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Bioquímica proceso 38 (2003) 1747 -/1759 www.elsevier.com/locate/procbio

Composición química y la evaluación nutricional teórico de las fracciones producidas a partir de la hidrólisis enzimática de los marcos de salmón con ProtamexTM Bjørn Liaset *, Kare Julshamn, Marit Espe Instituto de Nutrición, PO Box 185 Sentrum, N-5804 Bergen, Noruega Recibido el 4 de julio de 2002; recibida en 11 en forma de agosto de de 2002 revisado; aceptado 30 de de agosto de de 2002

Resumen Una cantidad de 200 kg de marcos de salmón fresco se hidrolizó enzimáticamente con la mezcla de proteasa comercial ProtamexTM. Se sabe que produce hidrolizados no amargos. Después del procedimiento enzimático, los marcos se separaron por centrifugación en cinco fracciones: una fracción acuosa rica en péptidos, una fracción insoluble, una fracción de emulsión, aceite de salmón y una fracción de hueso. Aproximadamente el 48% de la proteína bruta total presente en los marcos de salmón se encontró en la fracción acuosa, en la que el lípido el contenido se redujo a B / 0.1% en muestras secas después de la filtración con ultramembrana (fracción UF). La fracción de UF fue baja en triptófano, leucina y fenilalanina / tirosina, pero con un alto contenido de taurina. Casi el 19% de la pro teína cruda total presente en el salmón. Se encontraron marcos en la fracción insoluble. Esta fracción fue alta en la mayoría de los aminoácidos indispensables. Aproximadamente el 77% de los lípidos totales presentes en los marcos de salmón se aislaron como aceite de sa lmón, que era alto en ácido eicosapentaénico (EPA) y Ácido docosahexaénico (DHA). La fracción ósea contenía el 62% del total de cenizas presentes en los marcos de salmón y era alta en el minerales Ca, P y Mg y también en los oligoelementos Cu, Fe, I, Mn, Se y Z n. Todas las fracciones producidas fueron bajas en sustancias indeseables como, Cd, Hg y Pb. Para estudios futuros, la fracción de UF y el aceite de salmón pueden ser interesantes para la salud de agentes promotores, la fracción insoluble como suplemento dietético de pro teínas y la fracción ósea como suplemento mineral dietético. # 2002 Elsevier Science Ltd. Todos los derechos reservados.

1. Introducción La industria salmonera ha crecido enormemente.Tanto en Noruega como en todo el mundo durante los últimos años. Gran parte del salmón se vende al cliente como eviscerado, el salmón entero, pero cantidades significativas también se venden como filetes En una típica línea de fileteado automatizado, los filetes contar aproximadamente el 59/63% del peso total húmedo en un salmón con peso corporal de 5/6 kg. Otros productos de la línea de fileteado son marco de salmón (9/15%), cabeza (10/12%) y adornos (1/2%). En Noruega hoy, materias primas de alta calidad de varias especies en su mayoría se utilizan en la producción de productos de bajo valor. tales como harina de pescado y ensilaje de pescado [1]. De una ecológica punto de vista, materias primas tales como marcos de salmón fresco merecen ser incluidos en productos de mayor valor. Los marcos de salmón constan de tres fracciones principales, Proteínas, lípidos y huesos que cada uno podría ser utilizado para diferentes aplicaciones. Desde un punto de vista nutricional, la proteína muscular del salmón tiene un amino bien equilibrado. Composición ácida, alta en la mayoría de lo indispensable. Aminoácidos [2]. El aceite de salmón es rico en ácidos grasos poliinsaturados, como los eicosapentaénicos. ácido (EPA) y ácido docosahexaénico (DHA) [3]. Los fracción de hueso podría ser un buen proveedor de dietética minerales Recientemente, tras el descubrimiento de bovinos. Encefalopatía espongiforme (EEB) y transmisible encefalopatías espongiformes (EET), hay un proceso continuo discusión sobre el uso de hidrolizados de proteínas y harina de huesos de animales terrestres de granja [4/6]. Estas incidencias deben hacer que la utilización de huesos y péptidos de origen marino sea interesante en la sustitución de los recursos antes mencionados. Obviamente esto exige un tratamiento adecuado de los marcos de salmón fresco. A través del tratamiento enzimático, los marcos de salmón pueden ser separado en una fracción acuosa rica en soluble nitrógeno (llamado hidrolizado de proteína de pescado, FPH), una fracción de nitrógeno insoluble, una fracción de emulsión, aceite de salmón y una fracción ósea rica en proteínas y minerales (Figura 1). El proceso de hidrolización enzimática es altamente Controlable, y dependiendo de las condiciones de hidrolización, los productos son reproducibles y están bien definidos. En un trabajo previo, nos centramos en la recuperación de nitrógeno en a fracción acuosa de la hidrólisis del salmón.

