Determinacion De Antocianina Y Clorofila

  • July 2020
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DETERMINACION DE ANTOCIANINA OBJETIVO.Determinar la concentración del pigmento antocianina en una fruta de color rojo (ciruela o manzana), mediante el espectrofotómetro. MATERIALES.Probeta de 100ml Matraz Erlenmeyer de 250ml Vaso de 250ml Tubos de ensayo Spectronic – 20 Papel filtro Embudo Mortero Matraz aforado de 100 ml REACTIVOS.Solución extractora de antocianinas.- 5 partes de metanol por una de HCL 3 N Na2SO4 anhidro HCL 3 N CHOH al 80-85% HCL 0.5 N H2O2 al 30% PROCEDIMIENTO.1.- Pesar 5grs. de manzana finamente picada en un vasote 250ml, agregarle 25ml de solución extractora de antocianinas y dejar reposar por 24 horas en la oscuridad. 2.- Separar la solución y depositarla en un matraz Erlenmeyer de 250ml y la pulpa en un mortero y lavar 2 o 3 veces con más solución extractora, hasta que la muestra quede sin pigmento. 3.- Filtrar la solución con antocianina, usando sulfato de sodio en papel filtro, para eliminar humedad y aforar a 100ml con la solución extractora. 4.- Tomar 2 tubos de ensayo. Al primero agregarle 6ml de solución extractora, 6ml de HCL en metanol (una parte de HCL 0.5N y una parte de metanol al 80-85%) y 3ml de agua oxigenada al 30%.

5.- Leer a 525nm en un espectrofotómetro, usando como blanco el segundo tubo de ensayo el cual contiene 6ml de solución extractora, 6ml de HCL en metanol y 3ml de H2O2.

CALCULOS.-

MGS DE ANTOCIANINAS

= 50 x lectura absorbancia a 535 nm 0.45 x muestra en grs

= 50 x --------0.45 x 5 =

¿---?---2.25

= ??????

CUESTIONARIO.- (antocianinas) 1.- Explica que son las antocianinas

2.- Escribe las formulas químicas de los compuestos que integran las antocianinas

3.- ¿Qué clase de frutas presentan mayor concentración de antocianinas?

CUESTIONARIO.- (clorofila) 1.- Explica los tipos de clorofila que existen

2.- Desarrolla la formula de la clorofila

3.- ¿Qué clase de vegetales tienen mas clorofila?

CUESTIONARIO.- (taninos) 1.- ¿Qué son los taninos?

2.- Escribe algunas características del ácido tánico

3.- ¿Qué otras funciones contiene el ácido tánico

DETERMINACION DE CLOROFILA OBJETIVO.Determinar la concentración de clorofila total, clorofila”a” y “b” de muestras vegetales verdes (espinacas, acelgas, etc.), mediante lecturas de absorbancia en el espectrofotómetro. MATERIALES.Probeta de 100ml Papel filtro Vaso de 250ml Mortero Pipeta de 10ml Matraz aforado de 100ml Embudo Espectrofotómetro *Hojas de tamarindo* REACTIVOS.Acetona al 85% Na2SO4 anhidro PROCEDIMIENTO.1.- Pesar 5grs de muestra de hojas verdes, pasar a un mortero y agregar acetona al 85% hasta cubrir las hojas. 2.- Triturar las hojas con cuidado y reposar por 24 horas. 3.- Filtrar el líquido a través de papel filtro con una capa de sulfato de sodio anhidro, recogiendo el filtrado en un matraz aforado de 100ml. 4.- Lavar la muestra con más acetona, hasta que quede sin color verde. Al final aforar a 100 con acetona y tomar la lectura en el espectrofotómetro a una longitud de onda de 660 y 642.5 nm usando como blanco acetona.

CALCULOS.CLOROFILA TOTAL EN MG GR = 7.12 x Lec. Abs. a 660 + 16.8 x Lec a 642.5 10 x muestra en grs.

= 7.12 x 1.751 + 16.8 x .531 10 x 5grs

(lectura1)

= 12.46712 + 8.9208 50

= 21.38792 50

= 0.4277584

CLOROFILA TOTAL EN MG GR = 7.12 x 1.877 + 16.8 x .207 (lectura 2) 10 x 5grs

= 13.36424 + 3.4776 50

= 16.84184 50

= 0.3368368

CLOROFILA “a” = 9.93 x Lec abs a 660 – 0.777 x Lec abs 642.5 10 x muestra en grs.

= 9.93 x 1.751 – 0.777 x .531 10 x 5

(lectura 1)

= 17.38743 – 0.412587 50

= 16.974843 50

= 0.33949686

CLOROFILA “a” = 9.93 x 1.877 – 0.777 x .207 10 x 5

= 18.63861 – 0.160839 50

= 18.477771 50

= 0.36955542

(lectura 2)

DETERMINACION DE GLUTEN OBJETIVO.Determinar el porcentaje total de gluten en la harina eliminando las impurezas. MATERIALES.Vaso de precipitados de 250 Bascula PROCEDIMIENTO.1.- Pesar 20grs de harina y añadirle agua hasta formar una “bola”. 2.- Dejar reposar en un vaso de precipitados durante media hora y cubrirla con H2O. 3.- Retirarla y lavar en la llave hasta eliminar impurezas. 4.- Comprimir lo más posible hasta eliminar el H2O presente. 5.- Calcular el porcentaje de gluten.

CALCULOS.PESO INICIAL: 20 GRS. PESO FINAL: 6GRS.

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