Instrumentasi Elektroforesis.pptx

INSTRUMENTASI ELEKTROFORESIS

Kelompok 15 Anggota: 1.Dzatun niqotaini 1500023151 2.Khairunisa Maer 1500023155 3.Wirahman 1500023154

Elektroforesis Merupakan kromatografi yang diberi medan listrik disisinya dan tegak lurus aliran fasa gerak.

Lanjutan…  Elektroforesis adalah suatu teknik pemisahan komponen atau

molekul yang bermuatan berdasarkan perbedaan tingkat migrasinya dalam sebuah medan listrik).

Prinsip kerja . Prinsip kerja dari elektroforesis berdasarkan pergerakan partikel-partikel bermuatan negatif (anion), dalam hal tersebut DNA, yang bergerak menuju kutub positif (katode), sedangkan partikel-partikel bermuatan positif (kation) akan bergerak menuju kutub negatif (anode

Jenis elektroforesis  Elektroforesis gel = Elektroforesis gel ialah elektroforesis

yang menggunakan gel sebagai fase diam untuk memisahkan molekul-molekul.  Eletroforesis kertas = Elektroforesis kertas adalah jenis elektroforesis yang terdiri dari kertas sebagai fase diam dan partikel bermuatan yang terlarut sebagai fase gerak, terutama ion-ion kompleks.  Elektroforesis kapiler = Elektroforesis kapiler adalah metode elektroforesis yang digunakan untuk memisahkan asam amino, protein, lipid, karbohidrat, dan nukleotida dengan resolusi tinggi yang dilakukan pada pipa kapiler berisi buffer.

A. Instrumentasi Elektroforesis gel

Elektroforesis gel memiliki beberapa komponen yang terdiri dari:  Cloth wick : digunakan untuk membentuk well pada gel agarose.  Tray/ gel slab : digunakan untuk sebagai cetakan gel agarose.  Chamber/ elektrolyte solution : digunakan sebagai wadah gel agarose.  Sumber listrik: digunakan untuk memberi arus saat proses elektroforesis

B.Instrumentasi Elektroforesis kertas

C. Instrumentasi Elektroforesis Kertas

1.

Pipa kapiler  Pipa kapiler bertindak sebagai kolom tempat proses pemisahan pengganti kertas atau agar-agar pada elektroforesis konvensional.  Pipa kapiler terbuat dari gelas dengan diameter dalam berkisar antara 25-100 µm dan panjang antara 50-100 cm.  semakin kecil ukuran diameter pipa kapiler maka semakin besar harga N. Oleh karena itu, semakin besar diameter (>100) maka pemisahan semakin tidak efisien.

Larutan buffer  Pipa kapiler diisi dengan larutan buffer dan kedua ujung pipa kapiler tersebut tercelup dalam larutan buffer.  Larutan buffer berfungsi sebagai larutan elektrolit untuk menghantarkan arus listrik dan untuk pengontrol muatan molekul. Karena molekul dapat bermuatan positif, negative, atau netral bergantung pada pH larutan dan sebagaimana fungsi buffer dalam menahan pH.  pH buffer dapat mengontrok selektifitas pemisahan elektroforesis,

Sumber arus searah  Dalam elektoforesi konvesional dialirkan arus searah sekitar 100 volt tetapi dalam elektroforesis kapiler dialirkan arus searah bertegangan sangat tinggi 10.000-30.000 volt. Oleh karena itu, ekperimen elektroforesis kapiler dapat dilakukan dalam beberapa menit sedangkan eksperimen elektroforesis konvensional dilakukan dalam waktu sehari.

Detector  Detector diletakkan disalah satu ujung pipa kapiler yaitu dekat katoda.  Berbagai detector telah digunakan untuk mendeteksi komponen-komponen hasil pemisahan, antara lain : spektrometri (seperti UV dan fluoresen) dan detector elektrokimia (seperti konduktometri dan amperometri).

Elektroda => Platinum foil  Potensial => dc supply 20-30 kV (high voltage) Daerah buffer diberi sungkup dari flexiglass ~ V >>> 

 Injeksi: beberapa L (atau nL untuk elektrooresis kapiler

kinerja tinggi/HPCE) ke bagian ujung kapiler yang bermuatan + (positif) dibantu dengan gravitasi

Sistem injeksi: a.

Injeksi hidrodinamik: pada sistem ini digunakan bantuan tekanan saat menginjeksikan sampel pada kolom kapiler.

b.

Injeksi elektrokinetik: digunakan bantuan arus listrik saat sampel diinjeksikan pada kolom kapiler.

Daftar pustaka 

http://destirumapea24.blogspot.co.id/2015/03/kromatografi-elektroforesis.html



http://rumahbiotek.blogspot.co.id/2014/08/elektroforesis-dna.html



http://www.generasibiologi.com/2012/08/elektroforesis.html



http://paj89.blogspot.co.id/2013/05/laporan-praktikum-biomol-elektroforesis.html