Marcos con ProtamexTM en diferentes condiciones de hidrólisis [7]. Los hidrolizados de proteínas de pescado pueden ser muy amargos, pero esta amargura se puede evitar controlando el grado de hidrólisis y minimiza la cantidad de amargo. Degustación de péptidos producidos durante el tratamiento enzimático. [8,9]. Para producir hidrolizados de proteínas de pescado de alta La palatabilidad, se debe tener cuidado en la elección de la enzima usado. Por lo tanto, la mezcla de proteasa comercial ProtamexTM, conocida por producir hidrolizados no amargos, tiene a sido elegido en el presente experimento. El objetivo de este estudio fue documentar la química Composición de las fracciones producidas después de enzimática. Hidrólisis de marcos de salmón fresco con ProtamexTM y para señalar la posible utilización de estos, como una línea de fondo Conocimientos para estudios posteriores. 2. Material y métodos. 2.1. Materia prima Cuadros sin cabezas del Atlántico recién fileteado. salmón (Salmo salar, L.) fueron tomados directamente de la Línea de producción y congelado a / 209/2 8C. Dentro de un semana, se utilizaron los cuadros congelados en la enzima. Proceso de hidrolización. Rolf Olsen Skarholmen AS (Askøy, Noruega) suministró amablemente los marcos de salmón. 2.2. Enzima ProtamexTM (E.C. 3.4.21.62/ 3.4.24.28) es un Bacillus complejo de proteasa de Novozymes A / S (Bagsvaerd, Dinamarca), desarrollado para la hidrólisis de proteínas alimentarias. y cumple con las exigencias de pureza de las enzimas de grado alimenticio, establecido por el Comité Mixto FAO / OMS de Expertos en Alimentación Aditivos (JEFTA) y el Codex de Productos Químicos para Alimentos (FCC). Las condiciones de trabajo óptimas para ProtamexTM. se informa que están a pH 5.5 / 7.5 a una temperatura de 35 / 60 8C. ProtamexTM tiene una actividad declarada de 1.5. Unidades Anson (AU) g1 . Su temperatura de desactivación es de se informa que es 85 8C durante 10 min [10].

Higo. 1. Ilustración de la materia prima y las fracciones producidas a partir de la hidrólisis de los marcos de salmón con ProtamexTM.

de salmón

n de emulsión

n acuosa

ón insoluble

B. Liaset et al. / Process Biochemistry 38 (2003) 1747-/1759

1749

200 kg de salmon fresco + 175kg agua + 0.24kg PromatexTM

Hidrólisis enzimática, calentamiento y separación.

malla

Hidrólisis enzimática con pH inicial de 6.5 a 55º durante 60 minutos. Elevar la temperatura a 98ºC para desnaturalizar Promatex y la separación formal de los lípidos de la fracción acuosa. Hidrólisis enzimática con pH inicial de 6.5 a 55º durante 60 minutos. Elevar la temperatura a 98ºC para desnaturalizar hueso Aire seco Promatex y la separación formal de los lípidos de las fracción acuosa.

Temperatura 90ºC

2 Fase de separación

Fracción insoluble

Temperatura 90ºC 3 Fases de separación (8520 RPM)

Aceite de salmón Fracción de emulsión.

Fracción acuosa

Ultrafiltracion (100 KDa molecular

límite de corte de peso) Higo. 2. Esquema de flujo del proceso de hidrólisis de los marcos de salmón con ProtamexTM.

