Attachment.doc

KARYA TULIS ILMIAH UJI EFEKTIVITAS DIURETIK INFUSA BUAH BELIMBING WULUH (Averrhoa belimbi L) TERHADAP TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN

Oleh : NITA SHELVIA NIM : 1500066

PROGRAM STUDI DIPLOMA III FARMASI SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI RIAU YAYASAN UNIV RIAU PEKANBARU 2018

DAFTAR ISI Halaman DAFTAR ISI i DAFTAR TABEL

iv

DAFTAR GAMBAR v DAFTAR LAMPIRAN

vi

BAB I PENDAHULUAN

1

1.1. Latar Belakang....................................................................................1 1.2. Rumusan Masalah...............................................................................4 1.3. Tujuan Penelitian.................................................................................4 1.4. Manfaat Penelitian..............................................................................4 1.5. Ruang Lingkup....................................................................................4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA

5

2.1. Tujuan Umum Tumbuhan...................................................................5 2.1.1. Klasifikasi Tanaman...................................................................... 5 2.1.2. Morfologi Tumbuhan................................................................5 2.1.3. Nama Daerah............................................................................6 2.1.4. Khasiat Tanaman Belimbing Wuluh.........................................6 2.1.5. Habitat dan Penyebaran Tumbuhan..........................................7 2.1.6. Kandungan Kimia.....................................................................7 2.2. Diuretik...............................................................................................8 2.2.1. Pengertian Diuretik...................................................................8 2.2.2. Proses Pembentukan Kemih.....................................................9 2.2.3. Mekanisme Kerja Diuretik.....................................................10 2.2.4. Penggolongan Diuretik...........................................................11

i

2.2.5. Penggunaan Diuretik..............................................................14 2.2.6. Hewan Percobaan...................................................................15 2.3. Furosemid..........................................................................................18 2.4. Metode Pengujian Diuretik...............................................................19 2.5. Metode Ekstraksi...............................................................................21 BAB III METODOLOGI PENELITIAN 24 3.1. Waktu dan Tempat Penelitian............................................................24 3.2. Alat dan Bahan..................................................................................24 3.2.1. Alat.........................................................................................24 3.2.2. Bahan......................................................................................24 3.2.3. Hewan Percobaan...................................................................24 3.3. Rancangan Penelitian........................................................................25 3.4. Prosedur Kerja...................................................................................25 3.4.1. Pengambilan Sampel Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L).............................................................................25 3.4.2. Identifikasi Sampel.................................................................25 3.4.3. Skrining Fitokimia..................................................................26 3.4.4. Persiapan Hewan Percobaan...................................................27 3.4.5. Pembuatan Suspensi Na CMC 1%.........................................28 3.4.6. Pembuatan Suspensi Furosemid.............................................28 3.4.7. Pembuatan Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)..............................................................................29 3.4.8. Penentuan Dosis.....................................................................29 3.4.9. Pengelompokan Hewan Percobaan........................................30 3.4.10. Pengujian Efektivitas Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) dengan Metode Taylor dan Toplist ..............................................................................................31

ii

3.4.11. Pengukuran Volume Urin.....................................................31 3.5. Analisis Data.....................................................................................31 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

33

4.1. Hasil..................................................................................................33 4.2. Pembahasan.......................................................................................34 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

41

5.1. Kesimpulan.......................................................................................41 5.2. Saran..................................................................................................41 DAFTAR PUSTAKA

42

LAMPIRAN……………………………………………………………………. 45

iii

DAFTAR TABEL Tabel

Halaman

1. Hasil Uji Homogenitas Perlakuan......................................................................39 2. Hasil Skrining Fitokimia....................................................................................48 3. Tabel Konversi Dosis hewan percobaan dengan Manusia.................................50 4. Hasil Volume Urin Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan pada Pemberian Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L).......................................51 5. Hasil Deskriptif Statistik Terhadap Peningkatan Rata-rata Volume Urin Tikus Putih Jantan Secara Analisis Varian Satu Arah Menggunakan Program SPSS...................................................................................................52 6. Hasil Uji Lanjut Tukey Terhadap Peningkatan Rata-rata Volume Urin Tikus Putih Jantan Secara Analisis Varian Satu Arah Menggunakan Program SPSS..................................................................................................................53 7. Hasil Uji Homogenitas Terhadap Perlakuan......................................................54

iv

DAFTAR GAMBAR

Gambar

Halaman

1. Struktur Furosemid............................................................................................18 2. Tumbuhan Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)..........................................45 3. Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)...................................................45 4. Surat Identifikasi................................................................................................46 5. Panci Infusa........................................................................................................47 6. Skema Kerja Pembuatan Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L).......................................................................................................................55 7. Skema Uji Efektivitas Diuretik Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) Terhadap Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan...........................56

v

DAFTAR LAMPIRAN Lampiran

Halaman

1. Tumbuhan Belimbing Wuluh.............................................................................45 2. Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)...................................................45 3. Surat Identifikasi Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)......................46 4. Panci Infusa........................................................................................................47 5. Hasil Skrining Fitokimia Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)..........48 6. Perhitungan Dosis Suspensi Furosemid.............................................................49 7. Tabel Faktor Konversi Dosis Hewan Percobaan................................................50 8. Hasil Volume Urin Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan pada Pemberian Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L).......................................51 9. Hasil Deskriptif Statistik Terhadap Peningkatan Rata-rata Volume Urin Tikus Putih Jantan Secara Analisis Varian Satu Arah Menggunakan Program SPSS...................................................................................................52 10. Hasil Uji Lanjut Tukey Terhadap Peningkatan Rata-rata Volume Urin Tikus Putih Jantan Secara Analisis Varian Satu Arah Menggunakan Program SPSS.................................................................................................53 11. Hasil Uji Homogenitas Terhadap Perlakuan....................................................54 12. Skema Kerja Pembuatan Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)........................................................................................................55 13. Skema Uji Efektivitas Diuretik Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) Terhadap Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan.........................56

vi

vii

BAB I PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang Indonesia merupakan negara yang terkenal dengan kekayaan sumber daya alam yang melimpah. Kekayaan sumber daya alam yang dimiliki tersebut kemudian banyak dimanfaatkan oleh masyarakat untuk kebutuhan hidup seharihari diantaranya sebagai tanaman obat. Tanaman yang tumbuh di negara kepulauan ini sebanyak 90% merupakan tanaman obat yang banyak manfaatnya bagi kehidupan manusia (Nugroho, 2010). Salah satu bagian dari budaya dan kebiasaan bangsa Indonesia yang berkaitan dengan pemanfaatan kekayaan alam, yaitu untuk pemeliharaan kesehatan dan pengobatan penyakit dengan menggunakan bahan alami. Budaya tersebut diperoleh dari pengalaman secara turun-temurun. Bangsa Indonesia sangat mempercayai budaya dan kebiasaan yang dilakukan oleh nenek moyang mereka, karena dulu bangsa Indonesia bisa sehat menggunakan obat-obatan yang berasal asli dari alami. Aneka ragam tumbuhan di alam sekitar yang digunakan dapat memberikan

manfaat

kesehatan

bagi

penggunanya.

Kemudian

terus

dikembangkan lebih lanjut dan diwariskan turun temurun dari generasi ke generasi berikutnya, sehingga obat tradisional dapat dimanfaatkan sampai sekarang (Soedibyo, 1998). Masyarakat beranggapan bahwa obat tradisional dapat digunakan sebagai alternatif pengobatan disamping obat-obatan modern, kemudian masyarakat juga sudah mempunyai prinsip untuk kembali ke alam untuk mengobati beberapa

1

penyakit yang menurut mereka dapat diobati atau disembuhkan dengan tanaman yang ada disekitar lingkungan mereka (Latief, 2012). Perlu diketahui informasi yang memadai tentang ketepatan takaran/dosis, waktu penggunaan, cara penggunaan, pemilihan bahan secara benar, pemilihan obat tradisional untuk indikasi tertentu agar penggunaannya optimal dan baik dalam memberikan khasiat. Tanaman belimbing wuluh Averrhoa bilimbi (Linn.) merupakan salah satu tanaman yang digunakan sebagai obat alami. Belimbing wuluh mempunyai aktivitas farmakologi yaitu untuk menghilangkan rasa nyeri, antidiabetes, antiinflamasi, antihipertensi dan dapat mengurangi sariawan pada mulut. Tanaman belimbing wuluh memiliki kandungan kimia yaitu : kalium oksalat, saponin, flavonoid, pektin, tanin, asam galat dan asam ferulat (Soedibyo, 1998). Diketahui bahwa flavonoid adalah zat golongan fenol alam terbesar yang diketahui mempunyai berbagai khasiat seperti antiradang, memperlancar pengeluaran air seni, antivirus, antijamur, antibakteri, antihipertensi, mampu menjaga dan meningkatkan kerja pembuluh darah kapiler. Saponin merupakan glikosida yang memiliki sifat khas pembentuk busa. Saponin terdiri atas aglikogen polisiklik yang disebut sapogenin dan gula sebagai glikon. Sapogenin hadir dalam dua bentuk yaitu steroid dan triterpenoid. Pada penggunaan medis, saponin memiliki sifat menurunkan tegangan permukaan, meningkatkan absorpsi diuretik (terutama yang berbentuk garam), dan merangsang ginjal untuk bekerja lebih aktif (Gunawan, 2009). Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) mampu berkhasiat sebagai alternatif diuretik alami. Hasil penelitian tersebut menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah belimbing

