Minyak Esensial Dari Ranting Dan Akar.docx

Minyak esensial dari ranting dan akar Goniothalamus macrophyllus diperoleh dengan destilasi air dan mengalami Gas Chromatography (GC-FID) dan Gas Chromatography / Mass Spektrometri (GC-MS) menggunakan CBP-5 kolom kapiler untuk menentukan komposisi kimianya. Kedua ranting dan akar minyak dan empat senyawa standar acuan (α-pinene, linalool, geraniol dan geranyl asetat) dievaluasi untuk sifat antimikroba melawan gram positif dan gram negatif bakteri, ragi dan jamur dermatofita menggunakan metode kaldu mikrodilusi. Analisis GCMS mengungkapkan dua puluh satu dan empat belas senyawa dari ranting dan akar minyak yang mewakili 90,0 dan 42,5% dari Jumlah minyak, masing-masing. Minyak ditemukan memiliki komponen utama sebagai berikut: ranting: geranyl asetat (45,5%), geraniol (17,0%), linalool (12,7%) dan camphene (7,5%); root: cyperene (9,8%), geranyl asetat (9,4%), geraniol (3,4%) dan linalool (2,6%). Komponen lainnya hadir dalam jumlah yang cukup di baik minyak esensial yang α-pinene (0,8%) dan benzaldehida (0,5%). Minyak akar dipamerkan paling aktivitas penghambatan terkenal (0,3 mg / ml) terhadap Vancomycin menengah-resistance Staphylococcus aureus (VISA 24), Staphylococcus epidermidis dan Candida albicans. αpinene sementara menghambat bakteri dan pertumbuhan jamur di 0,3 dan 2,5 mg / ml. Berkaitan dengan potensi antimikroba, α-pinene superceeds linalool, geraniol dan geranyl asetat, masing-masing.

PENGANTAR Genus Goniothalamus (Annonaceae) terdiri beberapa 115 spesies pohon aromatik dan semak-semak dan sebagian besar didistribusikan di Asia dan Australia (Leboeuf et al., 1982). Menurut Burkill (1966), banyak tanaman dari genus ini telah banyak digunakan sebagai sumber serat dan kayu di skala lokal. Studi etnobotani dari Goniothalamus tanaman telah didokumentasikan dengan baik. Yang paling umum

penggunaan obat Goniothalamus sp. berkaitan dengan aborsi dan perawatan pasca-natal. Perry (1980) melaporkan bahwa beberapa spesies dari genus ini telah digunakan oleh orang suku dari berbagai negara dalam mengobati demam, kudis dan rheumatisms. Penyelidikan kimia beberapa spesies Goniothalamus telah menyebabkan isolasi dari berbagai senyawa termasuk acetogenins, aporphine alkaloid dan turunannya notablystyryl-lakton (Blazquez et al., 1999; Zhang et al., 1999; Cao et al., 1998; Alali et al., 1999) yang telah ditemukan memiliki kuat antimikroba, larvasida dan kegiatan anti malaria (Ee et al., 1998; Khan et al., 1999; Wirasathien et al., 1997). Goniothalamus macrophyllus adalah semak atau pohon kecil yang bisa tumbuh hingga 8 m. Hal ini secara lokal dikenal sebagai "Gajah beranak", "Penawar hitam" atau "monsoi" (Wiart, 2000). Di Malaysia, decoctions dari G. macrophyllus akar digunakan untuk pengobatan pilek, demam dan malaria sedangkan daun eksternal diterapkan pada pembengkakan (Burkill dan Haniff, 1930). Daun terbakar G. macrophyllus juga telah dicatat untuk menjadi harum dan adalah nyamuk yang efektif. Goniothalamin dan goniothalamin oksida, dua senyawa yang diisolasi dari bagian udara dari G. macrophyllus telah ditemukan memiliki sifat embriotoksik (Sam et al., 1987). Ini adalah kimia sistematis pertama dan studi antimikroba pada ranting dan akar minyak G. macrophyllus. BAHAN DAN METODE Bahan tanaman dan ekstraksi Ranting dan akar G. macrophyllus (FRI 54.727) dikumpulkan di November 2007 dari Pasoh Forest Reserve, Negeri Sembilan, Malaysia. Spesimen voucher diidentifikasi oleh Bapak Kamarudin Salleh dari Forest Research Institute Malaysia (FRIM), Malaysia. Semua bahan tanaman yang kering udara selama dua hari dan cut menjadi potongan-potongan kecil dan mengalami penyulingan air menggunakan Clevenger-jenis peralatan untuk 6 jam untuk mendapatkan minyak esensial. Itu Minyak dipisahkan dari lapisan air dengan pengeringan lebih dengan natrium sulfat anhidrat. Hasil panen minyak dihitung berdasarkan pada berat kering dari bahan tanaman dan kemudian disimpan pada suhu 4 ° C sebelum untuk lebih evaluasi.