Ultramembrana fracción de filtrado (UF fracción)

Secado por pulverizació n

1750 Tabla 1 Masa equilibrar desde hidrólisis de 200 kg Fresco salmón marcos con ProtamexTM

marcos de salmón fractiona acuosa fracción insoluble El aceite de salmón fracción Bone fracción Emulsión Recuperación (%) una

Peso mojado

Peso en seco

Proteína cruda

Ceniza

Los lípidos totales

200,0 245,0 43.0 25.0 8.8 -

90.3 18.7 7.9 38.7 10.4 1.7 85.5

32.4 15.5 6.1 3.4 0.9 80.1

8.6 1.9 0.3 5.3 0.1 88.6

50.0 0.3 1.4 38.7 1.0 0.8 84.5

Rendimiento midió en el sobrenadante antes de la filtración.

1752 Tabla 2 proximal químico composiciones y total aminado ácidos en la fracciones adquirido desde la hidrólisis de salmón marcos con ProtamexTM ComponentBone Seco importar (sol KG-1)

fractionInsoluble fractionEmulsion 41591

184.390.8

fractionAqueous 194.390.1

fractionUF

fracción

76.490.4

n/A

composición química proximal (g kg -1 muestra seca) Proteína 3309/0.2 Los lípidos 969/1 Ceniza 514,19/0.5

7749/1 180.09/0.7 37.09/0.1

51691 490920 33.090.1

8299/1 169/1 102.59/0.7

855,39/0.8 nda 1229/2

Los aminoácidos (mmol g-1 proteína) Arg Su Ile Leu Lys Reunió Phe Thr Trp Val AA indispensable total (IAA)

0,399/0.02 0,129/0.01 0,149/0.01 0,269/0.01 0,249/0.01 0,179/0.01 0,189/0.01 0,279/0.02 0,019/0.01 0,229/0.01 2.00

0,399/0.01 0,179/0.01 0,369/0.01 0,639/0.01 0,559/0.01 0,179/0.01 0,299/0.01 0,449/0.01 0,079/0.01 0,469/0.01 3.53

0.3990.01 0.2290.02 0.3390.01 0.5990.01 0.5390.01 0.1590.01 0.2690.01 0.4290.01 0.0690.01 0.4390.01 3.38

0,399/0.01 0,259/0.01 0,229/0.01 0,449/0.01 0,479/0.01 0,139/0.01 0,189/0.01 0,349/0.01 0,029/0.01 0,309/0.01 2.74

0,379/0.01 0,299/0.01 0,259/0.01 0,459/0.01 0,469/0.03 0,119/0.01 0,189/0.01 0,349/0.02 0,039/0.01 0,319/0.01 2.79

Ala Asn ‡/Áspid Cisteína (total) gln ‡/Glu Gly OH-/Pro Pro Ser Tyr AA dispensable total (DAA) Relación de IAA: DAA

0,819/0.05 0,449/0.02 0,039/0.01 0,669/0.03 2.69/0.2 0,509/0.03 0,819/0.05 0,439/0.03 0,119/0.01 6.39 0.31

0,719/0.01 0,749/0.01 0,119/0.01 0,839/0.01 0,849/0.01 0,069/0.01 0,379/0.01 0,419/0.01 0,239/0.01 4.30 0.82

0.7590.01 0.7390.01 0.0990.01 0.7990.01 0.9890.01 0.0990.01 0.4090.01 0.4390.01 0.2090.01 4.46 0,76

0,889/0.01 0,619/0.02 0,059/0.01 0,869/0.02 1,459/0.01 0,219/0.01 0,509/0.01 0,409/0.01 0,139/0.01 5.09 0.54

0,919/0.01 0,619/0.01 0,059/0.01 0,849/0.01 1,269/0.02 0,179/0.01 0,459/0.01 0,409/0.01 0,149/0.01 4.83 0.58

Tau AA total incluyendo Tau

Dakota del Norte 0,029/0.01 8.39 7.84

0.0390.01 7.87

0,059/0.01 7.88

0,069/0.01 7.68

Abreviatura: no detectado, Dakota del Norte Datos son dado como mean9/desviación desde la media (duplicar análisis). una Límite de detección ajustado a 1,0 g de lípidos muestra kg-1.