2

wuluh pada dosis 2,5g/kgBB dan dosis 5g/kgBB memiliki potensi volume urin masing-masing sebanyak 38,97% dan 29,34% dari total volume urin yang disebabkan oleh furosemid 3 mg/kgBB. Hal ini membuktikan bahwa ekstrak etanol buah belimbing wuluh memiliki potensi sebagai diuretik alami meskipun tidak sekuat furosemid (Kusumorini & Yuskha, 2011). Telah dilakukan juga penelitian tentang potensi kerja ekstrak etanol buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) sebagai diuretik alami melalui pendekatan aktivitas diuretik, ph, kadar natrium, dan kalium. Hasil penelitian menunjukan bahwa setiap perlakuan mengalami peningkatan volume urin mulai dari jam ke-1 sampai dengan jam ke-2 dan mulai menurun pada jam ke-3. Total volume urin kelompok ekstrak 0,44 g/kg bb, dan ekstrak 0,88 g/kg bb memiliki nilai yang mendekati nilai volume urin kelompok furosemid. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah belimbing wuluh pada dosis 0,44 g/kgBB dan ekstrak 0,88 g/kg BB berpotensi sebagai diuretik (Poniman, 2011). Diuretik adalah obat yang dapat menambah kecepatan pembentukan urin. Istilah diuresis mempunyai dua pengertian, pertama menunjukkan adanya penambahan volume urin yang diproduksi dan yang kedua menunjukkan jumlah pengeluaran (kehilangan) zat-zat terlarut dan air. Fungsi utama diuretik adalah untuk memobilisasi cairan edema, yang berarti mengubah keseimbangan cairan sedemikian rupa sehingga volume cairan ekstrasel kembali menjadi normal (Lim, 2009). Berdasarkan uraian inilah peneliti tertarik melakukan pengujian efek diuretik infusa buah belimbing wuluh. Metode infusa cocok untuk senyawa yang tahan pemanasan dan tidak rusak pada keadaan suhu tinggi. Buah belimbing wuluh

3

mengandung flavonoid dan saponin yang dapat berkhasiat sebagai diuretik alami. Buah belimbing wuluh mempunyai rasa yang sangat asam, sehingga orang enggan untuk mengkonsumsi langsung dan menjadikan jus. Diharapkan dengan membuat infusa buah belimbing wuluh dapat mengurangi rasa asamnya. Hasil penelitian yang diperoleh diharapkan dapat memberikan informasi tambahan mengenai manfaat penggunaan tanaman belimbing wuluh sebagai salah satu obat alami yang berkhasiat sebagai diuretik atau sebagai pelancar pengeluaran urin. 1.2. Rumusan Masalah Berdasarkan uraian latar belakang diatas maka rumusan masalah adalah apakah Infusa dari buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) mempunyai efek diuretik terhadap tikus putih (Rattus norvegicus) jantan? 1.3. Tujuan Penelitian Dengan penelitian ini penulis bertujuan ingin mengetahui efektivitas diuretik infusa buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) terhadap tikus putih (Rattus norvegicus) jantan. 1.4. Manfaat Penelitian Diharapkan dengan adanya penelitian ini akan menambah informasi dan wawasan tentang kegunaan dan khasiat dari buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) khususnya sebagai obat diuretik atau hipertensi. 1.5. Ruang Lingkup Pada penelitian ini penulis hanya melakukan penelitian uji efektivitas infusa buah Belimbing Wuluh pada tikus putih jantan berdasarkan volume urin yang dikeluarkan.

4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Tujuan Umum Tumbuhan 2.1.1. Klasifikasi Tanaman (Hariana, 2013) Kingdom

: Plantae

Divisi

: Magnoliophyta

Kelas

: Magnoliopsida

Ordo

: Geraniales

Famili

: Oxalidaceae

Genus

: Averrhoa

Spesies

: Averrhoa belimbi L (Hariana, 2013)

Nama Daerah

: Belimbing Wuluh

2.1.2. Morfologi Tumbuhan Belimbing Wuluh ditanam sebagai pohon buah, kadang ditemukan tumbuh liar dan ada juga yang sengaja ditanam oleh masyarakat. Pohon yang berukuran sedang, tinggi mencapai 10 m dengan batang yang tidak begitu besar dan mempunyai garis tengah hanya sekitar 30 cm. Ditemukan di dataran rendah sampai 500 m dari pinggir pantai. Pohon yang berasal dari Amerika tropis ini menghendaki tempat tumbuh tidak terlalu dingin dan cukup lembab. Belimbing Wuluh mempunyai bentuk batang yang kasar berbenjol-benjol, percabangannya sedikit, arahnya condong ke atas, Cabang berwarna coklat muda. Daun berupa daun mejemuk menyirip ganjil dengan 21-45 pasang anak daun.

5

Anak daun bertangkai pendek, bentuknya bulat telur sampai lonjong, ujung runcing, pangkal membundar, tepi rata. Panjang 2-10 cm, lebar 1-3 cm, warnanya hijau, permukaan bawah hijau muda. Perbungaan berupa malai, berkelopak, keluar dari batang atau percabangan yang besar, bunga kecil-kecil berbentuk bintang warnanya ungu kemerahan atau sedikit berwarna merah kehitaman. Buahnya buah buni, bentuknya bulat lonjong bersegi, panjang 4–6,5 cm, warnanya hijau kekuningan, bila masak berair banyak, rasa sangat asam. Biji bentuknya bulat telur, gepeng. Rasa buah asam, digunakan sebagai sirop penyegar,

bahan

penyedap

masakan,

membersihkan

noda

pada

kain,

mengkilapkan barang-barang yang terbuat dari kuningan, membersihkan tangan yang kotor atau sebagai bahan obat tradisional. 2.1.3. Nama Daerah Nama asing dari belimbing wuluh diantaranya adalah bilimbi, cucumber

tree dan small sour starfruit (Inggris) (Hariana, 2004) sedangkan nama daerah diantaranya : limeng (Aceh), malimbi (Nias), balimbing (Lampung), calincing (Sunda), blimbing wuluh (Jawa), balimbeng (Flores), balimbing botol (Manado),

uteke (Irian Barat Daya) (Heyne, 1987). 2.1.4. Khasiat Tanaman Belimbing Wuluh Bunga belimbing wuluh dimanfaatkan sebagai obat tradisional untuk mengobati batuk, flu dan sariawan pada anak-anak (Heyne, 1987). Buah belimbing wuluh berkhasiat untuk mengobati seperti batuk, sariawan, hipertensi, diabetes mellitus, sakit perut, encok, bisul, menghilangkan bengkak jerawat. Daun belimbing wuluh mempunyai khasiat untuk mengobati bisul, jerawat, mengatasi ruam pada kulit (Wijayakusuma, 2006).

6

2.1.5. Habitat dan Penyebaran Tumbuhan Tanaman belimbing wuluh dapat hidup dengan baik di tempat terbuka yang terkena sinar matahari langsung, dan tidak dalam kondisi yang sangat panas atau musim kemarau, karena kondisi ini akan mempengaruhi kadar air yang ada dalam buah belimbing tersebut. Penyiraman dilakukan setiap hari baik pagi maupun sore kecuali pada musim penghujan, sebenarnya tanaman ini jika sudah tumbuh dewasa, maka tidak perlu dilakukan penyiraman setiap hari, karena tumbuhan ini akan tumbuh dengan sendirinya walaupun tanpa disiram. Pupuk yang digunakan dapat berupa pupuk buatan, kandang atau kompos (Suryowinoto, 1997). Tanaman belimbing wuluh dapat tumbuh dengan alami di daratan Asia beriklim tropis lembab, pada ketinggian kurang dari 500 meter di atas permukaan laut (dpl) dengan sistem pengairan yang baik. Perkembangbiakan dapat dilakukan dengan biji (generatif) atau dengan cara penyambungan, penempelan atau pencangkokan (vegetatif). Buah pertama muncul setelah umur antara 4 sampai 5 tahun dan dapat berbuah sepanjang tahun dengan menghasilkan buah yang sangat banyak dan kaya akan manfaatnya (Sudarsono, dkk, 2002). 2.1.6. Kandungan Kimia Kandungan kimia pada tanaman belimbing wuluh yaitu pada daunnya mengandung saponin, flavonoid, tanin, sulfur, asam format, kalium sitrat dan kalium oksalat, sedangkan tangkai daun belimbing wuluh mengandung alkaloid dan kalsium oksalat, polifenol. Batang pada tanaman belimbing wuluh ini mengandung senyawa saponin, tannin, glukosida, kalsium oksalat, sulfur, asam format, peroksidase sedangkan buah belimbing wuluh mengandung senyawa

7

flavonoid, saponin, alkaloid dan triterpenoid serta bunga belimbing wuluh mengandung golongan senyawa kimia yang bersifat sebagai antibakteri seperti saponin, flavonoid dan polifenol (Permadi, 2006). 2.2. Diuretik 2.2.1. Pengertian Diuretik Diuretik menurut (Bistani, 2006) adalah obat yang bekerja langsung pada ginjal yang meningkatkan produksi urin dan garam natrium, selanjutnya natrium dikeluarkan bersama klorida dalam bentuk NaCl. Efek utama diuretik secara umum adalah mengurangi reabsorpsi natrium dan klorida serta air pada tubulus ginjal. Diuretik merupakan obat yang dapat meningkatkan laju ataupun volume eksresi urin. Obat ini dapat bekerja pada bagian tempat nefron untuk menimbulkan diuresis (meningkatnya produksi urin). Sebagian besar diuretik ini dapat menghambat reabsorpsi ion garam (Na+) dari nefron kedalam sirkulasi sehingga menyebabkan peningkatan natriuresis (ekskresi ion natrium didalam urin). Beberapa obat diuretik ini juga dapat menyebabkan peningkatan kaliuresis (ekskresi kalium dalam urin). Selain itu, diuretik juga sangat berpengaruh terhadap ekskresi ion magnesium, kalsium, klorida dan bikarbonat (Lim, 2009). Efek utama dari berbagai jenis obat diuretik terbatas pada berbagai segmen nefron. Semua jenis diuretik dapat menyebabkan peningkatan natriuresis dan diuresis, tetapi pengetahuan tempat kerja khusus penting untuk menyeleksi obat yang tepat dan mencegah terjadinya komplikasi. Setiap obat memiliki efek yang spesifik untuk menjadi tujuan kerja dari obat tersebut, sehingga kombinasi dua ataupun lebih obat akan menimbulkan efek yang sinergistik (Lim, 2009).

8

2.2.2. Proses Pembentukan Kemih Organ yang membantu dalam proses pembentukan urin ataupun kemih yaitu ginjal. Ginjal memiliki fungsi sebagai pengaturan keseimbangan air, pengaturan konsentrasi garam dalam darah dan keseimbangan asam-basa darah, dan ekskresi bahan buangan dan kelebihan garam. Keseimbangan yang terjadi antara asupan Na+ dari makanan secara terus menerus dapat menyebabkan ketidakmampuan untuk hidup (Pearce, 2009). Proses terjadinya diuresis dimulai dengan terjadinya pengaliran darah kedalam glomeruli (gumpalan kapiler) yang terletak dibagian luar ginjal, tempat proses darah disaring. Setiap menit kira-kira 1 liter darah yang mengandung 500 cc plasma, mengalir melalui semua glomeruli dan sekitar 100 cc (10%) dan itu akan disaring keluar (Pearce, 2009).

