UNIVERSIDAD DE NARIÑO 2009-FACULTAD DE MEDICINA-AREA DE BIOQUIMICA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO PREINFORME No.5 IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS EN EL SUERO SANGUINEO CHAPUES GLORIA-ESPINOSA KATHERINE-JARAMILLO ESTEVANN
1er PUNTO Preparación de la Muestra Biológica
2.3 se procede a realizar la prueba con el REACTIVO DE MOLISCH; un anillo color violeta en la interfase, indica la presencia de carbohidratos.
1.1 se cuenta con una muestra de sangre que se deja en reposo, bajo refrigeración, por una hora
1.2 centrifugación de la muestra y desecho del precipitado para obtener el SUERO SANGUINEO
3er PUNTO Prueba de BENEDICT para azucares reductores 3.1 se rotulan 6 tubos de ensayo y se agregan los reactivos, según las especificaciones:
2do PUNTO Prueba de MOLISCH para reconocimiento de carbohidratos
2.1 se rotulan 6 tubos de ensayo y se agregan los reactivos, según las especificaciones:
3.2 se agregan los carbohidratos y se agita:
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4.3 los 6 tubos con las muestras se ponen en un baño de agua hasta el hervor:
presencia de carbohidrato reductor:
4to PUNTO Prueba de BARFOED para distinguir entre monosacáridos y disacáridos
4.1 se rotulan 6 tubos de ensayo y se agregan los reactivos, según las especificaciones:
*La aparición de un color rojo amarillento en el precipitado indica la presencia de monosacáridos *los disacáridos toman un poco mas de tiempo en formar el mismo precipitado
En todos los casos se registrara el tiempo de la velocidad y el color de la Rx
5to PUNTO Prueba de SELIWANOFF para el reconocimiento de CETOSAS
5.1 se rotulan 5 tubos de ensayo y se agregan los reactivos, según las especificaciones:
4.2 se agregan los carbohidratos y se agita:
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5.2 se agregan los carbohidratos y se agita:
5.3 se trasladan los tubos a un baño de agua en hervor:
6.2 se agrega el reactivo y se agita:
6.3 se trasladan los tubos a un baño de agua en hervor:
*Si al cabo de algunos minutos la s/n se torna de un color rojo intenso, la prueba es POSITIVA y demuestra la presencia de Cetohexosas. *las Aldosas tornaran la s/n de un color rojo sin intensidad y después de un tiempo mayor
*Si al cabo de algunos minutos la s/n se torna de un color azul verdoso, la prueba es POSITIVA y demuestra la presencia de pentosas
6to PUNTO Prueba de BIAL para el reconocimiento de PENTOSAS
7mo PUNTO Prueba de LUGOL para el reconocimiento de POLISACARIDOS
6.1 se rotulan 4 tubos de ensayo y se agregan las soluciones, según las especificaciones:
7.1 se rotulan 5 tubos de ensayo y se agregan las soluciones, según las especificaciones:
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*EL ALMIDÓN debe tornarse de un color azul oscuro. *LA DEXTRINA Y EL GLICOGENO deberán tornarse de un color pardo rojizo. En estos casos la prueba será POSITIVA y demuestra la presencia de polisacáridos.