Cultivo in vitro de yemas axilares de Vanilla planifolia Andrews
OBJETIVO
Dar la oportunidad de potencializar estos ejemplares únicos que aún existen, basándose en las metodologías de cultivo de yemas axilares y el uso de fitorreguladores que ayuden a aumentar el número de ejemplares.
MATERIALES Y EQUIPO •
Yemas axilares de plántula de vainilla
•
Medio de cultivo MS
•
Citosinas como:
6-Bencilaminopurina (BAP)
Kinetina (Kin)
meta-Topolina (mT)
Thiadiazuron (TDZ)
NaOH (hidróxido de sodio)
Sacarosa
Autoclave
Frascos
PRINCIPALES FACTORES NO BIOLÓGICOS QUE AFECTAN AL DESARROLLO DEL CULTIVO IN VITRO DE YEMAS Y CARACTERISTICAS AMBIENTE QUÍMICO • Composición del medio de cultivo • pH AMBIENTE FÍSICO • temperatura • luz
• humedad CARACTERISTICAS • Crecimiento en condiciones controladas • Crecimiento en condiciones de asepsia • Alta humedad relativa
• Estomas no funcionales • Ausencia de pelos radiculares • Ausencia de cera en la cutícula
tecnica
RESULTADOS
Se obtuvieron presumiblemente brotes adventicios de vainilla a partir de yemas axilares En la mayoría de los tratamientos se obtuvieron brotes definidos de color verde obscuro, los cuales presentaron hojas y raíces bien desarrolladas.
mientras que para los tratamientos con TDZ se desarrollaron brotes bulbosos que posteriormente, se convirtieron en múltiples brotes indefinidos, que con el tiempo se oxidaron y no se consolidaron como brote siendo esta la principal causa por la cual no se tomaron en cuenta estas formaciones vegetales, ya que no se podían identificar brotes definidos para poder emitir un resultado confiable
Solamente se contabilizaron los brotes que tuviera un tallo con hojas o primordios foliares de color verde, brotes reales, los registros se realizaron a los 30, 75, 90 y 120 días. Para la altura de los brotes, se utilizó un vernier digital
Una vez obtenidos los brotes a partir de los diferentes tratamientos con los reguladores del crecimiento, se pudo observar que la mayor generación de brotes, tomando en cuenta el regulador del crecimiento en su conjunto, se obtuvo con mT, teniendo en conjunto un total de 149 brotes después de 120 días de cultivo.
Para el caso de los tratamientos con el regulador del crecimiento BAP, la formación de brotes es directamente proporcional a la concentración del regulador del crecimiento utilizada, es decir, a mayor concentración, mayor número de brotes pero no es el mas eficaz ya que a los 90 días el numero de brotes descendió drásticamente.
el uso de Kin en el cultivo de yemas axilares de vainilla, utilizando 0.5 mg L-1 de Kin, en combinación con BAP, debido a que la utilización de Kin por sí sola no favoreció la formación de nuevos brotes y se obtuvieron 9,3 brotes por explante.
Así se observaron los brotes de las plantas tratadas con las diferentes citosinas a excepcion del TDZ
Brotes de la planta tratada con TDZ
CONCLUSIONES
La formación de brotes adventicios a partir de yemas axilares de vainilla, difiere del tipo de citocinina así como de la concentración utilizada. Se determina que existe una relación directamente proporcional a la concentración de regulador del crecimiento utilizada, con respecto a la formación de brotes
de vainilla a partir de yemas axilares, con excepción del regulador del crecimiento TDZ.