Proses penyaringan ini disebut dengan

proses filtrasi. Plasma yang berisi semua garam, glukosa, dan benda halus lainnya, disaring, sel dan protein plasma terlalu besar untuk dapat menembus pori saringan dan tetap tinggal dalam aliran darah dan akan diserap kembali oleh tubulus proksimal dan lengkung henle. Proses penyerapan kembali zat yang masih berguna ini disebut dengan proses reabsorpsi. Penyerapan kembali dari urin primer akan menghasilkan zat yang disebut dengan urine sekunder (kadar urea yang sangat tinggi) (Katzung, 2002). Urin sekunder yang dihasilkan tubulus proksimal dan lengkung henle akan mengalir menuju kontortus distal. Urin sekunder akan mengalir melalui pembuluh darah untuk melepaskan zat-zat yang sudah tidak digunakan lagi bagi tubuh. Selanjutnya akan terbentuknya urin sesungguhnya, urin ini akan mengalir dan berkumpul ditubulus kolektivus yang akan bermuara ke rongga ginjal serta akan

9

dikeluarkan melalui ureter untuk masuk kedalam kandung kemih dan selanjutnya akan dikeluarkan melalui uretra (Katzung, 2002). 2.2.3. Mekanisme Kerja Diuretik Obat diuretik ini dapat bekerja dengan mengurangi reabsorpsi natrium, dan air sehingga pengeluarannya lewat kemih diperbanyak. Obat-obat ini bekerja khusus terhadap tubuli tetapi juga bekerja ditempat lain, yaitu : (Lim, 2009) 1) Tubuli Proksimal Tubulus ini merupakan tempat penting bagi reabsorpsi dan sekresi. Semua glukosa, asam amoni dan zat organik yang lainnya yang sudah difiltrasi melalui tubulus ini di reabsorpsi. Sekitar 85% natrium bikarbonat di reabsorpsi dan dapat dihambat oleh Carbonic anhydrase inhibitor. Karena reabsorpsi berlangsung secara proporsional, maka susunan filtrat tidak akan berubah dan akan tetap isotonik terhadap plasma. Diuretik osmotik (manitol, sorbitol) bekerja disini dengan menghalangi reabsorpsi air dan juga ion natrium. 2) Lengkungan Henle Lengkungan Henle ini bertanggung jawab bagi reabsorpsi sebesar 35% Natrium klorida yang di filtrasi. Dibagian menaik dari lengkungan henle, ion Cl- yang telah difiltrasi dan diabsorpsi secara aktif, disusul dengan reabsorpsi pasif dari ion Na+ dan ion K+ tetapi tanpa air, sehingga filtrat menjadi hipotonis. Diuretik lengkungan seperti furosemid, bumetanid dan etakrinat, bekerja terutama dilengkungan henle dengan merintangi transport ion Cl- dan demikian reabsorpsi ion Na+ , pengeluaran ion K+ dan air juga diperbanyak. 3) Tubuli Distal

10

Dibagian pertama segmen ini, ion Na+ direabsorpsi secara aktif pula tanpa air hingga filtrat menjadi lebih cair dan lebih hipotonis. Senyawa thiazid dan klortalidon bekerja ditubuli distal dengan memperbanyak ekskresi ion Na+ dan Cl- sekitar 5-10%. Dibagian kedua segmen ini, ion Na + ditukarkan dengan ion K+ atau ion NH4+, proses ini dikendalikan oleh hormon anak ginjal aldosteron. Antagonis aldosteron (spironolakton) dan zat-zat penghemat kalium (amilorid, triamteren) memiliki titik kerja disini dengan mengakibatkan ekskresi ion Na+ (kurang dari 5%) dan retensi ion K+. 4) Saluran Pengumpal Tempat ini menyesuaikan komposisi dan volume urin dengan cara mengatur komposisi cairan ekstraseluler dan pH sehingga dapat mempertahankan homeostatis fisiologinya. Tempat ini merupakan tempat kerja bagi Aldosteron dan hormon antidiuretik. Aldosteron merupakan mineralokortikoid yang dapat meningkatkan reabsorpsi natrium sehingga dapat meninggkatkan retensi natrium di dalam tubuh. Hormon antidiuretik (Vasopresin) meningkatkan reabsorpsi air dan konsentrasi urin. 2.2.4. Penggolongan Diuretik Diuretik dapat dibagi menjadi beberapa kelompok dengan mekanisme kerja masing-masing, sebagai berikut : (Gunawan, 2009) 1) Diuretik Kuat Obat golongan ini memiliki khasiat yang kuat dan bekerja dipusat terapi yang agak singkat (4-6 jam). Banyak digunakan pada keadaan yang akut, misalnya pada saat udema otak dan paru-paru. Memperlihatkan kurva dosis-efek curam, artinya bila dosis ini dinaikkan efeknya (diuresis)

11

senantiasa bertambah pula. Contoh obat : furosemid, bumetanid, torsemid dan asam etakrinat. Mekanisme kerja : Obat ini menghambat kerja ko-transpor ion Na+/K+/2CL- yang terletak dimembran luminal ansa henle, oleh karena itu reabsorpsi ion Na + ,ion K+ dan ion Cl- menurun, sehingga tidak menyebabkan peningkatan cairan tubuh. 2) Diuretik Thiazid Efeknya lebih lemah dan lambat, tetapi bertahan lebih lama (6-48 jam) dan terutama digunakan pada terapi pemeliharaan hipertensi dan kelemahan jantung. Obat golongan ini memiliki kurva dosis-efek datar, artinya bila dosis optimal dinaikkan lagi efeknya (diuresis, penurunan tekanan darah) tidak bertambah. Contoh obat : hidroklortiazhid (HCT), klorotiazid, bendroflumetazid, hidroflumetazid, klortalidon dan indapamid. Mekanisme kerja : Golongan obat ini bekerja terutama pada tubulus distal bagian awal untuk memblokir ko-transporter ion NaCl dimembran luminal sel tubulus. 3) Diuretik Hemat Kalium Efek obat-obat golongan ini hanya lemah dan khusus digunakan terkombinasi dengan diuretik lainnya untuk menghemat ekskresi kalium. Absorpsi triamteren melalui saluran cerna baik sekali, obat ini hanya diberikan secara oral. Efek diuresisnya biasanya mulai tampak setelah 1 jam, amilorid dan triamteren peroral diserap kira-kira 50% dan efek diuresisnya terlihat setelah 6 jam dan berakhir sesudah 24 jam. Contoh obat : antagonis aldosteron, triamteren dan amilorid. Mekanisme kerja : Antagonis aldosteron bersaing dengan aldosteron untuk menduduki reseptor disel epitel tubulus koligentes kortikalis, hal ini dapat menurunkan reabsorpsi ion Na+ dan sekresi ion Ca+ disegmen tubulus

12

tersebut. Akibatnya, ion Na+ menumpuk didalam tubulus dan bekerja sebagai diuretik osmotik, dan menyebabkan peningkatan ekskresi air dan ion Na+ . Obat ini juga akan menurunkan ekskresi ion Ca+ karena antagonis aldosteron memindahkan ion Ca+ dari sel kecairan ekstrasel. 4) Diuretik Osmotik Diuretik osmotik ini absorpsi nya kurang baik, yang berarti bahwa obat ini harus diberikan secara parenteral. Manitol diekskresikan melalui filtrasi glomerulus dalam waktu 30-60 menit. Contoh obat : manitol, urea, gliserin dan isosorbit. Mekanisme Kerja : Diuretik osmotik terutama bekerja ditubulus proksimal dan cabang desenden ansa henle. Golongan obat ini di reabsorpsi sedikit oleh tubuli sehingga reabsorpsi air juga terbaca. Efeknya adalah diuresis osmosis dengan ekskresi air tinggi dan relatif sedikit ekskresi ion Na+ . 5) Penghambat Karbonik Anhidrase Peningkatan pH urin akibat diuresis HCO 3- (bikarbonat) tampak dalam waktu 30 menit, maksimal setelah 2 jam, dan bertahan selama 12 jam setelah pemberian dosis tunggal. Contoh : asetazolamid, diklorfenamid. Mekanisme kerja : Asetazolamid bekerja dengan menghambat enzim karbonik anhidrase, yang penting untuk reabsorpsi ion HCO 3- ditubulus proksimal. Karbonik anhidrase menumpuk ditubulus proksimal, yang merupakan tempat utama kerjanya inhibitor karbonik anhidrase. Karena sekresi ion hidrogen dan reabsorpsi ion bikarbonat ditubulus proksimal berbarengan dengan reabsorpsi ion natrium melalui mekanisme transport imbangan ion NaH dimembran luminal, penurunan reabsorpsi ion bikarbonat juga menur unkan reabsorpsi ion natrium. Pengh ambatan reabsorpsi ion Na dan ion HCO3- dari cairan tubulus mengakibatkan ion-ion ini menumpuk di tubulus

13

dan bekerja sebagai diuretik osmotik. Seperti yang diperkirakan, kerugian inhibitor karbonik anhidrase adalah menyebabkan asidosis akibat terjadinya kehilangan ion-ion bikarbonat secara berlebihan dalam urin. 2.2.5. Penggunaan Diuretik Obat-obat diuretik dapat digunakan pada semua keadaan bilamana dikehendaki peningkatan pengeluaran air urin, khususnya pada hipertensi dan gagal jantung. Diuretik ini dapat menurunkan kadar garam yang ada dalam tubuh yang menjadi penyebab dari terjadinya peningkatan tekanan darah tinggi. 1) Hipertensi Untuk mengurangi volume darah seluruhnya sehingga tekanan darah (tensi) menurun. Khususnya derivat thiazida digunakan untuk indikasi ini. Diuretik lengkungan pada jangka panjang ternyata lebih ringan efek antihipertensinya lagipula t½ nya singkat, oleh karena itu hanya digunakan bila ada kontra-indikasi untuk thiazida, seperti pada insufiensi ginjal (Katzung et al , 2009). Mekanisme kerjanya diperkirakan berdasarkan penurunan daya tahan pembuluh perifer. Dosis yang diperlukan untuk efek antihipertensi jauh lebih rendah daripada dosis diuretik. Thiazida memperkuatkan efek obat-obat hipertensi betablocker dan ACE-inhibitor, sehingga sering dikombinasi dengannya. Penghentian pemberian thiazida pada lansia tidak boleh dengan mendadak, karena resiko timbulnya gejala kelemahan jantung dan peningkatan tensi. 2) Gagal Jantung Obat diuretik juga dapat digunakan untuk mengobati penyakit gagal jantung, yang mana memiliki ciri peredaran darah yang tidak sempurna lagi dan terdapat cairan berlebihan dijaringan. Akibat air yang

14

tertimbun akan terjadi udema, misalnya dalam paru-paru (udema paru). Begitu pula pada sindrom nefrotik yang bercirikan udema tersebar akibat proteinuria hebat karena permeabilitas membran glomeruli meningkat atau pada busung perut (ascites) dengan air menumpuk dirongga perut akibat sirosis hati (hati mengeras). Untuk indikasi ini terutama digunakan diuretik lengkungan dan dalam keadaan parah akut secara intravena (Asthma cardiale, udema paru). Thiazida dapat memperbaiki efeknya pada pasien dengan insufisiensi ginjal (Gunawan, 2009). 2.2.6. Hewan Percobaan Terdapat beberapa jenis hewan uji yang bisa digunakan dalam percobaan, yaitu : (Kusumawati, 2004).

