Recuento De Coliformes En Alimentos

Recuento De Coliformes En Alimentos. Count Of Coliform In Food.

Angarita Bautista Leidy Yudith Código: 02171043, Eulegelo Osorio Yulie Astrith Código: 03172027, Parada Cardenas Geisel Yelene Código: 04172026, Porras Manrique ana patricia Código: 03172011 RESUMEN Los jugos de frutas que se venden en las calles, poseen fuerte potencialidad para la transmisión de enfermedades gastrointestinales debido a que son alimentos extensamente manipulados. Los coliformes son microorganismos que se utilizan como índice de contaminación fecal al encontrarse principalmente en el intestino del hombre y animales de sangre caliente. En algunos alimentos se requiere la investigación de la presencia o ausencia de estos microorganismos, por exigencias de disposiciones legislativas porque en dichos productos la presencia es indicadora de mala calidad microbiológica. La metodología es basada en sembrar en el Agar Chromocult y caldo Lauryl Sulfato de la cantidad de muestra en la que se quiera conocer la presencia o ausencia de coliformes totales y fecales, y posterior incubación a 37 ºC durante 48 horas. Las colonias sospechosas se confirman con las pruebas IMVIC y emisión de fluorescencia. Palabras Claves: Coliformes, NMP (numero más probable), Recuento, Vertido en placa, E. coli. ABSTRACT The fruit juices sold on the streets are good vehicle to transmit gastrointestind diseases to consumers because they are highly manipulated. The coliform organisms that are used as an indicator of fecal contamination to be found primarily in the intestines of humans and warm-blooded animals. In some foods is required investigating the presence or absence of these microorganisms, either because of legislative requirements well in those products that the presence is indicative of poor microbiological quality. The methodology is based in sow in the Chromocult Agar and Lauryl Sulfate Broth of the amount of shows in which they want to know the presence or absence of fecal and total coliform, and after incubation at 37 °C for 48 hours. The suspect colonies are confirmed with evidence IMVIC and issuance of fluorescence. Key Word: Coliform, MPN (most probable number), Count, Landfill plate, E. coli.

INTRODUCCION La venta de alimentos en la calle constituye un factor positivo por su posibilidad de generar empleos, movilizar gran cantidad de recursos y satisfacer la obtención de obtener comidas rapidas, entre otras ventajas; pero la frecuente presentación de malas condiciones higienicas en el procesamiento y oferta señalan la importancia de mantener el control sanitario a esta actividad. Los microorganismos patógenos que se han detectado en alimentos vendidos en la calle no difieren de los encontrados en las comidas preparadas y servidas en establecimientos cerrados, aunque los problemas potenciales son mayores y más frecuentes. En este sentido se reconoce la necesidad de mejorar los programas de protección de los consumidores de alimentos que se venden en las calles. MATERIALES * 4 cajas de petri estériles * 9 tubos estéries con campana de durman y caldo Lauryl Sulfato. * 2 pipetas estériles de 10ml * 2 pipetas estériles de 1ml * 1 pipeteador * 1 gradilla * 2 fiolas con caldo peptona estériles METODO * Tipo de muestra: Jugo pasteurizado Fecha vencimiento: 18/03/09 Lote: 31701 Sabor: Fresa Marca: Alpina

* Tipo de muestras: Jugo casero Fecha de preparación: 19/08/08 Hora: 4:00 p. m. Sabor: Guayaba en agua. Procedimiento Salmonella spp. 1. Fase PRE- enriquecimiento en ½ líquido no selectivo Pesar 25 gr. De la carne asépticamente Adicionar y Homogenizar

cruda

25 gr. de carne cruda 255 ml Agua peptona Dilución 10-1 Incubar a 37ºC por 18-24 horas 2. Fase Enriquecimiento no selectivo Adicionar 1ml Dilución 10-1 Selenito

caldo Cisteína Dilución

10-2 Incubar a 42ºC en Baño María, por 18 horas 3. Fase Aislamiento diferencial en ½ selectivos

Sembrar por Aislamiento Dilución 10-2 Caldo Selenito Cisteína salmonella-shigella

Agar S-S

Incubar a 37ºC, por 24 horas a 48 horas

Oxidasa a las colonias típicas Observar la presencia de colonias negras con un alo rosado, realizar Gram a las colonias típicas, Si hay bacilos Gram Negativos realizar bioquímica

Catalasa a las colonias típicas

A partir de las colonias del Gram. Que sean bacilos cortos gram positivos, catalasa positiva oxidasa negativa

Procedimiento Listeria monocytogenes: 1. Fase PRE- enriquecimiento en ½ líquido no selectivo

Se les realiza identificación:

Tomar 25 ml. De la avena en leche casera, Adicionar agua peptona y Homogenizar

Agar Sangre

25 ml. de avena en leche casera 255 ml Agua peptona Dilución 10-1 Incubar a 37ºC por 18-24 horas en la incubadora 2 Fase siembra en medios diferenciales:

Dilución 10-1 Sembrar por Sangre Aislamiento

Glucosa sacarosa VP-RM movilidad

TSI

Agar

Incubar a 37ºC, por 24 horas 3. Fase Identificación Realizar coloración de Gram. a las colonias típicas

RESUMEN Todos los coliformes son lactosa positiva, pero se diferencian en el agar chromocult por reacciones bioquímicas. Los colifomes totales tienen la Bgalactosidasa, este complejo activa el compuesto cromógeno alfa –GAL que produce un color azul violeta. Los coliformes son habitantes de tracto gastrointestinal tanto del hombre como de los animales. El mas representativo

del grupo es la E. coli, La presencia de coliformes en cualquier alimento nos indica una mala calidad higiénica de los manipuladores. Estos son uno de los grupos indicadores determinados en la industria de alimentos para el control de calidad, mas que todo la importancia radica en la presencia de coliformes fecales que es indeseable por que no dice la mala manipulación e higiene de quien procesa el alimento y también indicándonos contaminaciones cruzadas El alimento analizado en esta práctica fue el jugo casero y el pasteurizado, Resultando el jugo casero con un recuento en la siembra NMP de 330 con 240 bac/100ml indicando la presencia de coliformes totales, se realizo la prueba de fluorescencia a cada tubo dando negativa. En la siembra en placa se encontraron 27 colonias de color rojo en la dilución 10-3 y 7 colonias en la dilución 10-4, El en la siembra en placa del jugo pasteurizado, no hubo ningún crecimiento demostrando que en el procedimiento se cumplió con las normas exigidas para el análisis y que cumple con los parámetros admisibles para el consumo humano. BIBLIOGRAFÍA http://www.javeriana.edu.co/biblos/te sis/ciencias/tesis105. http://www.uprm.edu/biology/profs/m assol/manual/p4nmpenumeracion.pdf http://usuarios.lycos.es/zandoli/web3/ Tabla%20NMP.htm

http://www.ainia.es/pdf/laboratorios/fich as/ColiformesTotalesFecalesyE_coli(Inv)( 110086).pdf