EXTRACCION Y ANALISIS DE ACIDOS NUCLEICOS Material biológico inicial: - Cultivo de bacterias, hongos, cultivos celulares, tejidos animales y vegetales, células recolectadas desde fluidos biológicos, etc.
Lisis celular: - Obtención de un homogenizado desde el cual se puede realizar una extracción posterior del material genético - Destrucción de las membranas celulares, degradación de proteínas, ruptura de la envoltura nuclear (Soluciones compuestas de detegentes, sales, proteasas)
Extracción de ADN - Precipitación salina
- Extracción desde mezclas de solventes orgánicos
Extracción de ADN - Fraccionamiento por ultracentrifugación isopícnica (equilibrio de sedimentación)
Extracción de ADN - Separación por adsorción
- Separación por cromatografía de afinidad
- Separación por cromatografía de intercambio iónico
Extracción de ARN - Extracción en presencia de tiocianato de guanidinio
- Purificación por precipitación salina diferencial
- Extracción por cromatografía de afinidad
Análisis de ácidos nucleicos - Electroforesis
Observación
Análisis de ácidos nucleicos - Electroforesis Cálculo de tamaño de los fragmentos de ADN