Analisis minyak esensial Konstituen kimia dari ranting dan akar minyak dianalisis dengan GC dan GCMS. Analisis GC dilakukan pada Shimadzu GC-2010 kromatografi gas yang dilengkapi dengan ionisasi nyala detektor (FID) dan CBP-5 (25 mx 0,25 mm; 0,25 m ketebalan film) kolom kapiler. Suhu oven diprogram dari 60 ° C (10 menit) untuk 230 ° C pada tingkat 3 ° C / menit. Injector dan detektor Suhu didirikan pada 220 dan 280 ° C, masing-masing. Helium adalah gas pembawa dan volume minyak disuntikkan adalah 1,0 ml. Itu daerah puncak dan waktu retensi diukur dengan elektronik integrasi. Analisis GCMS dilakukan pada Agilent GCMS 7890A / 5975C Series MSD (70 eV inlet langsung) dilengkapi dengan HP 5ms menyatu kolom kapiler silika (30 mx 0,25 mm; 0,25 m Film ketebalan). Kolom dan injektor suhu yang sama dengan mereka untuk GC. Kisaran massa adalah 50-550 dalam mode full scan dengan laju 2,91 scan / s dan total waktu scan adalah 67,7 menit. Identifikasi komponen th e dihasilkan komponen minyak atsiri diidentifikasi dengan perbandingan indeks retensi mereka dengan nilai-nilai sastra (Adams, 2001; Jennings dan Shibamoto, 1980) dan juga dikonfirmasi oleh perbandingan data spektral massa mereka dengan orang-orang dari Wiley, HPCH 2205.L dan NIST05a.L basis data spektral massa. Bila mungkin, yang Data dikonfirmasi oleh co-kromatografi dengan sampel otentik atau dengan data yang diterbitkan. Retensi indeks (RI) dari komponen ditentukan relatif terhadap waktu retensi dari serangkaian n alkana (C 8 -C 30 ). relatif proporsi kimia senyawa dinyatakan sebagai persentase diperoleh peak-daerah normalisasi, semua faktor respon relatif yang diambil sebagai salah satu. Strain mikroba yang digunakan dalam penelitian ini Sebelas isolat yang digunakan dalam penelitian ini mewakili Gram bakteri positif Staphylococcus aureus ATCC 25923 (MSSA), S.

aureus ATCC 33591 (MRSA), S. aureus ATCC 70069 (VISA) dan Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Vancomycin menengahtahan S. aureus (VISA24) dan Vancomycin tahan S. aureus (VRSA15), bakteri gram negatif (Escherichia coli ATCC 10.536 dan Pseudomonas aeruginosa ATCC 25668), Candida albicans ATCC 10231 dan dermatofit (Tricophyton rubrum ATCC 28188 dan Microsporum cannis ATCC 36299). S. epidermidis, bakteri gram negatif, ragi dan dermatofita strain yang dibeli dari Koleksi Budaya Tipe Amerika (ATCC). VISA24 dan VRSA15 yang mutan bagian lab berasal dari MRSA isolat klinis. evaluasi penghambatan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) dari G. macrophyllus ranting dan minyak akar serta empat senyawa standar yang ditentukan dengan metode mikrodilusi ganda kaldu, seperti yang dijelaskan sebelumnya (Saiful et al., 2006). Kedua Tryptic Soy broth (TSB) dan Sobouraud kaldu Dextrose (SDB) Media yang digunakan untuk bakteri dan jamur, masing-masing. Secara singkat, sampel uji (minyak esensial dan standar) pada konsentrasi mulai 10-,078 mg / ml disusun steril 96-baik microtitre-piring. kaldu semalam budaya masing-masing mikroba sasaran telah disesuaikan untuk mendapatkan suspensi yang mengandung 10 8 CFU / ml. Piring kemudian diinkubasi selama 24 jam pada 37 ° C untuk bakteri dan pada 26 ° C untuk ragi dan jamur. Nilai MIC didefinisikan sebagai konsentrasi terendah memproduksi tidak ada pertumbuhan terlihat (tidak adanya kekeruhan dan atau pengendapan) seperti yang diamati melalui mata telanjang. Percobaan yang dilakukan di tiga ulangan dan diulang dua kali. Streptomysin sulfat, oksasilin dan cyclohexamide digunakan sebagai kontrol positif sementara 5% campuran DMSO-kaldu digunakan sebagai kontrol negatif. Semua Hasil dicatat sebagai konsentrasi rata-rata rangkap tiga. Itu standar yang dipilih berdasarkan ketersediaan dan mereka Kehadiran di minyak esensial dipelajari.

