Medios De Cultivo

MEDIOS DE CULTIVO MEDIOS SELECTIVOS Permiten seleccionar un tipo de microorganismo contiene inhibidores para algunos microorganismos permitiendo el crecimiento de otros. SELECTIVOS CARBOHIDRATO

INHIBIDOR INDICADOR

MANITOL SALADO Manitol

MAC CONKEY

Cloruro de Sodio 7 a 7,5 % pH Rojo de Fenol

Sales Biliares y Cristal Violeta

Lactosa

Rojo Neutro

Rojo Púrpura Rosado (Lactosa + o A/A) Estafilococos Enterobacterias MICROORGANISMOS Staphylococcus Escherichia coli aureus, (rojo halo turbio), Klebsiella Staphylococcus epidermidis pneumoniae (rojo) (rosado mucoso) COLOR DEL MEDIO VIRA

Rojo Amarillo

SELECTIVOS

S-S (Salmonella – Shiguella)

CARBOHIDRATO

Lactosa

INHIBIDOR INDICADOR COLOR DEL MEDIO

SABOURAUD GLUCOSADO Glucosa

Ruiz Castañeda

Medio Bifásico (Líquido y Sólido) Del Hemocultivo se inocula a Ruiz Castañeda. E n la mayoría de Sales Biliares y los procesos el Verde agudos, tras incubar Brillante el medio 2-4 días, Rojo Neutro es posible observar en la fase sólida pequeñas colonias Rojo

Ámbar Claro

T C BS TioSulfato de Sodio, Citrato de Sodio, Bilis y Sacarosa

Azul de Timol – Azul de Bromotimol Verde Claro Amarillo

Hongos Patógenos y Saprofitos

Vibrios

XLD (Xilosa Lisina Desoxicola to)

Agar Lowenstein - Jensen

Xilosa, Lactosa y Sacarosa

Contiene Huevo y Glicerina (Crecimiento de Micobacterias) Verde de Malaquita

Desoxicolato de Sodio Rojo de Fenol Rojo

Verde

anaranjado

VIRA

Transparente (no usan la lactosa)

MICROORGANISMOS

Salmonella – Shiguella

que se deslizan por el agar en forma que recuerdan las lágrimas de cera resbalando por la vela. Una pequeña proporción de casos presenta el crecimiento entre los 5-15 días, y sólo de forma excepcional, éste se retrasa hasta pasados 30-45 días. Brucellas

Amarillo

Colonias Cremas para M. tuberculosis

Enterobacte rias – Coprocultiv os (Descarboxil ación de la Lisina con Producción de H2S

Micobacterias

Manitol Salado.• Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. • Los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o púrpura. Las colonias sospechosas, se repicarán en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa. • Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color. • Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o púrpura. SELECTIVOS CARBOHIDRATO INHIBIDOR INDICADOR COLOR DEL MEDIO VIRA MICROORGANISMOS

E.M.B. Lactosa y Sacarosa Eosina y Azul de Metileno Marrón Claro Enterobacterias y Algunas Bacterias Gram -, Candidas

MEDIOS ENRIQUECIDOS Medios Comunes a los que se añaden un suplemento nutritivo que le proporciona los factores de crecimiento. ENRIQUECIDOS

CARBOHIDRATO

AGAR SANGRE (5 % De Sangre de Carnero o Sangre de Humano) (50 oC) Infusión de Músculo Cardíaco (Corazón)

AGAR CHOCOLATE (80 oC) por 10’

Cerebro-CorazónPeptona

INHIBIDOR INDICADOR COLOR DEL MEDIO Rojo Cereza Pardo Chocolate VIRA MICROORGANISMOS Enterobacterias, Enterobacterias, Estafilococos, Estafilococos, Estreptococos, Estreptococos, Neisseria Neisseria Neisseria Neisseria gonorrhoae Meningitidis, Staphylococcus aureus (Beta), Streptococcus Pyogenes (Beta)

Caldo Selenito

MÜLLER HINTON

Ámbar Para Antibiogramas y Bacillus subtilis

Para Coprocultivo

MUELLER HINTON Y AGAR NUTRITIVO SIRVEN PARA PREPARAR AGAR CHOCOLATE Y AGAR SANGRE

MEDIOS DIFERENCIALES Son los que permiten distinguir a simple vista 2 ó más tipos de Bacterias, este comportamiento diferencial se traduce en el viraje de color de una sustancia indicadora.

TSI (Triple Sugar Iron) SELECTIVOS CARBOHIDRATO INHIBIDOR INDICADOR COLOR DEL MEDIO VIRA MICROORGANISMOS

TSI Lactosa 10 g/L, Sacarosa 10 g/L y Glucosa 1 g/L Rojo de Fenol Rojo Amarillo (Metaboliza los Hidratos de Carbono) Enterobacterias

¡Si Crecen en todas son Bacterias Facultativas!