1) Mencit Mencit yang sudah dipelihara dilaboratorium sebenarnya masih satu family dengan mencit liar. Sedangkan mencit yang paling sering digunakan untuk penelitian biomedis adalah Mus musculus. Berbeda dengan hewan-hewan lainnya, mencit tidak memiliki kelenjer keringat. Pada umur empat minggu berat badannya mencapai 18-20 gram. Jantung terdiri dari empat ruang dengan dinding atrium yang tipis dan dinding ventrikel yang lebih tebal. Peningkatan temperatur tubuh tidak mempengaruhi tekanan darah, sedangkan frekuensi jantung cardiac output berkaitan dengan ukuran tubuhnya. Hewan ini memiliki karakter yang lebih aktif

15

pada malam hari dari pada siang hari. Traktus urinaria pada mencit terdiri dari ginjal, ureter, vesica urinaria dan urethra. Urin yang dikeluarkan setiap kali hanya satu atau dua tetes tetapi konsentrasinya sangat tinggi. 2) Tikus Ukuran tubuh tikus yang lebih besar daripada mencit membuat tikus lebih disukai untuk berbagai macam penelitian. Berbeda dengan hewan laboratorium lainnya, tikus tidak pernah muntah. Disamping itu juga tikus tidak memiliki kelenjar empedu. Pada umur 2 bulan berat badannya dapat mencapai 200-300 gram. Tikus putih jantan memiliki kondisi biologis yang lebih stabil yang tidak dipengaruhi oleh adanya siklus estrus (menstruasi) dan kehamilan seperti tikus putih betina. Tikus putih tidak begitu fotofobik seperti halnya mencit. Tikus tergolong hewan yang mudah dipegang tetapi bila dibandingkan mencit, ia kurang photophobic. 3) Hamster Hamster termasuk dalam family Cricetidae, order Rodentia. Keunikan yang tidak dimiliki oleh spesies lainnya adalah hamster memiliki sepasang kantung pipi yang terletak dilateral leher dan kepala, tempat makanan disimpan untuk sementara. Siklus hidup yang relatif singkat membuat hamster disukai untuk penelitian mengenai perkembangan dan efek-efek teratogenik suatu bahan. 4) Kelinci Kelinci selain digunakan secara luas dalam eksperimeneksperimen, juga sebagai spesies yang bagus untuk model pengajaran prinsip fisiologis dan bedah mamalia. Beberapa penelitian yang sering menggunakan kelinci sebagai hewan coba

16

adalah

arteriosklerosis,

glaucoma,

tumor,

imunologi,

cardiomiopati, hipertensi, teratologi dan toksikologi. Kelinci jarang urinasi, tetapi kuantitasnya relatif besar yakni 30-35 ml/hari yang tergantung dari kuantitas serta tipe makanan atau minumannya. 5) Guinea Pig Hewan ini termasuk hewan coba yang mudah diperiksa secara klinis. Sebagai hewan coba, guinea pig dapat digunakan untuk penelitian ekstensif dalam bidang imunologi, genetik, penyakitpenyakit infeksius, nutrisi dan gnotobiology. Kelebihan Guinea pig dengan yang lain adalah mudah di infeksikan dengan germ tuberculosis dan termasuk salah satu hean untuk didiagnosa tuberculosis pada manusia. 6) Ayam Ayam memiliki peranan cukup penting dalam penelitian virologi. Alat percernaannya sederhana dan relatif pendek serta sangat efisien. 7) Anjing dan Kucing Anjing dan kucing sangat sering digunakan dalam penelitian biomedis karena anatomi, fisiologi dan respon terhadap penyakit mereka sama dengan manusia. Berbagai pengetahuan mengenai fisiologi,

patologi,

imunologi,

bedah,

biokimia,

nutrisi,

farmakologi dan toksikologi didasarkan pada penelitian dihewan ini. 2.3. Furosemid

17

O O

HO 2HN HN

O S O

Cl

Gambar 1. Struktur Furosemid (Schmitz et al, 2003)

Furosemid merupakan turunan dari sulfonamid berkhasiat sebagai diuretik kuat dengan titik kerja dilengkungan henle bagian menaik. Sangat efektif pada keadaan udema otak dan paru-paru yang akut. Mulai kerjanya pesat, oral dalam 0,5-1 jam dan bertahan selama 4-6 jam, intravena dalam beberapa menit dan lamanya 2,5 jam. Dosis pada udema oral 40-80 mg pagi setelah makan, bila perlu atau pada insufisiensi ginjal sampai 250-2000 mg sehari dalam 2-3 dosis. Injeksi intravena (perlahan) 20-40 mg, pada keadaan kemelut hipertensi sampai 500 mg. Penggunaan antihipertensi monoterapi yang paling banyak digunakan adalah golongan diuretik yaitu furosemid (6%) (Salwa, 2013). Kelarutan pada furosemid yaitu praktis tidak larut dalam air, mudah larut dalam aseton, mudah larut dalam dimetilformamida, mudah larut dalam larutan alkali hidroksida, larut dalam methanol, agak sukar larut dalam etanol, sukar larut dalam eter dan sangat sukar larut dalam kloroform (Anonim, 2001).

18

2.4. Metode Pengujian Diuretik Beberapa metode yang digunakan untuk pengujian diuretik antara lain adalah : (Vogel, 2006). 1) Aktivitas Diuretik pada Tikus (Uji Lipschtiz) Pada metode ini pengujian dilakukan berdasarkana ekskresi air dan natrium pada hewan uji, dan dibandingkan dengan kontrol yang diberi urea dosis tinggi. Nilai Lipschtiz adalah hasil bagi antara ekskresi pada hewan yang diuji dengan ekskresi pada hewan yang diberikan urea. 2) Aktivitas Saluretik pada Tikus Pada metode ini jumlah natrium dan klorida yang di ekskresikan oleh hewan uji dikalkulasikan sebagai parameter untuk aktivitas saluretik. Sebagai perbandingan digunakan obat diuretik hemat kalium (triamteren atau amilorid) (Vogel, 2006). 3) Metode Kliren Metode kliren merupakan metode tidak langsung untuk mengevaluasi fungsi ginjal dan tempat kerja diuretic dan senyawa lain dalam ginjal. Hewan uji yang digunakan adalah anjing. Dengan metode ini dapat ditentukan dengan jumlah ekskresi air dan elektrolit., Glomerular Filtration Rate (GFR), Renal Plasma Flow (RPF) dan aktivitas plasma renin. Hasil senyawa uji dibandingkan secara statistik dengan kontrol dan obat standart yang diperlukan pada hewan uji (Vogel, 2006). 4) Metode Taylor dan Toplist Hewan uji yang digunakan adalah tikus jantan dengan berat 175-225 gram, sehari sebelum percobaan 60 ekor tikus tidak diberi makan tetapi hanya diberi minum, kemudian hewan dikelompokkan menjadi 6 kelompok, 3 kelompok diberi hidroklortiazhid secara oral dengan

19

dosis 0,1 ; 0,4 dan 1,6 mg/kgBB dan 3 kelompok lainnya diberi senyawa uji. Kemudian tikus dimasukkan kedalam wadah masingmasing dan ditampung urinnya. Urin dikumpulkan selama 4 jam. Kemudian 2 sampel urin dari masing-masing kelompok di kombinasikan untuk menentukan konsentrasi sodium (Vogel, 2006).

2.5. Metode Ekstraksi (Anonim, 2000) Salah satu metode yang digunakan untuk penemuan obat tradisional adalah metode ekstraksi. Pemilihan metode ekstraksi ini tergantung pada sifat bahan dan senyawa yang akan di isolasi. Sebelum memilih suatu metode, target ekstraksi perlu ditentukan terlebih dahulu (Mukhrian, 2014). Secara umum metode ekstraksi dibagi dua macam yaitu ekstraksi tunggal dan ekstraksi bertingkat. Ekstraksi tunggal adalah melarutkan bahan yang akan diekstrak dengan satu jenis pelarut. Kelebihan dari metode ini yaitu lebih sederhana dan tidak memerlukan waktu yang lama, akan tetapi rendemen yang dihasilkan sangat sedikit. Adapun metode ekstraksi bertingkat adalah melarutkan bahan atau sampel dengan menggunakan dua atau lebih pelarut. Kelebihan dari metode ekstraksi bertingkat ini ialah dapat menghasilkan rendemen dalam jumlah yang besar dengan senyawa yang berbeda tingkat kepolarannya. Ekstraksi bertingkat dilakukan secara berturut-turut yang dimulai dari pelarut non polar berupa n-heksana, selanjutnya pelarut semipolar berupa etil asetat dan dilanjutkan dengan pelarut polar seperti metanol atau etanol (Anonim, 2000). Pembagian metode ekstraksi menurut Anonim (2000) yaitu : a. Maserasi

