Chayuhuitas, Campas, Huitotas Shipibas, Yaguas y Boras mezclan la harina con el aceite de sacha inchi y hacen una crema especial para revitalizar y rejuvenecer la piel. Los nativos Secoyas, Handosas, Amueshas, Cashibos, Dapanahuas y Boras comen los granos tostados de Plukenetia volúbilis para recuperar la fuerza y los usan como un tónico para afrontar el trabajo duro. Con el aceite frotan sus cuerpos para aliviar los dolores reumáticos y musculares. En la nutrición según los relatos de las personas que mantienen sus tradiciones dicen:”el maní del monte se muele y después pasa a ser cocinado para preparar como una especie de mazamorra llamado inchi cucho (ají con maní), lechona api (mazamorra de plátano con maní), inchi capi (sopa de gallina con maní

Las técnicas cromatográficas son procedimientos fisicoquímicos que permiten separar los componentes de una mezcla mediante el desplazamiento diferenciado de cada uno de ellos sobre una superficie estacionaria por acción de un sistema de solventes. Las técnica cromatográfica utilizada cromatografía en capa fina (ccf).

es:

V. PARTE EXPERIMENTAL 5.1. POBLACIÓN DE MUESTRA Lugar de Recolección – Plukenetia volúbilis linneo: Oxapampa (1,814 msnm)

Estadio y Época de Recolección: Floración (febrero a abril 2008) Cantidad de muestra: 1 Kg.

Oxapampa se encuentra a una altura de 1,814 msnm, entre las coordenadas geográficas 10°35'25" de latitud sur y 75°23'55" de longitud oeste del meridiano de Grennwich. Cuenta con una superficie de 982.04 km2.

5.2 OBTENCIÓN DE EXTRACTOS.

Las semillas fueron extraídas de plantas sanas, sembradas en el campo de multiplicación de la especie. Se eligieron frutos maduros, dehiscentes, antes de la cosecha programada.

5.2.1 COSECHA La cosecha del sacha inchi, bajo cualquier circunstancia de su uso o destino, tiene lugar generalmente cuando los frutos o capsulas se tornan de un color marrón oscuro o negro cenizo. Se realiza recolectando las capsulas con la mano, pues estas se desprenden fácilmente, algunas veces se producen perdidas por dehiscencia, por ello es recomendable cosechar cada 15 días. ), La cosecha se estabiliza a partir de los 14 meses. Generalmente, cuando 3se realiza la cosecha, se encuentran algunas capsulas inmaduras, que todavía conservan algo de color verde y se dejan en el campo para la siguiente cosecha, talvez ya no se cosechen debido a su dehiscencia. Por lo tanto, en estos casos, lo que se recomienda es cosecharlas y poner las capsulas inmediatamente al sol, para evitar el ataque de hongos, y así no se deteriore la calidad del producto.

5.2.3 MOLIENDA El primer paso es el descascarado de las semillas, para después llevarlo al horno a una temperatura de 50 ° C .Una vez secas la especie vegetal, someterla a molienda.

Plukenetia volúbilis linneo. La planta ya es adulta y ya están listos los frutos para ser cosechados 5.2.2 RECOLECCIÓN El material vegetal se recolecto en la provincia de Oxapampa; es la provincia más extensa del departamento de Pasco y se localiza en la parte central del Perú. La Provincia de Oxapampa esta conformada por 7 distritos: Oxapampa, Villa Rica, Chontabamba, Huancabamba, Pozuzo, Puerto Bermúdez y Palcazú. Se encuentra ubicada en la margen derecha del río Huancabamba, que divide al distrito de Oxapampa con el distrito de Chontabamba.

Después de la molienda se peso de nuevo la droga vegetal y se observo que la cantidad de la muestra se reduce a 600 g. y 400 g (cáscara y humedad). Esta última obtención se llevo a una botella de color ámbar y después se agrego alcohol de 96°. El macerado obtenidos corresponden a soluciones hidroalcohólicas. Que después de una semana (tiempo mínimo de maceración) se procede a la filtración.

El pelado de las semillas es en tres etapas:

1.

El fruto entero. (figura 1)

2.

Las semillas con cáscara(figura 2)

3.

Las semillas descascaradas(figura 3)

(Figura 3) DIAGRAMA DE FLUJO DE EXTRACCIÓN

(Figura 1)

Siembra de sacha inchi

Cosecha de Sacha inchi

Acopio de semillas

(Figura 2)

Transporte de las semillas

Selección y descascarado de semillas

Macerado de las semillas

Filtrado del macerado

Ensayos fotoquímicos

VI. ENSAYOS PRELIMNARES. Los ensayos preliminares como solubilidad y la marcha fotoquímica que son análisis cualitativos permiten determinar la presencia de metabolitos y la cantidad de éstos en forma muy cualitativa. Los resultados de estos ensayos se aprecian en los siguientes cuadros. 6.1 MARCHA DE SOLUBILIDAD En la marcha de solubilidad obtuve lo siguiente:

En esta foto se muestra como el concentrado del extracto de Plukenetia volúbilis l. son insolubles en los compuestos polares. 6.2 GLUCIDOS En los ensayos de caracterización de glúcidos se obtiene lo siguiente:

Cuadro 1 SOLUBILIDADES SOLVENTES Plukenetia volúbilis l. H2 O (-) ALCOHOL 20° (-) ALCOHOL 30° ALCOHOL 40° ALCOHOL 50°

(-) (-) (-)