HASIL DAN DISKUSI Minyak esensial Ranting dan akar minyak dari G. macrophyllus diperoleh oleh hidro-distilasi dan menghasilkan 0,14 dan 0,05% dari minyak, masing-masing. Kedua ranting dan akar minyak kekuningan di warna dengan bau kayu khas. kimia komposisi dari minyak esensial yang tercantum dalam Tabel 1. Dua puluh satu komponen yang mewakili 90,0% dari total komposisi minyak diidentifikasi dari minyak ranting . Menurut ke kromatogram gas, antara 21 konstituen, 87,5% diidentifikasi sebagai monoterpenoid. Yang paling Komponen berlimpah minyak ranting itu geranyl asetat (45,5%). Monoterpenoid utama lainnya hadir dalam minyak adalah geraniol (17,0%), linalool (12,7%), camphene (7,5%), cyperene (2,4%), α-terpineol (1,2%), α-pinene (0,8%) dan benzaldehida (0,5%). The seskuiterpenoid diidentifikasi di minyak ranting yang hanya mewakili 2,5% dari minyak dengan cyperene (2,4%) terdeteksi sebagai senyawa utama. Itu sesquiterpenoid lainnya diidentifikasi adalah β-caryophyllene yang menyumbang 0,2% dari minyak. Kandungan kimia dari minyak akar G. yg besarnya luar biasa phyllus dianalisis dengan GCMS dan mengakibatkan identifikasi empat belas senyawa yang diwakili 42,5% dari komposisi minyak Total. Minyak dibuat up didominasi dari monoterpenoid, merupakan 28,6% minyak sedangkan seskuiterpenoid merupakan hanya 13,9% dari minyak. Komponen utama dari minyak akar yang cyperene ( 9,8%), geranyl asetat (9,4%), camphene (7,5%), geraniol (3,4%), bornyl asetat (2,5%) dan linalool (2,6%). Senyawa lain yang hadir di jumlah yang cukup adalah camphene hidrat (1,2%), αpinene (0,8%), kamper (0,7%), β-caryophyllene (0,6%) dan benzaldehida (0,5%). Secara keseluruhan, hasil yang diperoleh digambarkan bahwa minyak komposisi antara ranting dan akar yang cukup mirip. Namun, camphene hidrat (1,2%), β-elemene (0,8%), gleenol (0,6%) dan 1-epi-cubenol (2,1%) yang diidentifikasi dalam

