Art Molecular.docx

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SDS: tampon de extracción CTAB: tampon de etracción los objetivos de este trabajo fueron estudiar los efectos específicos de la composición del tampón de lisis de SDS y los compuestos orgánicos sobre la calidad y la cantidad de ADN extraído. Todas las semillas de soja se molieron y homogeneizaron en nitrógeno líquido con un molino mezclador, seguido de filtración a través de un tamiz de 80 mallas. Todas las muestras de tierra se almacenaron a -20 ° C antes de la extracción de ADN El rendimiento y la pureza del ADN se determinaron utilizando Nanodrop 2000 (Thermo Scientific, Waltham, EE. UU.), Un método de espectrofotometría UV, a un valor de absorción de 260 nm y relaciones de absorbancia a 260/280 nm respectivamente. La calidad del ADN se estudió mediante electroforesis en un gel de agarosa al 1% que contenía la tinción de ácido nucleico verde Plus 4S El método basado en SDS dio el mayor rendimiento de ADN de las semillas de soja, mientras que los otros métodos tuvieron rendimientos de ADN considerablemente más bajos La extracción de ADN a partir de semillas de soja con el método basado en SDS produjo la mayor pureza y concentración Las interacciones entre el SDS y las proteínas de la membrana celular contribuirán a la lisis celular que promueve la extracción de ADN, mientras que la interacción con el ADN inhibe los ensayos de amplificación posterior, El mayor rendimiento de ADN extraído se obtuvo con SDS al 2% (p / v). En conclusión, la composición optimizada del tampón de lisis SDS (pH 8.0) consistió en SDS al 2% (p / v), NaCl 150 mM, Tris / HCl 50 mM y EDTA 50 mM para semillas de soja. Protocolo E mostró los mejores resultados para el aislamiento del ADN, lo que demuestra que el isopropanol fue el compuesto más eficiente para la primera precipitación del ADN

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