MECANISMOS DE REPLICACION DEL ADN
¿Cuál es el mecanismo que dirige la replicación?
¿Qué modelo de replicación de ADN se desarrolla en E.coli? Experimento de Melsenson y Stahl, 1958.
¿Qué modelo de replicación de ADN se desarrolla en E.coli?
La replicación theta origina dos moléculas de ADN circular
- La replicación theta es común en organismos que poseen ADN circular
La replicación por círculos rodantes produce moléculas de ADN circular
- La replicación por círculos rodantes se produce en algunos virus y en el factor F de E.coli
En los cromosomas eucariontes se desarrolla la replicación lineal del ADN
El proceso es diferentes para cada tipo de replicación Modelo theta
Replicación eucarionte lineal
Modelo por círculos rodantes
DNA polimerasa
Actividad correctora 3’-5’
Características de las ADN polimerasas PROCARIONTES POLIMERASA
I
II
III
Ubicación celular
EUCARIONTES
α
β
γ
δ
ε
núcleo
núcleo
mitocondria
núcleo
núcleo
Actividades enzimáticas Primasa
No
No
No
Sí
No
No
No
No
Polimerasa 5’→3’
Sí
Sí
Sí
Sí
Sí
Sí
Sí
Sí
3’-Exonucleasa (3’→5’) (Correctora)
Sí
Sí
Sí
No
No
Sí
Sí
Sí
5’-Exonucleasa (5’→3’) (Eliminación de partidores)
Sí
No
No
No
No
No
No
No
Función celular Replicación
No
No
Sí
Solo al inicio
No
Sí
Sí
Sí
Empalme de fragmentos de Okasaki
Sí
No
No
No
No
Sí
Sí
Velocidad de replicación Procesividad (nucleótidos por ciclo de asociación)
Baja 3-200
Media ≥104
Alta ≥5x105
Baja 100-200
Baja
Elevada
Elevada con PCNA ≥5000
Elevada con/sin PCNA
1
≥4
22
4
1
2
2-3
2
Composición Número de subunidades
Mecanismo de replicación en procariontes
Modelo de trombón para la horquilla replicativa de E.coli
Modelo de trombón para la horquilla replicativa de E.coli
Secuencias específicas del ADN genómico dirigen la iniciación de la duplicación del ADN
Verde: elementos de asociación de proteínas del complejo de iniciación Azul: elementos que facilitan el desenrollamiento del ADN Rojo: sitio de síntesis inicial
Replicador: - Región del ADN donde se inicia la replicación - Consta de un origen de replicación, regiones ricas en AT y segmentos de asociación para proteínas que inician la replicación.
Iniciación de la duplicación del ADN en E.coli
Iniciación de la replicación en eucariontes: Pasos en la formación de un complejo de pre-replicación (pre-RC)
ORC: complejo de reconocimiento de origen Cdc6 y Cdt1: proteínas reclutadoras de ADN helicasa Mcm2-7: DNA helicasa eucarionte
La formación y activación del complejo de pre-RC están reguladas para permitir una sola ronda de duplicación en cada ciclo celular
Eventos en la iniciación de la replicación en eucariontes
Eventos en la iniciación de la replicación en eucariontes
Actividades y funciones de las ADN polimerasa
Replicación del ADN mitocondrial
El problema de la duplicación de los extremos
El problema de la duplicación de los extremos
¿Qué ocurre con las histonas luego de la replicación?