Recuento De Salmonella Spp. Y Listeria Monocytogenes N

PRACTICA Nº 6 RECUENTO DE SALMONELLA SPP. Y LISTERIA MONOCYTOGENES. BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO CONTROL Y SEGURIDAD ALIMENTARIA Angarita Bautista Leidy Yudith Código: 02171043, Parada Cárdenas Geisel Yelene Código: 04172026. RESUMEN La carne, productos cárnicos, leche, huevos son susceptibles al ataque de microorganismos como la salmonella; del mismo modo la leche cruda pasteurizada, carnes crudas, pollo por otro microorganismo como es la listeria monocytogenes. Esta práctica tuvo por objeto indagar en la contaminación dada por estos microorganismos sobre carne cruda y avena. Estas toxiinfecciones son muy comunes si no se tienen en cuenta las BPM. El análisis de salmonella sobre carne cruda se hizo de la siguiente manera: 1. PRE-enriquecimiento en medio liquido no selectivo, 2. Enriquecimiento liquido no selectivo (caldo selenito), 3. Aislamiento diferencial sobre medio sólido selectivo (agar salmonella shiguella, siembra por agotamiento), de donde se hará la confirmación de salmonella por medio de la bioquímica. El recuento de listeria monocytogenes se llevo a cabo en avena; en donde el método utilizado fue en primer lugar un PRE-enriquecimiento en medio liquido no selectivo, siembra en medio sólido diferencial (agar palcam) a partir del anterior, del cual se obtuvieron dos clases de colonias a las que se les realizo gran y una de la morfología de las colonas fue cocobacilos gram positivos que posteriormente se le realizo catalasa dando un resultado positivo. Teniendo estas características y para confirmar la presencia de listeria se realizó bioquímica a este tipo de colonia y los resultados fueron determinantes para decir que no se trataba de listeria monocytogenes. ABSTRACT

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The meat, meat products, milk, eggs are susceptible to the attack of microorganisms like the salmonella; in the same way the pasteurized raw milk, raw meats, chicken for another microorganism like it is the listeria monocytogenes. This practice had for object to investigate in the contamination given by these microorganisms it has more than enough raw meat and it trenches. These toxiinfecciones is very common if they are not kept in mind the BPM. The salmonella analysis has more than enough raw meat it was made in the following way: 1. Pre-enrichment between I not liquidate selective, 2. Enrichment not liquidates selective (broth selenito), 3. differential Isolation on half accustomed to selective (agar salmonella shiguella, siembra for exhaustion), of where the salmonella confirmation will be made by means of the biochemistry. The recount of listeria monocytogenes you carries out in oat; where the used method was a pre-enrichment in the first place between I not liquidate selective, siembra between having been accustomed to differential (agar palcam) starting from the previous one, of which two classes of colonies were obtained those that are carried out great and one of the morphology of the colonas was cocobacilos positive gram that later on is carried out catalasa giving a positive result. Having these characteristics and to confirm the listeria presence you biochemical relized to this colony type and the results were decisive to say that it was not listeria monocytogenes. Palabras Claves Gram: Procedimiento de coloración de las bacterias. Las bacterias se dividen, según se tiñen con esta solución, en grampositivas y gram-negativas. Toxiinfección: es una enfermedad originada en el hombre al ingerir alimentos que contienen microorganismos viables o las toxinas que se producen cuando éstos se multiplican en los alimentos. Catalasa: es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la descomposición del peróxido de hidrógeno (H202) en oxígeno y agua. Colonia: Una colonia de bacterias se define como toda la

descendencia que proviene de una sola bacteria (UFC: Unidad Formadora de Colonia), se caracteriza por estar formada de un solo tipo de bacteria Bacteria:

son organismos unicelulares y pueden ser benéficas o patógenas. La mayoría de las bacterias pueden vivir y replicarse fuera de un ambiente celular (extracelulares), mientras otras requieren de otras células para poder replicarse (intracelulares).

INTRODUCCION Las toxiinfecciones alimentarías provocadas por los microorganismos patógenos del genero salmonella y listeria tiene gran importancia por el gran número de personas infectadas y por la industrialización de 1

alimentos que favorecen la diseminación de estos agentes. Debemos tener en cuenta que la listeriosis humana afecta principalmente a personas de la tercera edad, mujeres embarazadas y niños recién nacidos y personas que tienen comprometido su sistema inmunitario. La bacteria causa con mucha frecuencia una infección sanguínea generalizada (septicemia) o una inflamación de las membranas que cubren el cerebro (meningitis). Salmonella sp. es un género de la familia Enterobacteriaceae. Su amplia distribución en el ambiente se debe a la existencia de numerosos reservorios a

partir de los cuales se pueden contaminar los alimentos y el agua. Este microorganismo es el agente causal de varias enfermedades infecciosas entre las que se encuentran las fiebres entéricas, gastroenteritis, toxiinfecciones alimentarias y la fiebre tifoidea. MATERIALES 1 Pipetas estériles 1ml y 10 ml 1 Asa redonda 1 Tubo con caldo Selenito de 10ml 2 agua Peptona por 225ml c/d Agar Salmonella- Shigella Agar sangre 1 sacarosa 1

METODO * Tipo de muestra: 200 gr. Carne Cruda Fecha de recolección: 15/09/08 Hora: 2:00 p. m Temperatura conservación: 4º C En parte baja del botellero * Tipo de muestra: Avena casera Fecha de preparación: 15/09/08 Hora: 2:00 p. m. Temperatura conservación: 8º C En el botellero Sabor: dulce

Procedimiento spp.

Salmonella

1. Fase PRE- enriquecimiento en ½ líquido no selectivo Pesar 25 gr. De la carne cruda asépticamente Adicionar y Homogenizar

25 gr. de carne cruda 255 ml Agua peptona

1

Gram Negativos bioquímica

realizar

Dilución 10-1

Incubar a 37ºC por 18-24 horas 2. Fase Enriquecimiento no selectivo

Procedimiento Listeria monocytogenes:

Adicionar 1ml

1. Fase PRE- enriquecimiento en ½ líquido no selectivo

Dilución 10-1 caldo Selenito Cist

Tomar 25 ml. De la avena en leche casera, Adicionar agua peptona y Homogenizar

eína Diluc ión 10-2 Incubar a 42ºC en Baño María, por 18 horas 3. Fase Aislamiento diferencial en ½ selectivos

25 ml. de avena en leche casera 255 ml Agua peptona Dilución 10-1

Incubar a 37ºC por 18-24 horas en la incubadora

Sembrar por Aislamiento Dilución 10-2 S-S Caldo Selenito Cisteína salmonella-shigella

Agar

2 Fase siembra en medios diferenciales:

Incubar a 37ºC, por 24 horas a 48 horas Observar la presencia de colonias negras con un alo rosado, realizar Gram a las colonias típicas, Si hay bacilos

Dilución 10-1 Sembrar por Agar Sangre Aislamiento Incubar a 37ºC, por 24 horas 1

3. Fase Identificación

Glucosa Sacarosa VP-RM Movilidad

TSI

Realizar coloración de Gram. a las colonias típicas BIBLIOGRAFÍA Oxidasa a las colonias típicas

Catalasa a las colonias típicas

A partir de las colonias del Gram. Que sean bacilos cortos gram positivos, catalasa positiva oxidasa negativa Se les realiza identificación:

Agar Sangre

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