20

Maserasi

merupakan

proses

pengekstrakan

simplisia

kering

dengan

menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar). Secara teknologi maserasi ini termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pancapaian konsentrasi pada keseimbangan, metode ekstraksi ini digunakan untuk senyawa yang sama sekali tidak tahan dengan pemanasan dengan suhu biasa maupun dengan suhu tinggi, karena dapat merusak kandungan dari simplisia tersebut. b. Perkolasi Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna, yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses ini terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan atau penampungan ekstrak), terus menerus sampai diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1 sampai 5 kali bahan. c. Refluks Refluks merupakan ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk pada proses ekstraksi yang sempurna. Ekstraksi dengan cara ini pada dasarnya adalah ekstraksi berkesinambungan. Bahan yang akan diekstraksi direndam dengan cairan penyari dalam labu alas bulat yang dilengkapi dengan alat pendingin tegak, lalu dipanaskan sampai mendidih. Cairan penyari akan menguap, uap tersebut akan diembunkan dengan pendingin tegak dan akan kembali menyari zat aktif dalam simplisia tersebut,

21

demikian seterusnya. Ekstraksi ini biasanya dilakukan 3 kali dan setiap kali diekstraksi selama 4 jam (Harborne, 1987). d. Sokletasi Sokletasi adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut yang selalu baru dan yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstrak kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik.

e. Infusa Infusa merupakan sedian cair yang dibuat dengan menyari simplisia nabati dengan air pada suhu 900C sambil sesekali diaduk. Kalau tidak dikatakan lain infusa diserkai selagi panas kemudian ditambahkan air panas secukupnya melalui ampas sehingga diperoleh volume infusa yang dikehendaki. Infus juga dapat dikatakan sebagai proses ekstraksi dengan palarut air pada temperatur penangas air, bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur 90 0C selama pada waktu tertentu yaitu 15 menit (Djamal, 1998). f. Dekokta Dekokta adalah ekstraksi simplisia dengan menggunakan pelarut air pada temperatur titik didih air selama 30 menit atau lebih.

22

BAB III METODOLOGI PENELITIAN 3.1. Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian

ini

akan

dilaksanakan

di

Laboratorium

Farmakologi

Laboratorium Farmasetika dan Laboratorium Penelitian Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau pada bulan Mei sampai dengan Juni 2018. 3.2. Alat dan Bahan 3.2.1. Alat Alat yang digunakan yaitu timbangan hewan, kandang pemeliharan hewan uji, kandang metabolit, timbangan analitik, panci infusa, sonde oral, pipet tetes, plat tetes, bunsen, penjepit buaya, lumpang dan stanfer, tabung reaksi (Pyrex®), dan kapas, stopwatch, toples, masker, handscoon, spuit, vial. 3.2.2. Bahan Bahan-bahan yang digunakan yaitu aquades, furosemid tablet 40 mg, Na CMC 1%, Norit, asam sulfat pekat, asam asetat anhidrat, amoniak 0,05 N, Asam sulfat 2N, Pereaksi Mayer, Logam magnesium, ferri klorida dan asam klorida pekat. 3.2.3. Hewan Percobaan Hewan percobaan pada penelitian ini adalah Tikus putih jantan (Rattus norvegicus) dengan berat 150-200 gram yang berumur sekitar 2-3 bulan sebanyak 15 ekor yang dibagi menjadi beberapa kelompok dan masing-masing kelompok terdiri dari 3 ekor tikus putih jantan yang dipilih secara acak.

23

3.3. Rancangan Penelitian 1) Pengambilan sampel buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) 2) Identifikasi sampel buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L) 3) Skrining fitokomia 4) Persiapan hewan uji 5) Pembuatan suspensi Na CMC 1% 6) Pembuatan suspensi Furosemid 7) Pembuatan infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L) 8) Perencanaan dosis 9) Pengelompokan hewan uji 10) Pengujian efektivitas diuretik infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) dengan metode Taylor dan Toplist 11) Pengukuran volume urin 12) Analisis data 3.4. Prosedur Kerja 3.4.1. Pengambilan Sampel Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) Buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) diambil dari Desa Simpang Kubu Kecamatan Kampar Kabupaten Kampar Provinsi Riau. Buah belimbing wuluh yang diambil dalam pengujian efektivitas diuretik infusa terhadap tikus putih jantan adalah buah yang masih hijau,segar dan tidak busuk. 3.4.2. Identifikasi Sampel Identifikasi tumbuhan untuk penelitian ini dilakukan di Laboratorium Botani jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Riau Pekanbaru. 3.4.3. Skrining Fitokimia 1. Uji Alkaloid Buah Belimbing Wuluh yang segar digerus dalam lumpang, ditambahkan 5 ml kloroform dan 5 ml kloroform amoniak 0,05 N, digerus dengan perlahan, saring larutan dengan meletakkan kertas saring di dalam

24

lumpang, masukkan hasil saringan ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 10 tetes asam sulfat 2N kocok selama 1 menit. Biarkan sampai terjadi pemisahan. Setelah itu diambil lapisan asam (atas) dan pindahkan kedalam tabung reaksi lain dan tambahkan beberapa tetes pereaksi mayer. Reaksi positif ditandai dengan adanya kabut putih hingga gumpalan putih atau endapan atau dengan menggunakan pereaksi Dragendorff akan terbentuk warna jingga. 2. Pemeriksaan Flavonoid, Fenolik, Terpenoid, Steroid dan Saponin Buah Belimbing Wuluh yang segar digerus, kemudian masukkan ke dalam tabung reaksi dan dimaserasi dengan etanol lalu dipanaskan selama 15 menit sampai pelarut etanol menguap hingga kering. Setelah kering ditambah 5 ml aquades dan kloroform didalam tabung reaksi, lalu kocok kuat dan dibiarkan beberapa saat sampai terbentuk dua lapisan atau pemisahan. Lapisan air digunakan untuk pengujian flavonoid, fenolik dan saponin sedangkan lapisan kloroform digunakan untuk uji terpenoid dan steroid. a. Uji Flavonoid Beberapa tetes lapisan air di masukkan kedalam plat tetes, dimasukkan 2 butir logam Mg dan 2 tetes asam klorida pekat. Terbentuk warna jingga, merah muda sampai merah yang menunjukkan adanya flavonoid. b. Uji Fenolik Beberapa tetes lapisan air dipindahkan ke plat tetes dan ditambahkan beberapa tetes larutan besi (III) klorida 1%, reaksi ditandai dengan terbentuk warna biru, biru gelap sampai ungu yang menunjukkan adanya senyawa Fenolik. c. Uji Saponin

25

Ambil beberapa mL lapisan air masukkan kedalam tabung reaksi dikocok kuat, bila terbentuk busa yang tetap selama 5 menit menandakan adanya saponin. d. Uji Terpenoid dan Steroid Lapisan kloroform disaring dengan norit yang diletakkan kedalam pipet tetes yang diberi kapas ujungnya, kemudian ditampung pada tiga lubang plat tetes, setelah kering pada lubang pertama ditambahkan pereaksi asam asetat anhidrat, lobang kedua ditambahkan asam sulfat pekat dan lobang ketiga ditambahkan asam asetat anhidrat dan asam sulfat pekat sama banyak, bila terbentuk warna merah menunjukkan adanya senyawa terpenoid dan warna biru-ungu atau biru-hijau menunjukkan adanya senyawa steroid. 3.4.4. Persiapan Hewan Percobaan Hewan yang digunakan pada penelitian ini yaitu menggunakan tikus putih jantan yang dalam keadaan sehat sebanyak 15 ekor dengan berat badan antara 150-200 gram. Hewan ini diaklimatisasi atau melakukan pengadaptasian hewan tersebut dengan lingkungan yang ada disekitarnya selama 7 hari dengan diberi makan dan minum yang cukup. Sebelum melakukan penelitian, hewan dinyatakan sehat apabila selama pengamatan tidak menunjukkan deviasi bobot badan yang berarti ( ≥10%) dan secara visual memperlihatkan perilaku yang normal atau sehat (Anonim, 2014). 3.4.5. Pembuatan Suspensi Na CMC 1% Serbuk Na CMC ditaburkan di atas air panas di dalam lumpang, air yang digunakan 20 kali berat dari Na CMC. Biarkan selama 15 menit hingga Na CMC

26

mengembang lalu digerus di dalam lumpang dengan cepat, kemudian tambahkan air sedikit demi sedikit hingga 10 ml sampai homogen. Suspensi dimasukkan ke dalam vial yang sebelumnya sudah dikalibrasi. 3.4.6. Pembuatan Suspensi Furosemid a. Dosis Furosemid untuk manusia

= 40 mg/hari = 40 m bg/70 KgBB

b. Dosis Furosemid untuk Tikus

= 40 mg/70 KgBB x 0,018 = 0,72 mg/200 gBB = 3,6 mg/ kgBB

c. Timbang tablet Furosemid dan digerus sampai halus d. Timbang serbuk yang dibutuhkan untuk 10 ml sebanyak 15,54 mg dari berat seluruh tablet Furosemid yang di gerus halus. e. Suspensikan serbuk tersebut dengan larutan pensuspensi Na CMC 1% ad 10 ml (konsentrasi suspensi Furosemid 0,36 mg/ml) 3.4.7. Pembuatan Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) Infusa dibuat dari buah belimbing wuluh 10% b/v (Anonim, 1995) dengan cara sebagai berikut, buah belimbing wuluh seberat 10 gram kemudian dimasukkan ke dalam panci infusa, ditambahkan aquades hingga 100 ml. Buah belimbing wuluh yang telah ditambahkan aquades dipanaskan menggunakan penangas air selama 15 menit terhitung setelah suhu mencapai 90ºC didalam panci infusa, sambil sekali-sekali diaduk. Serkai selagi panas menggunakan kain flanel. Jika volume infusa kurang dari 100 ml dapat ditambahkan dengan air panas

27

yang dilewatkan pada ampas buah belimbing wuluh hingga memperoleh hingga100 ml infusa buah belimbing wuluh. Infusa buah belimbing wuluh yang diberikan sebagai perlakuan pada tikus yaitu dengan 3 perlakuan konsentrasi 5%, 10% dan 20% dengan volume pemberian 1% dari BB. 3.4.8. Penentuan Dosis Pada penelitian ini konsentrasi infusa buah belimbing wuluh yang akan diberikan kepada hewan percobaan sebagai perlakuan pada tikus yaitu dengan membagi menjadi 3 perlakuan konsentrasi yaitu 5%, 10% dan 20%. Volume untuk penyuntikannya digunakan 1% dari berat badan hewan, dihitung berdasarkan rumus Mallon (Thompson, 1985). VAO (mL) = Dosis (mg/KgBB) x Berat Badan (Kg) Konsentrasi Obat (mg/mL) Keterangan : VAO : Volume Administrasi Obat Dosis kontrol positif yaitu menggunakan Furosemid dengan dosis lazim pada manusia yaitu 40 mg/hari Dikonversikan ke Tikus menjadi 40 mg x 0,018 = 0,72 mg/200 mgBB = 3,6 mg/KgBB Setelah itu disuspensikan dengan Na CMC 1% dan disuntikkan secara oral sebanyak 2 ml/200 gBB untuk masing-masing tikus. Sementara untuk kelompok kontrol negatif diberikan Na CMC sebanyak 1% dari berat badan tikus.