B. Liaset et al. / Process Biochemistry 38 (2003) 1747-/1759

1753

Tabla 3 Gratis aminado ácidos y nitrógeno molecular peso distribución en la fracciones producido desde la hidrólisis de salmón marcos con ProtamexTM aminoácidos (mmol g-1 proteína) Insoluble b-alanina b-aminoisobutírico ácido ácido g-amino-butírico alanina Amoníaco Anserina (b-alanil-1-metil-histidina) arginina asparagina aspartato cistina cistationina Glutamato glutamina glicina histidina isoleucina leucina lisina histidina 1-Metil histidina 3-Metil

metionina ornitina OH-/prolina fenilalanina Phosphoetanolamine fosfoserina prolina Sarcosine (N -metil glicina) serina La taurina treonina triptófano tirosina Urea valina Total de aminoácidos libres Monto libre al total de aminoácidos (%) a fracción de peso molecular B10 000 Da (%) fracción de peso molecular B5000 Da (%)

fractionEmulsion 7.890.2 1.090.1 0.390.1 14.09/0.3 26.99/0.6 44.29/0.6 2.59/0.1 0.89/0.1 1.99/0.1 0.49/0.1 1.59/0.1 8.89/0.2 1.09/0.1 7.09/0.1 2.99/0.1 3.59/0.2 13.29/0.4 6.89/0.1 8.59/0.2 Dak ota del Nor te 4.29/0.2 0.49/0.1 0.69/0.1 5.59/0.3 0.79/0.1 0.39/0.1 1.79/0.1 3.59/0.1 3.690.1 15.59/0.2 3.39/0.1 1.29/0.1 2.59/0.1 2.69/0.1 3.79/0.1 202.3 2.6 n/a n/a

fractionAqueous 10.590.3 1.090.1 0.390.1 18.79/0.1 37.69/0.1 56.09/0.1 3.49/0.1 1.39/0.1 2.49/0.1 0.59/0.1 1.99/0.1 11.69/0.1 1.09/0.1 9.49/0.1 3.79/0.1 4.89/0.3 17.59/0.4 8.99/0.1 11.09/0.2 Dakota del Norte

4.69/0.1 0.59/0.1 0.79/0.1 7.49/0.2 0.89/0.1 0.39/0.1 2.69/0.1 4.59/0.6 4.990.1 20.69/0.1 4.99/0.1 1.79/0.1 3.49/0.1 2.59/0.1 5.09/0.1 265,9 3.4 n/A n/A

fractionUF 21.890.5 1.990.1 0.890.1 39.89/0.1 72.19/0.2 115,09/1.0 6.89/0.1 2.79/0.2 5.59/0.1 1.19/0.1 4.29/0.1 25.59/0.4 1.99/0.1 20.29/0.1 7.89/0.1 9.89/0.1 36.69/0.2 18.39/0.1 22.69/0.1 Dak ota del Nor te 11.69/0.1 1.09/0.1 1.89/0.1 15.59/0.1 1.99/0.1 0.99/0.1 4.89/0.1 9.49/0.1 10.790.1 43.49/0.2 9.59/0.1 3.49/0.2 6.89/0.1 7.09/0.2 10,69/0.1 552,7 7.0 n/ A n/ A

fracción 23.390.1 1.990.1 0.890.1 42.29/0.1 45.09/0.1 1169/2.0 6.39/0.1 3.89/0.1 6.09/0.1 1.19/0.2 4.39/0.1 27.79/0.1 2.09/0.1 22.29/0.1 7.99/0.1 9.89/0.1 36.89/0.1 18.59/0.1 22.99/0.1 Dakota del Norte

12.09/0.1 0.99/0.1 1.89/0.1 15.59/0.2 1.89/0.1 0.99/0.1 5.19/0.2 10.39/0.1 11.090.1 37.59/0.1 10.19/0.1 3.49/0.1 6.79/0.1 7.49/0.1 13.09/0.1 535,9 7.0 100 9 1segundo 89 9 1 segundo

abreviaturas: no analizado, n / A; no detectado, Dakota del Norte Datos son dado como mean9/desviación desde la media (duplicar análisis). aminoácidos totales de Tabla 2. segundo Mean9/SEM (norte =6). una

Tabla 4 Total aminoácidos en las fracciones insolubles y UF de la hidrólisis de los marcos de salmón con ProtamexTM, comercial disponible aislado de proteína de soja y caseína de sodio bovino Componente Los aminoácidos (g Arg Su ile Leu

fracción insoluble

fracción UF

6 6.99/0.8 2 6.69/0.3 4 7.49/0.1 8 2.19/0.2

59.490.7 3991 27.590.4 56.490.1

Soya isolateb proteína

saltc sodio caseína

kg-1 proteína cruda) 72.99/0.3 20.19/0.9 42.99/0.4 78.19/0.5

38.69/0.4 25.09/0.9 49.99/0.4 95.19/0.1

Lys1754 Reunió Phe Thr Trp Val Ala Asn ‡/Áspid Cisteína (total) gln ‡/Glu Gly OH-/Pro Pro Ser Tyr Tau