ALCOHOL 60° ALCOHOL 70° ALCOHOL 80°

(-) (-) (-)

ALCOHOL 96° HCl NaOH

(-) (-) (+ -)

ACIDO ACETICO ETER BENCINA

(+ -) (+ -) (+ -)

N-HEXANO CLOROFORMO

(+ -) (+ +)

(-) = insoluble; (+-) = poco soluble; (++) = soluble

Cuadro 2 CARACTERIZACION DE GLUCIDOS REACTIVOS

RESULTADOS

(+++)azucares reductores (++)azucares Reacción con fehling reductores (++)azucares Reacción con benedit reductores (++)azucares Reacción con tollens reductores Reacción con (++)azucares selivanoff reductores (-) = No hay presencia de metabolitos (+) = Escasa presencia de metabolito (++) = Regular presencia de metabolito (+++) = Abundante presencia de metabolito Reacción con molish

REACCIÓN CON MOLISH

Se torna de color amarillo

Anillo de color violeta

REACCIÓN CON TOLLENS REACCIÓN CON FEHLING Se forma un espejo de plata Precipitado de color naranja

REACCIÓN CON SELIVANOFF

Se torna color naranja

REACCIÓN CON BENEDIT

Cuadro 4 CARACTERIZACION DE COMPUESTO FENOLICOS(TANINOS) REACTIVOS

RESULTADOS

Reacción con FeCl3 (-) (-) = No hay presencia de metabolitos (+) = Escasa presencia de metabolito (++) = Regular presencia de metabolito (+++) = Abundante presencia de metabolito REACCIÓN CON FeCl3

Reacción negativa por que no se torna de color azul-negruzco

En esta foto se muestra todas reacciones de glúcidos que dan positivo a la reacción. 6.3 ACEITES FIJOS En los ensayos de caracterización para aceites fijos se realizo con el reactivo sudan III y se obtuvo lo siguiente: Cuadro 3 CARACTERIZACION DE ACEITES FIJOS REACTIVOS

RESULTADOS

Reacción con sudan (+++) III (-) = No hay presencia de metabolitos (+) = Escasa presencia de metabolito (++) = Regular presencia de metabolito (+++) = Abundante presencia de metabolito

6.5 PROTEINAS En el reconocimiento de proteínas se uso los reactivos: Biuret y Ninhidrina. Cuadro 5 CARACTERIZACION DE PROTEÍNAS REACTIVOS

RESULTADOS

Reacción con biuret ( ++ ) Reacción con (+) ninhidrina (-) = No hay presencia de metabolitos (+) = Escasa presencia de metabolito (++) = Regular presencia de metabolito (+++) = Abundante presencia de metabolito Reacción con biuret

Sudan III

Extracto con sudan III

Aceite con sudan III

6.4 FENOLES Para el reconocimiento de compuesto fenolicos se obtuvo: Reacción positiva por que se puso de color REACCIÓN violetaCON NINHIDRINA

CARACTERIZACION DE ALCALOIDES REACTIVOS

RESULTADOS

Reacción con (-) dragendorff Reacción con mayer (+) (-) = No hay presencia de metabolitos (+) = Escasa presencia de metabolito (++) = Regular presencia de metabolito (+++) = Abundante presencia de metabolito REACCIÓN CON MAYER Reacción positiva por que se puso un mínimo de color violeta

Reacción donde hay una escasa presencia de metabolitos

6.6 FLAVONIODES Para el reconocimiento de flavonoides se utilizo el reactivo de shinoda, y se obtuvo lo siguiente: Cuadro 6 CARACTERIZACION DE FLAVONOIDES REACTIVOS

RESULTADOS

Reacción con shinoda (-) (-) = No hay presencia de metabolitos (+) = Escasa presencia de metabolito (++) = Regular presencia de metabolito (+++) = Abundante presencia de metabolito REACCIÓN CON SHINODA

Analizando los resultados de la prueba fotoquímica para aceites fijos del extracto hidroalcoholico se puede observar que existe una gran cantidad de aceite fijo que con lo recaudado en la bibliografía se puede corroborar que la especie Plukenetia volúbilis linneo si tiene presencia del omega 3. VII. CROMATOLOGRAFÍA DE CAPA FINA.

7.1 CROMATOGRAFIA DE PAPEL 1° se corta el papel watman. Reacción negativa

6.7 ALCALOIDES En el ensayo de caracterización de alcaloides se obtuvo lo siguiente: Cuadro 7

2° luego se puentea los extractos con unos capilares sobre el papel dejando 2 cm. sobre el borde inferior.

Los resultados fueron que no hubo presencia de flavonoides.

Ensayo negativo 3° el solvente se prepara con: cloroformo y etanol 2:1.

ESTRUCTURAS: En la semilla de Plukenetia volúbilis linneo

se encontró grasos:

los siguientes ácidos

COOH H3C

COOH H3C

4° revelador: en este caso se utilizo al FeCl3 para el reconocimiento de flavonoides.

CONCLUSIONES

1.

Las semilla de Plukenetia volúbilis l. tiene abundante cantidad de glúcidos.

2.

Al experimentar para ver los aceites fijos, esto nos explica la gran cantidad aceite omega 3 que posee esta semilla (Plukenetia volúbilis l.)

3.

Al realizar la cromatografía de capa fina para el reconocimiento de flavonoides esta resulta negativa lo que cabe deducir que tiene flavonoides.

4.

En la marcha de solubilidad, tenemos como resultado que el extracto es soluble en compuestos apolares.

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