28

3.4.9. Pengelompokan Hewan Percobaan Pada penelitian ini hewan percobaan akan dibagi menjadi 5 kelompok yang masing-masing terdiri dari 3 ekor tikus putih jantan. Tikus dipuasakan terlebih dahulu selama 18 jam sebelum penelitian dilakukan, tiap kelompok akan diberikan perlakuan sebagai berikut : 1. Kontrol Negatif : Tikus putih jantan akan diberikan suspensi Na CMC 1% sebagai kontrol negatifnya. 2. Kontrol Positif

: Tikus putih jantan diberikan Furosemid yang telah disuspensikan dengan Na CMC 1%.

3. Perlakuan I

: Tikus putih jantan diberikan infusa buah belimbing wuluh dengan konsentrasi 5%.

4. Perlakuan II

: Tikus putih jantan diberikan infusa buah belimbing wuluh dengan konsentrasi 10%.

5. Perlakuan III

: Tikus putih jantan diberikan infusa buah belimbing wuluh dengan konsentrasi 20%.

3.4.10. Pengujian Efektivitas Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) dengan Metode Taylor dan Toplist Tikus yang akan diberikan perlakuan akan dipuasakan selama 18 jam-24 jam sebelum penelitian dilakukan, hal ini bertujuan agar sistem saluran pencernaannya kosong sehingga tidak mempengaruhi absorpsi obat yang diberikan. Kemudian tikus akan di induksikan air hangat sebanyak 5 ml/200 gBB yang dilakukan 30 menit sebelum pemberian sediaan secara per-oral. Untuk kelompok kontrol positif, tikus diberikan obat yang beredar dipasaran yaitu

29

Furosemid dengan dosis 0,72 mg/200 gBB yang telah disuspensikan dengan Na CMC 1%. Kemudian untuk kelompok perlakuan 1,2,3 diberikan infusa buah belimbing wuluh sebanyak 1% dari BB dengan konsentrasi masing-masing yaitu 5%, 10% dan 20%. 3.4.11. Pengukuran Volume Urin Tikus yang sudah diberikan perlakuan atau yang telah di induksikan air hangat pada menit awal, kemudian diberikan sediaan per-oral dan diukur volume urinnya pada jam ke 1, 2, 3, 4, 5 dan 6. Urin yang tertampung pada wadah penampung urin diambil dan diukur volumenya menggunakan disposible syringe 5 cc dan dicatat volumenya selama waktu pengamatan. 3.5. Analisis Data Untuk analisis data dari penelitian ini dilakukan dengan mengukur volume urin dari masing-masing kelompok dengan metoda analisis varians satu arah (One Way ANOVA) dan dilanjutkan dengan uji Tukey menggunakan software SPSS. Taraf kepercayaan yang digunakan yaitu 95% atau α 0,05.

30

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil Setelah melakukan penelitian mengenai uji efektifitas diuretik infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) terhadap tikus putih (Rattus norvegicus) jantan didapatkan hasil sebagai berikut : 1.

Hasil dari skrining fitokimia menunjukkan bahwa di dalam buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) terdapat kandungan metabolit sekunder yaitu flavonoid, saponin dan alkaloid. (Lampiran 5, tabel 1 )

2.

Hasil rata-rata volume urin dari masing-masing kelompok uji yaitu kelompok kontrol negatif sebesar 0,82 ml, kelompok kontrol positif sebesar 3,28 ml, kelompok uji infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) konsentrasi 5% sebesar 2,09 ml, konsentrasi 10% sebesar 2,83 ml dan konsentrasi 20% sebesar 2,91 ml. (Lampiran 8, tabel 3)

3.

Hasil pengujian infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) menunjukkan pada konsentrasi 5%, 10% dan 20% memiliki peningkatan pengeluaran urin yang signifikan dengan kelompok kontrol negatif (p<0,05) . (Lampiran 9, tabel 4)

4.

Hasil pengujian infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) menunjukkan pada konsentrasi 10% dan 20% dengan kontrol positif tidak berbeda signifikan (p>0,05). (Lampiran 11, tabel 6)

31

4.2.

Pembahasan Penelitian ini dilaksanakan untuk melihat uji efektifitas diuretik infusa

buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) terhadap tikus putih (Rattus norvegicus) jantan. Buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) dijadikan sampel pada penelitian ini yang diperoleh dari Desa Simpang Kubu Kecamatan Kampar Kabupaten Kampar Provinsi Riau karena secara tradisional masyarakat tersebut menggunakan buah ini sebagai salah satu obat yang dapat mengobati udem dan pengobatan tekanan darah tinggi (Hipertensi). Selain hal tersebut, buah ini juga memiliki banyak manfaat dalam pengobatan tradisional yaitu sariawan, bisul, menghilangkan

bengkak

jerawat,

diabetes

mellitus

dan

sakit

perut

(Wijayakusuma, 2006). Pada tahap awal penelitian ini dilakukan identifikasi buah belimbing wuluh yang dilakukan di Laboratorium Botani Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) jurusan Biologi Universitas Riau. Dari hasil identifikasi yang diperoleh, menyatakan buah yang digunakan adalah buah belimbing wuluh dengan nama spesies (Averrhoa belimbi L) yang termasuk marga Averrhoa. Selanjutnya buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) dilakukan skrining fitokimia dengan tujuan untuk mengetahui kandungan senyawa kimia yang terdapat di dalam sampel buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L). Berdasarkan hasil skrining fitokimia yang dilakukan menunjukkan bahwa buah belimbing wuluh mengandung senyawa metabolit sekunder flavonoid, saponin dan alkaloid. Dari hasil pengujian metabolit sekunder yang diperoleh, diduga kandungan flavonoid mampu memberikan khasiat dalam meningkatkan

32

pengeluaran urin. Flavonoid mampu menghambat reabsorpsi Na +, K+ dan Clsehingga terjadi peningkatan elektrolit ditubulus, sehingga menyebabkan terjadinya diuresis atau peningkatan pengeluaran urin (Khabibah, 2011). Selain itu flavonoid juga dapat meningkatkan volume urin dengan cara meningkatkan laju kecepatan glomerulus (Jouad, 2001). Metabolit sekunder yang diperoleh selanjutnya yaitu alkaloid. Alkaloid juga memiliki efek dalam meningkatkan pengeluaran volume urin. Alkaloid bekerja langsung dengan cara meningkatkan pengeluaran atau ekskresi Na+ dan Cl-, dengan meningkatnya elektrolit tersebut maka dapat meningkatkan pengeluaran air sehingga bertambahnya volume urin (Kusumorini & Yuskha, 2011). Kandungan metabolit sekunder yang terdapat di dalam buah belimbing wuluh yaitu saponin. Saponin dapat bekerja meningkatkan ekskresi air dengan menghambat reabsorpsi Na+ dan Cl- pada bagian glomerulus. Sebagai hewan percobaan dalam penelitian ini digunakan tikus putih (Rattus norvegicus) jantan. Pemilihan tikus putih jantan sebagai hewan percobaan karena memiliki kondisi biologis yang lebih stabil yang tidak dapat dipengaruhi oleh adanya hormon estrus (menstruasi) dan kehamilan seperti tikus putih (Rattus norvegicus). Alasan lain dengan memilih tikus putih jantan sebagai hewan percobaan yaitu bobot tikus yang lebih besar sehingga memungkinkan untuk mengeluarkan urin dengan volume yang lebih besar. Berat badan tikus putih jantan yang digunakan yaitu dengan berat 150-200 gram yang berumur sekitar 2-3 bulan sebanyak 15 ekor. Setiap tikus diletakkan dikandang yang berbeda. Alas kandang diberi sekam secara merata, serta setiap hari diberi pakan dan minum. Makanan yang diberikan pada tikus berupa makanan standart yang biasa dikonsumsi oleh tikus,

33

sedangkan air yang dberikan berupa aquades yang diletakkan di dalam botol plastik yang disumbat oleh pipa aluminium yang standart digunakan untuk tikus. Sebelum dilakukan pengujian, tikus terlebih dahulu dilakukan aklimatisasi selama 1 minggu atau 7 hari dengan tujuan agar tikus dapat beradaptasi dengan lingkungan baru sehingga tidak menyebabkan stress pada tikus. Selama dilakukan aklimatisasi, tikus diberi makan dan minum seperti biasanya. Selama proses aklimatisasi juga dilakukan penimbangan berat badan yang rutin dilakukan setiap hari untuk melihat tikus yang sehat. Tikus yang sehat ditandai dengan berat badan selama aklimatisasi tidak mengalami perubahan lebih dari 20% dan secara visual memperlihatkan perilaku yang normal (Anonim, 2014). Setelah tikus diaklimatisasi dan memenuhi persyaratan, tikus dipuasakan selama 18 jam sebelum dilakukan pengujian pada tikus. Tujian dilakukannya hal tersebut adalah agar sistem atau saluran pencernaannya kosong sehingga tidak akan mempengaruhi absorpsi obat. Selanjutnya tikus dikelompokkan menjadi 5 kelompok percobaan untuk diberikan perlakuan, dimana setiap kelompok terdiri dari 3 ekor tikus. Kelompok 1 sebagai kontrol negatif yang diberikan Na CMC 1% dari BB, kelompok 2 sebagai kontrol positif yang diberi suspensi furosemid sebanyak 1% dari BB, kelompok 3, 4 dan 5 sebagai kelompok uji yang diberikan infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) dengan konsentrasi 5%, 10% dan 20% dengan volume penyuntikan 1% dari BB yang diberikan secara per oral. Penelitian ini menggunakan furosemid sebagai kontrol positif. Furosemid merupakan obat golongan diuretik kuat yang memiliki mekanisme kerja dengan menghambat kerja ko-tanspor Na+, K+ dan 2Cl- yang terletak dimembran luminal ansa henle, oleh karena itu reabsorpsi ion Na +, ion K+ dan Cl- menurun, sehingga