minyak akar tidak terdeteksi dalam minyak ranting dari G. yg besarnya luar biasa phyllus. Dalam kedua ranting dan akar sampel, total jumlah dari monoterpen lebih tinggi dari seskuiterpen dengan geranyl asetat (9,4-45,5%), geraniol (3,4-17,0%) dan linalool (12,7-2,6%) menjadi komponen utama. Keempat senyawa ini sebelumnya telah diidentifikasi di G. macrophyllus dan Goniothalamus boornensis minyak kulit kayu sebagai komponen utama dengan Fasihuddin et al. (2007) dan Ibrahim et al. (2005). Sebuah studi terbaru oleh Hisham dkk. (2006) pada komposisi minyak esensial GoniothaLamus cardiopetalus bagian kulit menunjukkan bahwa minyak terkandung baik monoterpenoid dan sesquiterpenoid di jumlah yang signifikan dengan linalool (11,7%), kamper (3.9%) dan bornyl asetat (3,9%) sebagai konstituen utama. Oleh karena itu, komponen ranting dan akar minyak dari G. yg besarnya luar biasa phyllus ditemukan dalam penelitian ini adalah minimal sama di mononya terpenoid dan konten sesquiterpenoid dengan komponen aktivitas antimikroba Aktivitas antimikroba dari akar dan ranting minyak dari G. macrophyllus bersama-sama dengan empat dari referensi standar: α-pinene, linalool, geraniol dan geranyl asetat yang diselidiki dengan metode mikrodilusi kaldu dan Hasilnya ditunjukkan pada Tabel 2. Minyak ditemukan menunjukkan aktivitas antimikroba terkenal dengan MIC nilai di bawah cut off point dari 1 mg / ml (Gibbon, 2004). Minyak akar yang jauh lebih aktif dari ranting minyak dalam menghambat semua bakteri dan strain jamur kecuali P. aeruginosa. The bakteri gram negatif dengan mereka membran luar membatasi umumnya kurang rentan dengan minyak esensial diuji (Nikaido dan Vaara, 1985; Mann et al., 2000). Minyak akar memiliki terkuat efek penghambatan terhadap VISA 24, S. epidermidis dan C. albicans dengan nilai MIC 0,3 mg / ml. Minyak ranting menunjukkan moderat untuk aktivitas lemah terhadap semua strain bakteri diuji dengan nilai MIC mulai dari 2,5-5 mg / ml. Kedua dermatofit, T. rubrum dan M.

canni s namun menunjukkan kerentanan mirip ranting dan minyak akar dengan nilai MIC 2,5 mg / ml. Aktivitas antibakteri dan antijamur dari empat standar acuan ditunjukkan α-pinene kuat untuk efek penghambatan moderat terhadap bakteri dan jamur Pertumbuhan (konsentrasi 0,3-2,5 mg / ml). S. epidermidis, C. albicans, T. rubrum dan M. cannis yang paling rentan terhadap senyawa diselidiki dan maka mendukung temuan sebelumnya pada α-pinene ini signifikan potensi antimikroba (Dorman dan Dekan, 2000). Mencetak MIC pada 5 mg / ml, antimikroba geranyl asetat ini aktivitas di sisi lain, diabaikan meskipun yang kelimpahan di kedua ranting dan akar minyak. linalool dan geraniol ditemukan kurang efektif untuk semua mikroorganisme diuji dengan nilai MIC berkisar antara 1,2 sampai 5 mg / ml. Kegiatan penghambatan seperti yang diamati dari ranting dan Minyak akar bisa disebabkan senyawa dan atau kelompok lain senyawa bekerja secara sinergis. Ini akan mungkin menjelaskan perbedaan besar dalam penghambatan masing-masing potensi. Tunduk farmakodinamik lebih lanjut dan Temuan evaluasi keamanan, hasil studi ini mendukung kemungkinan penggunaan G. minyak macrophyllus sebagai salah satu bahan aktif untuk produk perawatan pribadi. Sebagai tambahan, bahan kimia penyelidikan G. macrophyllus penting Minyak juga dapat digunakan sebagai panduan kemotaksonomi untuk identifikasi spesies lain Goniothalamus. UCAPAN TERIMA KASIH Penelitian ini didukung oleh Kementerian Sains, Teknologi dan Inovasi (MOSTI), Malaysia mendanai ada: 02-03-10SF0047. Para penulis ingin mengucapkan terima kasih Kamarudin Salleh atas bantuannya dalam mengumpulkan dan mengidentifikasi bahan tanaman dan juga untuk staf Tanaman Obat Divisi Penelitian Hutan Institutes terutama Abd. Majid Jalil, Mazurah Mohd. Isa, Hannan Abdul Wahab, Mohd Faridz, ZP, Nik Yasmin, NY dan Ahmad Abdul Qayyum, M. untuk bantuan teknis mereka. singkatan GC-FID, Gas Chromatography-api ionisasi detektor; GC-MS, kromatografi gas / spektrometri massa; TSB,

