Oleh : Adisti Dilarina
P ercobaan 2 Penetapan Kadar Vitamin C dalam Jus Buah Dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis.
1.
Mahasiswa dapat menetapkan kadar Vitamin C dalam Jus Buah
2.
Mahasiswa dapat memahami prinsip penetapan kadar Vitamin C dalam Jus Buah dengan metode
Spektrofotometri UV-Visible
Acidum Ascorbicum / Vitamin C Hablur atau serbuk putih atau agak kuning. Oleh pengaruh
cahaya lambat laun menjadi berwarna gelap. Dalam keadaan kering stabil di udara, dalam larutan cepat teroksidasi. Melebur pada suhu 190º. (FI Ed.IV)
Struktur Kimia : C6H8O6
Kenapa menggunakan Spektrofotometri???
Metode analisis dalam penetapan kadar asam askorbat dengan spektrofotometri UV-Vis merupakan metode yang baik digunakan, relative murah dan mudah yang dapat menghasilkan ketelitian dan ketepatan yang tinggi (Wardani, 2012)
ALAT DAN BAHAN PERCOBAAN • • • • • • •
Spektrofotometer Timbangan analitik Kertas saring Corong Botol semprot Mikropipet Peralatan gelas
• Acidum Ascorbicum (Vitamin C) • Aquabidest • Sampel minuman jus buah yang tertera kadar vitamin C nya
Bahan Alat
SKEMA KERJA
Pemilihan panjang gelombang maksimal
Pembuatan kurva baku Pengukuran serapan sampel Perhitungan kadar Vitamin C dalam sampel
PENENTUAN LAMBDA MAX Timbang 25 mg dengan seksama, masukkan labu takar 250 ml, tambah aqua bidestilata sampai tanda (kadar 100 ppm) Membuat kurva kalibrasi Vitamin C konsentrasi 2, 4, 6, 8 ppm (v/v)
Serapan dibaca pada panjang gelombang antara 200-400 nm
Panjang gelombang diambil dengan serapan yang tinggi dan stabil
PEMBUATAN KURVA BAKU
Buat seri larutan baku dengan kadar 2 ppm 4 ppm 6 ppm 8 ppm Masukkan dalam labu takar 10 ml Baca serapan pada panjang gelombang maksimum Buatlah kurva baku hubungan antara kadar larutan baku vitamin C (X) dengan absorbansinya (Y)
PERHITUNGAN PEMBUATAN SERI KONSENTRASI • Contoh perhitugan kadar 2 ppm • V1
x N1
= V2 x N2
10 ml x 2 ppm = V2 x 100 ppm V2 = 10 ml x 2 ppm 100 ppm V2 = 20 ml 100 = 0,2 ml = 200 mcl
ad 10 ml
TABEL KURVA BAKU Konsentrasi (ppm)
Absorbansi
2 ppm
Volume Aquabidest (ml) ..........
4 ppm
..........
..........
6 ppm
..........
..........
8 ppm
..........
..........
..........
Carilah nilai A, B, dan r dengan regresi linier...................
PENGUKURAN SERAPAN SAMPEL Preparasi sampel, kemudian disaring, ambil 1 ml, encerkan dalam labu takar 100 ml, dihomogenkan Ukur absorbansi pada panjang gelombang maksimal yang diperoleh Masukkan data absorbansi ke dalam persamaan kurva baku Hitung kadar vitamin C menggunakan persamaan regresi linier dari kurva baku
Lakukan Replikasi 3x
TUGAS !! 1.
Sebutkan fungsi dari vitamin C di dalam tubuh manusia!
2.
Hitunglah berapa ppm larutan stock vitamin C, jika diketahui serbu vit.c 50 mg dilarutkan dalam 250 ml aquades!