34

tidak menyebabkan peningkatan cairan tubuh (Gunawan, 2009). Furosemid bekerja dipusat terapi yang agak singkat (4-6 jam). Obat ini banyak digunakan dalam keadaan yang akut, misalnya pada saat udema otak dan paru-paru. Pembuatan suspensi furosemid dilarutkan dengan Na CMC karena menurut Farmakope Indonesia Edisi III furosemid kelarutannya praktis tidak larut dalam air (Anonim, 1979). Setiap sebelum dilakukannya pengujian, tikus diberikan air hangat 5 ml/200 gram berat badan 30 menit sebelum pemberian sediaan per oral. Tujuan induksi ini dilakukan yaitu untuk menghindari terjadinya dehidrasi dan juga meningkatkan kecepatan urinasi pada tikus. Pengujian dilakukan setiap hari untuk 1 kelompok perlakuan. Pengujian pertama dilakukan pada kelompok kontrol negatif yang diberikan Na CMC 1% dengan volume 1% dari BB tikus yang diberikan secara oral. Pengujian kedua dilakukan pada kelompok kontrol positif yang diberikan suspensi furosemid dengan volume 1% dari BB tikus yang diberikan secara oral. Pengujian berikutnya dilakukan pada kelompok uji dengan menggunakan infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L). Infusa buah belimbing wuluh ini dibuat setiap hari sesuai dengan konsentrasi uji yang dilakukan pada hari tersebut, konsentrasi perlakuan dibuat secara berurutan yaitu 5%, 10% dan 20% (kelompok 3, 4 dan 5). Volume pemberian infusa buah belimbing wulu sebanyak 1% dari berat bedat tikus yang digunakan. Setelah tikus diberikan perlakuan, maka tikus dimasukkan kedalam kandang metabolit yang digunakan untuk menampung urin tikus. Masing-masing tikus menempati kandang metabolit. Kandang metabolit diberi lakban untuk menghubungkan antara kandang dengan wadah penampung urin tikus yang

35

sebelumnya sudah diberikan air sebanyak 10 ml guna untuk memudahkan dalam menghitung volume urin tikus. Selanjutnya akan dilihat urin yang tertampung pada wadah penampung tersebut, volume urin dihitung setiap 1 jam sekali selama 6 jam. Hasil urin setiap kelompok perlakuan didapatkan dan kemudian diratarata. Hasil urin pada kelompok kontrol negatif yaitu sebesar 0,82 ml, kelompok kontrol positif sebesar 3,28 ml, kelompok uji infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) konsentrasi 5% sebesar 2,09 ml, konsentrasi 10% sebesar 2,83 ml dan konsentrasi 20% sebesar 2,91 ml. Dari hasil ini, volume urin yang terendah yaitu kelompok kontrol negatif (Na CMC 1%) dikarenakan kontrol negatif tidak mengandung zat aktif yang dapat meningkatkan volume urin tikus, kelompok ini dijadikan pembanding utama untuk hasil perlakuan yang lainnya. Analisa pada data penelitian ini menggunakan ANOVA satu arah karena hanya melihat rata-rata volume urin perkelompoknya dan melihat ada atau tidaknya perbedaan yang signifikan antara 5 rata-rata volume urin. Pada pengujian ini menggunakan nilai signifikan α=0,05, apabila nilai p>0,05 maka tidak dilanjutkan dengan uji tukey dan apabila nilai p<0,05 maka akan dilanjutkan dengan uji tukey untuk melihat kelompok mana yang berbeda signifikan. Hasil data statistik penelitian menunjukkan bahwa adanya perbedaan signifikan terhadap peningkatan rata-rata volume urin yang ditimbulkan oleh kelompok uji yang diberikan infusa buah belimbing wuluh dengan konsentrasi 5%, 10% dan 20% terhadap kelompok uji kontrol negatif yang diberikan Na CMC 1% .

36

Tabel 1. Hasil Uji Homogenitas Perlakuan

Volume Urin Perlakuan

Kelompok Perlakuan Kontrol Positif ( Suspensi Furosemid )

3.2833 a

Kontrol Negatif (Na CMC 1%)

.8200 b

Konsentrasi 5%

2.0900 c

Konsentrasi 10%

2.8367 a

Konsentrasi 20%

2.9133 a

Keterangan : Abjad yang berbeda menunjukkan adanya perbedaan signifikan (p<0,05) Seterusnya hasil data statistik ANOVA satu arah yang dilanjutkan dengan Post Hoc Tukey juga menunjukkan konsentrasi 10% dan 20% tidak berbeda signifikan dengan kontrol positif terhadap peningkatan volume rata-rata urin tikus putih jantan. Hal ini menunjukkan bahwa konsentrasi 10% dan 20% memiliki efek sebanding dengan kontrol positif yang diberikan furosemid secara oral dengan menunjukkan peningkatan pengeluaran volume urin. Konsentrasi 10%, 20% dan kontrol positif berbeda signifikan dengan konsentrasi 5% dan kontrol negatif. Konsentrasi 5% berbeda signifikan dengan kontrol negatif, yang mana artinya konsentrasi 5% memiliki kemampuan dalam peningkatan pengeluaran volume urin walaupun tidak sekuat konsentrasi 10%, 20% dan kelompok kontrol positif. Hal ini membuktikan bahwa infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) dari dosis 5% sudah memiliki kemampuan sebagai diuretik alami, tetapi untuk

37

konsentrasi yang lebih baik dan efektif yaitu konsentrasi 10% dan 20% yang mana memiliki kemampuan diuretik alami sebanding dengan kontrol positif (Furosemid).

38

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan Dari hasil penelitian yang dilakukan untuk uji efektifitas diuretik infusa buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) terhadap tikus putih (Rattus norvegicus) jantan menunjukkan bahwa infusa buah belimbing wuluh konsentrasi 5%, 10% dan 20% memiliki kemampuan dalam peningkatan volume urin, tetapi untuk konsentrasi 10% dan 20% memiliki kemampuan yang sebanding dengan kelompok kontrol positif sebagai diuretik. 5.2. Saran Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk membuat ekstraksi meserasi dari buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) sebagai diuretik.

39

DAFTAR PUSTAKA Anonim. 1979. Farmakope Indonesia (Edisi III). Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Anonim. 1995. Farmakope Indonesia (Edisi IV). Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Anonim. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat (Cetakan I). Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Anonim. 2001. Farmakologi dan Terapi. Jakarta: Universitas Indonesia. Anonim. 2014. Pedoman Uji Toksisitas Non Klinik Secara In Vivo. Jakarta: Badan Pengawasan Obat dan Makanan. Betram,Katzung ; Susan,Masters ; Anthony, T. 2009. Basic and Clinical Pharmacolocy (11th Edition). New York: McGraw-Hill. Bistani, D. A. 2006. Efek Diuretik Kopi Susu Pada Tikus Putih (Rattus norvegicus) dengan Variasi Jenis Susu. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Skripsi Universitas Sebelas Maret Surakarta, diakses pada tanggal 27 April 2018. Djamal, R. 1998. Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Padang: Universitas Baiturahman. Gunawan, S. 2009. Farmakologi dan Terapi (Edisi 5). Jakarta: Balai Penerbit FKUI. Harborne, J. 1987. Metode Fitokimia. (Kosasih P dan Iwangs S.J, Ed.) (Edisi II). Bandung: Penerbit ITB Bandung. Hariana, A. 2004. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya Seri 1. Jakarta: Penerbit Penebar Swadaya. Hariana, A. 2013. 262 Tumbuhan Obat dan Khasiatnya. Jakarta: Penerbit Penebar Swadaya. Heyne, K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia, Jilid I dan II. (T. B. L. Kehutanan, Ed.). Jakarta Pusat: Koperasi Karyawan Departemen Kehutanan. Jouad,H., Lacaille-Dubois, M, A, Lyoussi, B. and Edduks, M. 2001. Effect of The Flavonoids Extract from Spregularia purpurea Pers On Arterial Blood

40

Pressure and Renal Fuction in Normal and Hypertensive Rats. Jurnal of Ethnopharmacology, Volume 76, pp.156-163. Katzung, G. 2002. Farmakologi Dasar dan Klinik (Terjemahan). Jakarta: Salemba Medika. Khabibah, N. 2011. Uji Efektifitas Diuretik Ekstrak Buncis (Phaseolus vulgaris L) Pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar. Skripsi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Ngudi Waluyo Ungaran, diakses tanggal 28 Juni 2018. Kusumawati, D. 2004. Bersahabat dengan Hewan Coba. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Kusumorini, N., & Yuskha, F. 2011. Potensi Ekstrak Etanol Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L) sebagai Alternatif Sediaan Diuretik Alami ( The Potency of Ethanolic Extract of Bilimbi (Averrhoa bilimbi L) Fruits as a Natural Diuretic ), 9(2), 78–84. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia, Volume 9 Nomor 2. Latief, A. 2012. Obat-obat Tradisional. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Lim, H. 2009. Farmakologi Kardiovaskuler. Jakarta: Sofmedia. Lourense, D. dan B. 2008. Evaluation of Drug Activities Pharmacometrics. New York: Graceway Publishing Company. Mukhrian. 2014. Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif. Jurnal Kesehatan, vol. VII N, 361–367, diakses pada tanggal 17 April 2018. Nugroho, A. 2010. Tanaman Obat Indonesia. Bogor: Puslitbang. Pearce, E. . 2009. Anatomi dan Fisiologi untuk Paramedis. Jakarta: Gramedia. Permadi. 2006. Tanaman Obat Pelancar Air Seni. Depok: Penerbit Swadaya. Poniman. 2011. Potensi Kerja Ekstrak Etanol Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa Belimbi L) sebagai Diuretik Alami melalui Pendekatan Aktivitas Diuretik , Ph , Kadar Natrium , Dan Kalium. Skripsi Institut Pertanian Bogor, diakses pada tanggal 19 April 2018. Salwa, A. 2013. Evaluasi Penggunaan Obat Antihipertensi pada Pasien Hipertensi dengan Gagal Ginjal di Instalasi Rawat Inap Rs “X” Tahun 2010. Fakultas Farmasi, Skripsi Universitas Muhammadiyah Surakarta, diakses pada tanggal 27 April 2018.