LIA (Lisina Hierro Agar) SELECTIVOS CARBOHIDRATO INHIBIDOR INDICADOR COLOR DEL MEDIO VIRA MICROORGANISMOS

LIA Glucosa Púrpura de Bromocresol Violeta Salmonella spp., Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli

Simmons Citrato SELECTIVOS CARBOHIDRATO INHIBIDOR INDICADOR COLOR DEL MEDIO VIRA MICROORGANISMOS

Citrato

Azul de Bromotimol Verde Azul Enterobacterias

Úrea (CU) SELECTIVOS CARBOHIDRATO INHIBIDOR INDICADOR COLOR DEL MEDIO VIRA MICROORGANISMOS

Ú re a El Alimento es el Extracto de Levadura y como Sustrato la Úrea Rojo de Fenol Amarillo Anaranjado Rojo Proteus spp

SIM (SULFURO-INDOL-MOTILIDAD) SELECTIVOS AMINOÁCIDO

SIM Triptófano (Natural) Tripteína (Sintético)

INHIBIDOR INDICADOR COLOR DEL MEDIO VIRA MICROORGANISMOS

Ámbar Klebsiella pneumoniae, P. mirabilis, E. coli

SIM CONTIENE LA MÁS ALTA CONCENTRACIÓN DE H2S • Cepas móviles: producen turbidez del medio, que se extiende más allá de la línea de siembra. • Cepas inmóviles: el crecimiento se observa solamente en la línea de siembra. • Cepas H2S positivas: ennegrecimiento a lo largo de la línea de siembra o en todo el medio. • Cepas H2 S negativas: el medio permanece sin cambio de color. • Cepas indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el reactivo de Kovacs o de Erlich. • Cepas indol negativas: sin cambio de color.

Rojo de Metilo / Voges-Proskauer Estas dos pruebas forman parte de las pruebas colimetrías y permiten la diferenciación dentro de las enterobacterias del grupo coli y aerógenes. Las enterobacterias son anaerobios facultativos que utilizarán la glucosa en dos fases: primero la metabolizarán aerobiamente (respiración oxibióntica) consumiendo rápidamente el oxígeno del medio, para, en segundo lugar, continuar metabolizándola por vía anaerobia (fermentación). Ésta puede ser de dos tipos:

•

Fermentación ácido mixta: La realizan las bacterias del grupo de E.coli y los productos finales son ácidos orgánicos (ácidos fórmico, acético, láctico y succínico) que provocan un fuerte descenso del pH inicial del medio. Puede detectarse por el viraje del indicador de rojo de metilo que permanece amarillo por encima de pH 5,1 y rojo por debajo de 4,4.

•

Fermentación butilén glicólica: La realizan las bacterias del grupo KlebsiellaEnterobacter (antiguo aerógenes). Los productos finales son compuestos neutros como el butanodiol y el etanol, produciéndose acetoína como intermediario que podrá ser detectada añadiendo al medio KOH (reactivo A de Voges-Proskauer) y alfa-naftol (reactivo B de Voges-Proskauer) que reaccionarán con este compuesto produciendo un color rojo característico.

Para la realización de estas dos pruebas se cultiva el microorganismo en caldo RMVP (medio de Clark y Lubs) y se incuba a 30ºC durante un periodo de 3 días como mínimo y 5 como máximo. Al revelar las pruebas, se separa el cultivo en dos porciones de unos 2,5ml que servirán para cada uno de los ensayos.

Rojo de Metilo: A uno de los tubos

Voges-Proskauer: A la otra porción

se le añade: • Unas gotas (4-5) de solución indicadora de Rojo de Metilo. • Se agita para homogeneizar y se observa la coloración. Se considera positiva si vira al rojo y negativa si permanece amarillo.

de cultivo se le añade: • 0,6ml del Reactivo A de VogesProskauer (alfa-naftol 5% en etílico absoluto). El medio adquiere un aspecto lechoso. • 0,2ml del Reactivo B de VogesProskauer (KOH 40%). Desaparece el aspecto lechoso y se agita fuertemente. Si la prueba es positiva, antes de cinco minutos aparece un color rosadovioláceo, más o menos intenso, que se inicia en la parte superior del tubo. Si la prueba es negativa no aparece coloración alguna.

BILIS-ESCULINA SELECTIVOS CARBOHIDRATO INHIBIDOR INDICADOR COLOR DEL MEDIO VIRA MICROORGANISMOS

SIM Sales Biliares Ámbar u oscuro ligeramente opalescente. El medio con esculina tiene un tinte azulado Verde Oliva hasta Negro Enterococos (Estreptocos del Grupo D)

MEDIOS DE TRANSPORTE • CARY BLAIR Medio Semi-Sólido ¾ del tubo (Para Coprocultivos con Hisopos) • STUART Todo tipo de Secreciones • SUERO FISIOLÓGICO • CALDO MULLER HINTON No Tiene Agar, No Cuaja • TIOGLICOLATO Bacterias Anaeróbicas

OTROS • MICOBIÓTICO Es el Agar Sabourad conteniendo antibiótico y antimicótico (Cicloheximida y Cloranfenicol) (Crecen los Dermatofitos. Aspergillus, Microsporum, Candida, Tricophyton m.).