Pemeriksaan Histopatologi Ppt.ppt

Dr. Lina Damayanti, SpPA

Ilmu Patologi Anatomi Ilmu yang menghubungkan antara ilmu dasar dengan ilmu klinis  Ilmu yang mempelajari dan mendiagnosa penyakit  Melihat sesuatu kelainan dari sel 

PATOLOGI KLINIK Patologi Klinik, mendiagnosa penyakit berdasarkan analisa laboratorium dari cairan tubuh meggunakan perangkat kima, mikrobiologi, hematologi dan patologi molukuler

PATOLOGI Patologi adalah ilmu yang mempelajari dan mendiagnosa suatu penyakit.

Patologi Anatomi, mendiagnosa penyakit dengan pemeriksaan kasar, secara mikroskopik menggunakan bahan kimia, immunologi dan molekul untuk memeriksa organ tubuh, jaringan dan seluruh tubuh

PATOLOGI ANATOMI

JENIS PEMERIKSAAN PA 

Histopatologi



Sitopatologi



Histokimia ( pewarnaan khusus )



Frozen Section



Imunohistokimia ( ER, PR, Her2 dll )



Imunofluresensi ( FISH/CISH)



Molecular pathology

TAHAPAN MICROTECHNIQUE    

  

 

Sample preparation Fixation Gross sectioning Tissue processing Embedding Sectioning Staining Mounting Observation

TAHAP PREANALITIK

SAMPLE PREPARATION 

Labelling



Nama pasien



No identitas pasien



Lokasi



Keterangan klinis



Pemeriksaan PA lama

Fiksasi 1.

Mencegah proses perubahan postmortem akibat pembusukan atau perubahan otolisis.

2.

Memelihara unsur-unsur dalam sel.

3.

Melindungi dengan mengeraskan unsur jaringan lunak.

4.

Mengganti unsur cairan yang dikandung oleh sel/jaringan dengan unsur semi solid.

5.

Menambah bahan kimia sehingga unsur pembangun jaringan

dapat divisualisasi.

MACAM-MACAM FIKSASI 

Physical fixation Heating Microwave



Chemical fixation Coagulant fixative Dehydrant coagulant fixative

Formaldehyde Glutaradehyde



Setiap jenis fiksasi mempunyai keuntungan dan kerugian



Kerugian yang muncul : hilangnya unsur molekular, jaringan yang membengkak, mengkerut, hilangnya sensitifitas jaringan

terhadap pemeriksaan histokimia dan immunohistokimia

FAKTOR YANG BERPENGARUH DALAM TAHAPAN FIKSASI 

Buffer dan pH ( 7,2 - 7,4)



Durasi fiksasi ( 1mm per jam )



Ukuran spesimen ( 1 : 10/5)



Temperatur fiksasi



Konsentrasi zat fiksasi ( 10 % )



Osmolaritas fiksasi

NBF 10 % solution 

Tap water

900 ml



Formaldehyde 37 %

100 ml



Sodium phosphate, monobasic,monohidrate



4 gr

Sodium phosphate

diphasic, anhydrous

6,5 gr

PENGGUNAAN NBF 10 % UNTUK PEMERIKSAAN IHK 

Penelitian : penggunaan formalin 10 % menyebabkan hilangnya antigen dalam jaringan setelah berinteraksi dengan paraffin  Neutral formalin buffer 10 %



Waktu tunggu fiksasi sangat berpengaruh

juga ( batas waktu jaringan dapat bertahan di ruangan adalah ½ sampai satu jam )

Fiksasi Jaringan Tulang DEKALSIFIKASI 

Adalah proses untuk menghilangkan kalsium yang dikandung jaringan sehingga dapat dengan mudah dipotong.Biasanya digunakan untuk jaringan tulang.

Tissue Processing

SAMPLE BERUPA CAIRAN Dibuat sedian hapus di slide , dibagi menjadi dua 1. Dikeringkan di udara bebas.

2. Difiksasi alkohol 95 %. Jika jarak waktunya dekat cukup dikeringkan biasa dan segera dikirim, namun jika jauh fiksasi cairan dengan alkohol 50% perbandingan 1:1

TAHAP ANALITIK

FORMALIN 

Formaldehyde adalah gas yang tidak berwarna, namun biasanya tersedia dalam larutan dengan air disebut larutan formalin

dengan konsentrasi maksimal 40 % 

Batas konsentrasi dalam udara maksimal adalah 0,75 ppm selama 8 jam kerja



Efek yang ditimbulkan adalah : Iritasi kulit, reaksi alergi, muntah, diare.

SAFETY AND ENVIROMENTAL PRECAUTION 

Exposure Monitoring Exposure monitoring may be required to ensure that employees are not over-exposed.



Ventilation Formaldehyde should always be used with

adequate ventilation, preferably in a fume hood, to minimize inhalation of vapor formaldehyde



Eye Protection

Always use chemical goggles or a face shield when handling formaldehyde to minimize the risk of even a small splash or vapor exposure to the corneas 

Body Protection

Wear a laboratory coat and never wear shorts or open-toed shoes when handling formaldehyde.