7 9.99/0.5 259/1 48.19/0.1 52.09/0.1 13.79/0.1 54.09/0.6 62.79/0.1 94.19/0.5 12.99/0.5 1239/1 63.39/0.1 8.29/0.3 42.99/0.1 43.490.2 41.09/0.3 2 .49/0.1

63.790.3 2291 26.990.7 3991 5.390.1 35.590.4 7491 7393 6.190.7 11695 8993 20.790.7 4791 3792 2192 6.290.1

57.99/0.8 12.09/0.3 47.79/0.5 38.29/0.4 12.59/0.1 45.29/0.5 39.89/0.1 106.09/2 15.09/1 178,09/1 37.89/0.8 Dakota del Norte 47.79/0.1 49.590.5 32.79/0.6 Dakota del Norte

77.69/0.1 26.79/0.300 50.99/0.1 45.79/0.7 11.39/0.1 6 5.79/0.1 30.39/0.1 68.39/0.3 2.39/0.1 218.09/0.8 18.09/0.1 Dakota del Norte 107.09/0.4 57.690.3 5 59/1 Dakota del Norte

Abreviatura: no detectado, Dakota del Norte Datos son dado como mean9/desviación desde la media (duplicar análisis). una Liaset et al., Los datos en preparación. segundo Supro 530 EX (Dupont Protein Technologies, St. Louis, MO). do sal de sodio caseína de la leche bovina, C-8654 (Sigma-/Aldrich, Noruega).

B. Liaset et al. / Process Biochemistry 38 (2003) 1747-/1759

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Tabla 5 lípidos y graso ácido composición en fracciones desde la hidrólisis de salmón marcos con ProtamexTM ComponentInsoluble

fractionEmulsion

fractionAqueous

fractionSalmon

petróleo

Lípidos (g kg-1 de la muestra seca)

180.090.7

490920

1691

n/A

Total de lípidos (g 100 g-1) ordenador personal

13.69/0.1

10,09/0.1

14.69/0.5

EDUCACIÓN FÍSICA

6.69/0.1

4.59/0.1

6.69/0.1

Pi

1.29/0.1

1.09/0.1

1.09/0.1

PD

1.29/0.1

0.79/0.2

0.49/0.1

esfingomielina

1.69/0.1

1.19/0.1

2.19/0.2

ácido Phospatidic / cardiolipina

0.89/0.1

0.59/0.1

0.99/0.1

liso

0.59/0.1

0.39/0.1

0.49/0.1

Colesterol Los ácidos grasos libres triacilglicerol

4.39/0.1 1.49/0.1 68.89/0.3

4.29/0.1 1.09/0.1 76.79/0.2

4.89/0.2 1.39/0.3 67.99/0.1

Dakota del Norte Dakota del Norte Dakota del Norte Dakota del Norte Dakota del Norte Dakota del Norte Dakota del Norte 2.69/0.1 0.99/0.2 96.59/0.2

5.99/0.1 0.49/0.1 15.99/0.1 0.79/0.1 3.19/0.1 Dakota del Norte

5.09/0.1 Dakota del Norte 16.79/0.1 Dakota del Norte 3.79/0.1 Dakota del Norte

26.0 0.69/0.1 0.29/0.1 3.89/0.1 4.6 0.29/0.1

25.4 0.99/0.1 0.49/0.1 3.89/0.1 5.1 0.29/0.1

0.39/0.1 13.09/0.1 3.690.1 0.59/0.1 Dakota del Norte

0.49/0.1 13.09/0.1 3.890.1 0.39/0.1 0.89/0.1

5.59/0.1 0.49/0.1 15.39/0.1 0.39/0.1 3.19/0.1 Dakota del Norte 24.6 0.69/0.1 0.59/0.1 5.49/0.1 6.5 Dakota del Norte 0.49/0.1 14.39/0.1 4.790.1 0.59/0.1 0.99/0.1