41

Schmitz,Gery; Lepper,Hans; Heidrich, M. 2003. Farmakologi dan Toksikologi. (A. Sigit,Joseph; Hanif, Ed.) (Edisi 3). Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Soedibyo, B. R. . 1998. Alam Sumber Kesehatan Manfaat dan Kegunaan. Jakarta: Balai Pustaka. Sudarsono, P, N, Gunawan D, Wahyuono S, Donatus I, A, P. 2002. Tumbuhan Obat II : Hasil Penelitian, Sifat-sifat dan Penggunaan. Yogyakarta: Pusat Studi Obat Tradisional UGM. Suryowinoto, M. 1997. Flora Eksotika Tanaman Hias Berbunga. Jakarta: Kanisius. Thompson, E. 1985. Drugs Bioscreening Fundamental of Drugs Evaluation Technique in Pharmacology. New York: Graceway Publishing Company. Vogel, H. 2006. Drug Discovery and Evaluation Pharmacological Assay, (second edition). New York: Springer Verlag Berlin Heidelberg. Wijayakusuma. 2006. Ramuan Lengkap Herbal Taklukkan Penyakit. Jakarta: Pustaka Bunda.

42

Lampiran 1. Tumbuhan Belimbing Wuluh

Gambar 2. Tumbuhan Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)

Lampiran 2. Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)

Gambar 3. Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)

43

Lampiran 3. Surat Identifikasi Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)

Gambar 4. Surat Identifikasi

44

Lampiran 4. Panci Infusa

Gambar 5. Panci Infusa

45

Lampiran 5. Hasil Skrining Fitokimia Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia

NO

Metabolit Sekunder

Senyawa

Buah Belimbing Wuluh

1

Flavonoid

+

2

Alkaloid

+

3

Fenolik

_

4

Saponin

+

5

Terpenoid

_

6

Steroid

_

46

Lampiran 6. Perhitungan Dosis Suspensi Furosemid Perhitungan Dosis Suspensi Furosemid a. Dosis Furosemid untuk manusia

= 40 mg/hari = 40 mg/70 KgBB

b. Dosis Furosemid untuk Tikus

= 40 mg/70 KgBB x 0,018 = 0,72 mg/200 gBB = 3,6 mg/ kgBB

Volume pemberian obat dengan berat badan tikus 200 gram dengan menggunakan rumus :

VAO (mL) = Dosis (mg/KgBB) x Berat Badan (Kg) Konsentrasi Obat (m g/mL) 2 ml

= 3,6 mg/KgBB x 0,2 KgBB Konsentrasi Obat (mg/mL)

Konsentrasi Obat (mg/mL)

= 0,72 mg 2 ml = 0,36 mg/ml

Untuk sediaan 10 ml

= 3,6 mg/10 ml

47

Lampiran 7. Tabel Faktor Konversi Dosis Hewan Percobaan

Tabel 3. Tabel Konversi Dosis hewan percobaan dengan Manusia (Lourense, 2008) Dicari

Mencit

Tikus

Marmut

Kelinci

Kucing

Kera

Anjing

Manusia

Diketahui Mencit

20 g

200 g

400 g

1,5 kg

1,5 kg

4 kg

12 kg

70 kg

1,0

7,0

12,23

27,80

29,7

64,10

124,20

387,9

0,14

1,0

1,74

3,9

4,20

9,20

17,80

56,0

0,08

0,57

1,0

2,25

2,40

5,20

10,20

31,50

0,04

0,25

0,44

1,0

1,08

2,40

4,50

14,20

0,03

0,23

0,41

0,91

1,0

2,20

4,10

13,0

0,016

0,11

0,19

0,42

0,43

0,1

1,9

6,1

0,008

0,06

0,10

0,22

1,24

0,52

1,0

3,10

0,0026

0,018

0,31

0,07

0,076

0,16

0,32

1,0

20 g Tikus 200 g Marmut 400 g Kelinci 1,5 kg Kucing 1,5 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg

48

Lampiran 8. Hasil Volume Urin Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan pada Pemberian Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) Tabel 4. Hasil Volume Urin Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan pada Pemberian Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) Kelompok Kontrol Negatif Kontrol Positif Konsentrasi 5% Konsentrasi 10% Konsentrasi 20%

Hewan 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3

Volume Urin (ml) pada jam ke1 2 1.8 1.8 3 3.1 3 2.4 2.8 2.5 2.6 3 2.8 2.6 3 3

2 1.6 1.8 1.2 3.3 3.2 3.1 2.6 3 2.7 2.9 3.2 3 2.8 3.1 3

3 ─ 1.1 1.1 3.6 3.5 3.5 2.3 2.7 2 2.9 3.3 3.3 3 3.2 3.4

4 1.4 ─ ─ 3.8 3.7 3.8 1.9 2 2 3 3.4 3.3 2.8 3.3 3.6

49

5 1 ─ ─ 3.2 3.1 3.5 1.5 1.7 1.8 2.7 2.8 2.9 2 3 3.4

6 ─ ─ ─ 2.8 3 3 1.2 1.1 1.5 2 2 2 2 2.4 2.9

Ratarata/ Hewan 1 0.78 0.68 3.28 3.27 3.32 1.98 2.22 2.08 2.68 2.95 2.88 2.53 3.00 3.22

Rata-rata/ Kelompok 0.82

3.29

2.09

2.84

2.92

Lampiran 9. Hasil Deskriptif Statistik Terhadap Peningkatan Rata-rata Volume Urin Tikus Putih Jantan Secara Analisis Varian Satu Arah Menggunakan Program SPSS Tabel 5. Hasil Deskriptif Statistik Terhadap Peningkatan Rata-rata Volume Urin Tikus Putih Jantan Secara Analisis Varian Satu Arah Menggunakan Program SPSS Kelompok

N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Kontrol Negatif

3

.8200

.16371

.09452

.68

1

Kontrol Positif

3

3.2833

.02517

.01453

3.26

3.31

Konsentrasi 5%

3

2.09

.11533

.06658

1.98

2.21

Konsentrasi 10%

3

2.8367

.14012

.0809

2.68

2.95

Konsentrasi 20%

3

2.9133

.34819

.20103

2.53

3.21

Total

15

2.3887

.91971

.23747

.68

3.31

50

Minimum Maximum

Lampiran 10. Hasil Uji Lanjut Tukey Terhadap Peningkatan Rata-rata Volume Urin Tikus Putih Jantan Secara Analisis Varian Satu Arah Menggunakan Program SPSS Tabel 6.

Hasil Uji Lanjut Tukey Terhadap Peningkatan Rata-rata Volume Urin Tikus Putih Jantan Secara Analisis Varian Satu Arah Menggunakan Program SPSS

(I) Perlakuan

(J) Perlakuan

Mean Difference (I-J)

Std. Error

Sig.

Lower Bound

-2.46333*

.15561

.000

-2.9754

-1.27000

*

.15561

.000

-1.7821

Konsentrasi 10%

-2.01667

*

.15561

.000

-2.5288

Konsentrasi 20%

-2.09333*

.15561

.000

-2.6054

Kontrol Negatif

2.46333*

.15561

.000

1.9512

Konsentrasi 5% Konsentrasi 10% Konsentrasi 20% Kontrol Negatif

*

1.19333 .44667 .37000 1.27000*

.15561 .15561 .15561 .15561

.000 .096 .199 .000

.6812 -.0654 -.1421 .7579

Kontrol Positif

-1.19333*

Kontrol Positif Kontrol Negatif

Kontrol Positif

Konsentrasi 5%

Konsentrasi 10%

Konsentrasi 20%

95% Confidence Interval

Konsentrasi 5%

.15561

.000

-1.7054

Konsentrasi 10%

-.74667

*

.15561

.005

-1.2588

Konsentrasi 20%

-.82333*

.15561

.003

-1.3354

Kontrol Negatif Kontrol Positif Konsentrasi 5% Konsentrasi 20% Kontrol Negatif Kontrol Positif Konsentrasi 5% Konsentrasi 10%

2.01667* -.44667 .74667* -.07667 2.09333* -.37000 .82333* .07667

.15561 .15561 .15561 .15561 .15561 .15561 .15561 .15561

.000 .096 .005 .986 .000 .199 .003 .986

1.5046 -.9588 .2346 -.5888 1.5812 -.8821 .3112 -.4354

Lampiran 11. Hasil Uji Homogenitas Terhadap Perlakuan

51

Tabel 7. Hasil Uji Homogenitas Terhadap Perlakuan Subset 2

Perlakuan

N

Kontrol Negatif

3

Konsentrasi 5%

3

Konsentrasi 10%

3

2.8367

Konsentrasi 20%

3

2.9133

Kontrol Positif Sig.

3

3.2833 .09600

1 .8200

3

2.0900

1

1

52

Lampiran 12. Skema Kerja Pembuatan Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)

Buah belimbing wuluh (Averrhoa belimbi L) segar sebanyak 10 gram

-

-

Ampas

Disortasi basah kemudian dicuci bersih dengan air mengalir Timbang buah belimbing wuluh Buah belimbing wuluh segar dirajang Dimasukkan ke dalam panci infusa Ditambah dengan 100 ml aquades Panci dipanaskan dipenangas air selama 15 menit terhitung pada suhu 90ºC diaduk-aduk sesekali Disaring dengan kain flanel selagi panas

Infusa

Gambar 6. Skema Kerja Pembuatan Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L)

53

Lampiran 13. Skema Uji Efektivitas Diuretik Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) Terhadap Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan. Tikus dipuasakan selama 18 jam sebelum diberi perlakuan Tikus diinduksi air hangat sebanyak 5 ml/200gBB 30 menit sebelum perlakuan Tikus diberikan sediaan per oral

Kelompok kontrol (+) Furosemid 0,72mg/kgBB

Kelompok kontrol (-) Na CMC 1%

Kelompok (I) Infusa buah belimbing wuluh 5%

Kelompok (II) Infusa buah belimbing wuluh 10%

Kelompok (III) Infusa buah belimbing wuluh 20%

Masing-masing volume untuk penyuntikan sebanyak 1% BB

Volume urin tikus diukur pada jam ke 1, 2, 3, 4, 5 dan 6

Analisis Data menggunakan One Way ANOVA

Gambar 7. Skema Uji Efektivitas Diuretik Infusa Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa belimbi L) Terhadap Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan.

Ampas

54

Infusa