GUÍA MICROBIOLOGÍA SISTEMA NERVIOSO
MENINGITIS BACTERIANA Proceso inflamatorio causado por una infección de piamadre, aracnoides vascular, LCR, ventrículos cerebrales, plexo coroideo, etc. Los principales agentes causales de la meningitis bacteriana son: 1. Haemophylus influenzae tipo B 40-60% niños 1-3% adultos 2. Neisseria meningitidis 10-30% adultos 25-40% niños (hasta 15 años) 3. Streptococcus pnumoniae 30-50% adultos 10-20% niños 5% lactantes Sx meníngeo -cefalalgias - nauseas - vómito - signos meníngeos - alteración a nivel de la conciencia o de funciones motoras MENINGITIS Malestar general severo + fiebre + cefalea frontal o retroorbitaria + vomito en proyectil + signos de Kerning y Brudzinski + crisis convulsivas
Signos cardinales
RECOLECCION DE LCR 1. Tubo no. 1 2-4 ml una parte para sembrarla en medios de cultivo y la otra procesada para demostración directa de patógenos. 2. Tubo no. 2 3-4 ml determinación recuento celular diferencial, glucosa y proteínas. Recuentos dentro de los 30 min de extracción ya que con el tiempo se lisan las células alterando el número y morfología de leucocitos.
ANÁLISIS DEL LCF
DEMOSTRACIÓN DIRECTA DE PATÓGENOS a) Examen microscópico Sedimento Tinción Gram Tinciones acidorresistentes Preparación tinta china Campo oscuro Frotis fresco b) Medios Agar chocolate Agar sangre McConkey Agar EMB Otras técnicas para demostración de meningitis bacteria - Fijación de complemento - Hemaglutinación indirecta - Aglutinación en látex - Coaglutinación
MENINGITIS VIRAL Se caracteriza por pleocitosis mononuclear (linfocitaria) en LCR, glucosa normal, elevación moderada de las proteínas. Etiología Enterovirus
Coxsackie virus A y B ECHO virus
Parotiditis Virus herpes simple tipo II Virus de la coriomeningitis linfocitaria Adenovirus LCR En sangre periférica: leucocitosis o leucopenia. Amilasa sérica aumentada en parotiditis Pleocitosis 25-500 céls x mm3 Puede haber también: Moderada disminución de glucosa Nivel de glucosa baja al 60% de la glucemia o la glucosa normal con aumento de número de linfocitos. Pruebas a parte de la toma de LCR: Pruebas de neutralización Fijación de complemento DIFERENCIAS ENTRE EL LCR DE UNA MENINGITIS BACTERIA Y UNA VIRAL CRITERIOS ASPECTO GLUCOSA PROTEÍNAS RECUENTO CELULAR
MENINGITIS BACTERIANA Opalescente Menos de 20-40 mg/dl 100-500 mg/dl 1000-10,000 céls/mm3 (86%PMN)
MENINGITIS VIRAL N ó 20-40 mg/dl 50-100 mg/dl 10 a 1000 céls/mm3 (34%PMN)
DX DE NEUROCISTICERCOSIS Es la infección de los órganos y tejidos nervioso por las larvas quísticas de la Taenia solium o cisticercos, en la cual el paciente se comporta en forma similar al hospedero intermediario porcino, al ingerir los huevos infectantes del parásito provenientes de otro individuo portador de una T. solium en el intestino. Morfología Cysticercus cellulosae es una vesícula ovoide, de color blanquecino, mide de 5 a 10 ó 5-15 mm de largo está constituido por una membrana de grosor uniforme que se invagina y continúa con el escólex, que presenta cuatro ventosas y un rostelo con doble corona de ganchos. La vesícula está llena de líquido rosado denominado fluido vesicular constituido por abundantes proteínas, carbohidratos y lípidos. Cysticercus racemosus. Es mucho más grande, llega a medir hasta 90 mm de diámetro, presenta varias lobulaciones, su membrana es irregular ya que presenta delgazamientos y engrosamiento llamadas excrecencias, su capa basal contiene vellosidades. No presenta escólex y generalmente se encuentra en cavidades ventriculares o en la base del cerebro. CICLO BIOLÓGICO Ingesta huevos (T.solium) T.D. Duodeno jugos gástricos y enzimas desintegran el embrioforo 24/72 hrs libera el embrión hexacanto u oncosfera granchos y la acción de enzimas proteolíticas penetra la mucosa intestinal vasos mesentéricos sangre cualquier órgano o tejido (SNC, ojo, musculo-esquelético, hígado, corazón, pulmones, etc). DATOS CLINICOS DE SOSPECHA Crisis convulsivas parciales o generalizadas Trastornos de la esfera mental, mov involuntarios o déficit motor y cefalea crónica Sx de hipertensión endocraneal Irritación vestibular (mareo y vértigo) Síndrome de Bruns Afeccion de nervios craneales. PRUEBAS DE LABORATORIO Fij de complemento Inmunoelectroforesis Doble inmunodifusion Hemaglutinación Inmunofluorescencia ELISA, etc.