tryptic kedelai kaldu, SDB, sobouraud kaldu dekstrosa, DMSO, dimetil sulfoksida

Adams RP (2001). Identification of essential oils components by gas chromatography/mass spectroscopy. Carol Stream: Allured. Alali FQ, Zhang Y, Rogers L, Mclaughlin JL (1999). Goniotriocin and (2, 4-cis- and -trans)xylomaticinones, bioactive acetogenins from Goniothalamus giganteus. J. Nat. Prod. 62: 31-34. Blazquez MA, Bermejo A, Zafra-Polo MC, Cortes D (1999). Styryl-lactones from Goniothalamus species -A review. Phytochem. Anal. 10: 161-170. Burkill IH (1966). A Dictionary of The Economic Products of The Malay. Vol 1 and 2. 2nd Ed. Ministry of Agriculture and Cooperative, Kuala Lumpur. Burkill IH, Haniff M (1930). Malay village medicine. Gard. Bull. Straits Settl. 6: 165-321. Cao SG, Wu XH, Sim KY, Tan BKH, Pereira JT, Goh SH (1998). Styryl-lactones derivatives and alkaloids from Goniothalamus borneensis. Tetra. 54: 2143-2148. Dorman HJ, Deans SG (2000). Antimicrobial agents from plants: antibacterial activity of plant volatile oils. J. Appl. Microb. 88: 308-316. Ee GLC (1998). Larvicidal principles from Goniothalamus velutinus (Annonaceae). Oriental. J. Chem. 14: 41-46. Fasihhudin BA, Zaini A, Ibrahim J (2005). Chemical composition and antimicrobial activities of the essential oils of Goniothalamus boornensis. Pp 9-15 in Ibrahim J et al. (Eds.) In Herbal Medicine: nature’s gift for health: Proceedings of the 21st Annual Seminar of The Malaysian Natural Products Society. 22-23 november 2005, Kuala Lumpur. Gibbon S (2004). Anti-staphylococcal plant natural products. Nat. Prod. Rep. 21: 263277. Hisham A, Pathare N, Saidi AS, Jayakumar G, Bhai AMD, Harikumar B (2006). The composition and antimicrobial activity of stem bark essential oil of Goniothalamus cardiopetalus (BI.) Hook. f. et Thoms. J. Essential Oil. Res. 18: 451-454. Ibrahim J, Fasihuddin A, Lily D (2005). Chemical constituents of the bark Oil of Goniothalamus macrophyllus Hook. f. from Malaysia. J. Essential Oil. Res. 17: 181-183. Jennings W, Shibamoto T (1980). Qualitative analysis of flavor fragrance volatiles by glass capillary gas chromatography. Academic press, New York.

Khan MR, Komine K, Omoloso AD (1999). Antimicrobial activity of Goniothalamus grandiflorous. Pharm. Biol. 37: 340-342. Leboeuf M, Cave A, Bhaumik PK, Mukherjee B, Mukherjee R (1982). The phytochemistry of the Annonaceae. Phytochemistry, 21: 2783-2813. Mann CM, Cox SD, Markham JL (2000). The outer membrane of Pseudomonas aeruginosa NCTC6749 contributes to its tolerances to the essential oil of Melaleuca alternifolia (tea tree oil). Lett. Appl. Microbiol. 30: 294-297. Nikaido H, Vaara M (1985). Molecular basis of bacterial outer membrane permeability. Microbiol. Rev. 49: 1-32. Perry LM (1980). Medicinal plants of east and Southeast Asia. MIT Press, Cambridge. Sam TW, Sew YC, Matsjeh S, Gan EK, Razak D, Mohamed AL (1987). Goniothalamine oxide: an embrotoxic compound from Goniothalamus macrophyllus. Tetra. Lett. 28: 2541-2544. Saiful AJ, Mastura M, Zarizal S et al (2006) Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using mecA/nuc genes and antibiotic susceptibility profile of Malaysian clinical isolates. World J. Microbiol. Biotechnol. 22:1289-1294. Wiart C (2000). Medicinal plants of Southeast Asia. Pelanduk Publication, Kuala Lumpur. Wirasathien L, Jongboonprasert V, Krungkrai Aimi JN, Takayama H, Likhitwitayawuid K (1997). Antimalarial alkaloids from Goniothalamus tenuifolius. Pharmaceu. Pharmacol. Lett. 7: 99-102. Zhang YJ, Zhou GX, Chen RY, Yu DQ (1999). Styryl-lactones from the rhizomes of Goniothalamus griffithii. J. Asian. Nat. Prod. Res. 1: 189-197.