17.6 6.39/0.1 2.99/0.1 0.29/0.1 9.4 3.59/0.1 0.39/0.1 0.49/0.1 1.09/0.1 5.2 0.39/0.1 0.39/0.1 1.09/0.1 0.69/0.1 1.69/0.1 10.29/0.1 3.79/0.1 13.89/0.1 31.5

18.5 5.99/0.1 3.09/0.1 0.39/0.1 9.2 3.29/0.1 0.39/0.1 0.29/0.1 1.19/0.1 4.8 0.49/0.1 0.69/0.1 0.99/0.1 1.49/0.1 1.49/0.1 9.09/0.1 3.79/0.1 14.29/0.1 31.6

20.8 6.39/0.1 2.99/0.1 0.39/0.1 9.5 3.89/0.1 0.49/0.1 0.29/0.1 0.69/0.1 5.0 0.49/0.1 0.69/0.1 1.19/0.1 1.79/0.1 1.69/0.1 9.39/0.1 4.09/0.1 11.39/0.1 30.0

Composición de ácidos grasos (g 100 g -1) 14: 0 5.29/0.1 15: 0 0.49/0.1 16: 0 16.99/0.1 17: 0 0.89/0.1 18: 0 3.49/0.1 20: 0 Dakota del Norte monto saturado 26.7 18: 1 n-/11 0.69/0.1 20: 1 n-/11 0.39/0.1 22: 1 n-/11 3.99/0.1 ascenderá n-/11 4.8 14: 1 n-/9 Dakota del Norte 16: 1 n-/9 0.39/0.1 18: 1 n-/9 13.69/0.1 20: 1 n-/9 3.490.1 22: 1 n-9 0.39/0.1 24: 1 n-9 Dakota del Norte Monto n-9 17.6 16: 1 n-/7 5.69/0.1 18: 1 n-/7 2.99/0.1 20: 1 n-/7 0.29/0.1 ascenderá n-/7 8.7 18: 2 n-/6 3.59/0.1 20: 2 n-/6 0.39/0.1 20: 3 n-/6 0.29/0.1 20: 4 n-/6 0.99/0.1 ascenderá n-/6 4.9 16: 3 n-/3 0.49/0.1 16: 4 n-/3 0.59/0.1 18: 3 n-/3 1.09/0.1 18: 4 n-/3 1.59/0.1 20: 4 n-/3 1.59/0.1 20: 5 n-/3 10,59/0.2 22: 5 n-/3 3.89/0.1 22: 6 n-/3 15.79/0.1 ascenderá n-/3 34.9

Componente (g kg-1 de la muestra seca) fracción Bone Ceniza minerales California K

fracción insoluble

fracción Emulsión

fracción acuosa

fracción UF

514,19/0.5

37.09/0.1

33.09/0.1

102.59/0.7

1229/2

167,09/3 0,479/0.01

1,799/0.01 6.249/0.05

0,739/0.01 5,899/0.06

1.119/0.01 22.09/0.2

1,519/0.01 26.59/0.4

mg1756 N/A PAG Los minerales traza (mg kg-1 muestra seca) Esencial Cu Fe yo Minnesota SE Zn No esencial Como Discos compactos Hg Pb [1]

3,589/0.02 4.59/0.3 105.09/3

0,769/0.01 5,999/0.01 5.89/0.5

0,629/0.01 5.69/0.01 79/1

1.819/0.02 17.79/0.8 7.09/0.5

2,149/0.01 23.49/0.4 8.49/0.9

4.459/0.07 22.39/0.1 0,249/0.01 50.39/0.4 0,759/0.05 1779/2

1,859/0.07 34.29/0.5 0,659/0.01 nda 0,859/0.07 1339/2

1.509/0.01 28.79/0.3 0,939/0.02 nda 0,559/0.07 749/2

1.159/0.07 119/1 0,849/0.02 nda 0,759/0.07 17.059/0.07

1,359/0.07 9.19/0.7 1,099/0.07 nda 0.99/0.1 23.29/0.9

2.29/0.4 NDB NDC DDN

1.909/0.01 0.0069/0,001 0.0990.01 DDN

2.19/0.1 0,0089/0,001 0.0790.01 0,409/0.01

1.69/0.2 0,0099/0,001 0.0590.01 0,139/0.01

1.69/0.3 0,0119/0,001 0.0690.01 0,259/0.07