CULTIVO E IDENTIFICACION DE CLOSTRIDIUM Bacilos Gram + Motilidad por flagelos perítricos Anaerobios Esporulados C. tetani Bacilos Gram + 4 micras de longitud por 1 micra de diametro Motilidad por flagelos perítricos Anaerobios Esporulado: espora terminal en palillo de tambor No capsulado Hemólisis α y β (agar sangre/equino) No invasivo Produce dos toxinas la tetanospasmina y la tetanolisina y la primera produce el TÉTANOS. PATOGENIA La germinación de esporas y el desarrollo de microorganismos vegetativos productores de toxina se favorecen por: Tejido necrosado, Sales de calcio y por infecciones piógenas acompañantes, todo esto ayuda a establecer un potencial de óxido-reducción bajo. La toxina liberada por las células vegetativas puede alcanzar el sistema nervioso central mediante transporte axonal retrógrado o por la corriente sanguínea. En el sistema nervioso central la toxina se fija con rapidez a los gangliósidos en la médula espinal y en el tallo cerebral y ejerce las acciones descritas antes (hiperreflexia y espasmo muscular). MEDIOS Y PRUEBAS BIOQUÍMICAS Agar sangre Medio con tioglicolato Leche tornasolada Agar yema de huevo
Leche tornasolada Fundamento Medio diferencial Diferenciar organismos sobre la base de sus Para determinar funciones metabólicas: múltiples reacciones metabólicas en un medio Fermentación de lactosa lácteo. Caseólisis Coagulación de la caseína.
Fermentación de lactosa Tornasol indicador de pH Rojo en condición ácida (4.5): Cuando un organismo es capaz de fermentar la lactosa produce ácido láctico. Azul en condición alcalina (8.3): Cuando ciertas bacterias forman álcalis no fermentan la lactosa, pero actúan sobre la substancias nitrogenadas que se encuentran en la leche liberando amoniaco y dan un pH alcalino. Azul purpureo sin inocular (6.8) Lactosa ----------------- glucosa + galactosa Glucosa ---------------- ácido pirúvico
Ácido láctico Ácido butírico CO2 + H2
FORMACION DE COAGULO La enzima responsable de la formación de un coagulo es la renina. La formación de coagulo en la leche tornasolada es causada por: Precipitación de la caseína por la formación de ácidos o Conversión de la caseína en paracaseína por la enzima renina. COAGULO ÁCIDO La precipitación de la caseína (por ácidos orgánicos a partir de lactosa) provoca un coagulo firme, gelatinoso y es fácilmente disuelto cuando es sometido a condiciones alcalinas Lactosa ácido láctico Ácido láctico + Caseinato de Ca (medio ácido) (sal soluble)
+
caseasa
Caseinógeno (insoluble)
Un coagulo se forma por el pH FORMACION DE UN COAGULO (se da por reacción enzimática) Conversión de la caseína en paracaseína por la enzima renina, pepsina o quimotripsina. La caseína provoca el cuajado de la leche convirtiendo la sal de caseína soluble en paracaseína insoluble que es el cuajo. FORMACION DE GAS Los gases (CO2 Y H2) se forman como resultado de la fermentación de la lactosa
RESULTADOS ÁCIDO Color rojo rosado Fermentación de la lactosa
ALCALINO Color azul No hay fermentación de lactosa. Metabolismo de substancias nitrogenadas.
SIN CAMBIOS BLANCO GAS Color azul Reducción de Burbujas en el purpureo. tornasol a una medio. No hay leucobase. El coagulo puede fermentación de desintegrarse. lactosa. No cambio en el indicador pH.
REACION DE NAGLER El agar yema de huevo nos permite determinar la reacción de lecitinasa-lipasa o conocido como reacción de Nagler. La lecito-vitelina (LV) es el componente lipoproteíco de la yema de huevo. PRODUCCION DE LECITINASA La LV se vuelve opalescente cuando se mezcla con ciertas toxinas bacterianas o lecitinasas, pudiendo ocurrir una floculación y aparición de una capa gruesa de grasa.
PRODUCCION DE LIPASA Los microorganismo lipolíticos también producen una opalescencia en el agar con LV; se observa como una zona de iridiscencia “aperlada” sobre y alrededor de las colonias