Tutorial Para Pruebas De Simplate

TUTORIAL PARA HACER PRUEBAS DE SIMPLATE

MATERIAL NECESARIO  Charolas  Reactivos  Agua estéril (10 ml aprox. por reactivo y 90 ml por muestra)  Pipetas Estériles de 1 ml (1 por muestra y 1 por cada suplemento que se le vaya a agregar)  Pipetas Estériles de 10 ml (1 por cada tipo de reactivo que se vaya a usar)  Mechero de Alcohol (En caso de que el cliente no tenga uno en la planta)  Sanitizante (Yodo 1% , Etanol 70%)  Encendedor o cerillos

Lámpara de Luz UV (En caso de que sea Simplate Col y E. coli o se haya adicionado Suplemento V al Simplate Hongos y Levaduras)  Suplemento A (Antiburbujas)  Suplemento V (En caso de que la muestra sea Jugo de Naranja sin diluir que contenga Vitamina C o para alimento seco para mascotas, para Hongos y Levaduras) Suplemento M (En caso de que la muestra sea carne cruda o especies, para Hongos y Levaduras)

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA 1. Pesar 10 g o medir 10 ml de la muestra. 2. Agregarlos a 90 ml de agua estéril. 3. Mezclar bien.

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA PRUEBA SENCILLA 1. Limpiar muy bien la superficie de trabajo con un sanitizante 2. Prender mechero para tener condiciones asépticas 3. Hidratar el reactivo con 9 ml de agua estéril. 4. Agregar 0.1 ml de Suplemento “A” (Antiburbujas) al tubo con reactivo hidratado. 5. Mezclar bien. 6. En caso de que sea Simplate para Hongos y Levaduras y la muestra sea Jugo de Naranja sin diluir que contenga Vitamina C o alimento seco para mascotas se adiciona 0.1 ml de Suplemento “V” al tubo con reactivo hidratado. Si la muestra es carne

6. Agregar 1 ml de la muestra en el centro de la charola. 7. Agregar la mezcla del reactivo con el/los suplementos a la charola.

8. Cerrar la tapa, suavemente mover la charola en forma circular para distribuir toda la mezcla muestra/reactivo por todos los pocillos.

9. Inclinar la charola hacia usted para permitir que la esponja absorba el líquido.

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA PRUEBA MÚLTIPLE

1. Limpiar muy bien la superficie con sanitizante 2. Prender mechero para tener condiciones asépticas 3. Hidratar el reactivo con 90 ml de agua estéril. 4. Agregar 0.9 ml de Suplemento “A” (Antiburbujas) al frasco con reactivo hidratado. 5. Mezclar bien. 6. En caso de que sea Simplate para Hongos y Levaduras y la muestra sea Jugo de Naranja sin diluir que contenga Vitamina C o alimento seco para mascotas se adiciona 0.9 ml de Suplemento “V” al tubo con reactivo hidratado. Si la muestra es carne cruda o especies agregar 0.9 ml del Suplemento “M”.

6. Agregar 1 ml de la muestra en el centro de la charola. 7. Pipetear 9 ml + 0.2 ml de reactivo hidratado en la charola.

8. Cerrar la tapa, suavemente mover la charola en forma circular para distribuir toda la mezcla muestra/reactivo por todos los pocillos.

9. Inclinar la charola hacia usted para permitir que la esponja absorba el líquido.

INOCULACIÓN DIRECTA Para efectos de muestra a los clientes, hemos implementado un método de “Inoculación Directa” en la charola. Ésta consiste en inocular algunos posillos con un hisopo estéril empapado con una solución de buffer neutralizante y con bacterias específicas para cada prueba. Un tubo con Coliforme Totales y E. Coli, otro con Bacterias para Cuenta Total y otro con Hongos y Cuent Col y Hongos y Levaduras. Esto con el fin de que el cliente pueda ver el cambio de color en vivo y no en foto como se hace la mayoría de las veces.

a Total

E. coli

Levaduras

11. Incubar a: a) Coliformes y E. coli: 35 + 1 °C por 24-28 hrs. b) Cuenta Total: 35 + 2 °C por 24 hrs c) Hongos y Levaduras: 22-25 °C por 48-72 hrs

INTERPRETACION DE RESULTADOS

• Después de incubar, observe el cambio de color del líquido en los pocillos. • No le ponga atención a las partículas presentes. • Cuente el número de pocillos que tengan un cambio de color con respecto al color base. • El reactivo originalmente es morado y hay que contar los pocillos que cambien a color rosa o cremita.

NOTA: Para las pruebas de Coliformes y E. coli se cuentan los pocillos que cambian de color y eso indica la presencia de Coliformes Totales y con una lámpara de luz UV (con longitud de onda de 366 nm) de 15 a 20 cm arriba de la charola, y los pocillos que produzcan una fluoresencia azul indican la presencia de E. coli. NOTA: Para las muestras que contengan suplemento V, cuente solo el número de pocillos que presente fluoresencia azul con la lámpara de luz UV.

CAMBIA A COLOR ROSA COLOR MORADO ORIGINAL

POCILLOS FLUORESCENT ES

12. Cuente los pocillos positivos, es decir, los que cambiaron de color. 13. Determine el número total de microorganismos por charola con ayuda de la Tabla de Conversión Simplate. 14. La tabla te da los resultados

Para cualquier duda o aclaración favor de comunicarse con el Soporte Técnico de Serco Comercial con el Q.B.P. Mauricio Galván al

Castillo

Tel (01 81) 83 43 12 14 Ext. 210 o escribir al e-mail: [email protected]