Cruz Valencia Edwin Alexis, Zempoaltecatl Rodríguez Alejandra Grupo 4QM2
Sección 4
Curva Tipo de Azúcares Reductores 𝑥=
Objetivos
Conocer la manera de operar un espectrofotómetro. Realizar una curva de calibración a partir de los valores de absorbancia.
0.1 𝑚𝐿 𝑥 0.010 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 1000 𝑚𝐿
𝑥 = 0.000001𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑥
0.000001 µ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 1𝑚𝑜𝑙
𝑥 = 1 µ𝑚𝑜𝑙/2𝑚𝐿 Reacción
Introducción Las enzimas son proteínas especializadas en la catálisis de las reacciones metabólicas en los organismos, la eficiencia se observa en el aumento de la velocidad de reacción que estas proporcionan, son altamente específicas, ya que cada una de ellas induce la transformación de un sólo tipo de sustancia. La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas. Esta depende de:
La concentración de moléculas de sustrato La temperatura La presencia de inhibidores pH del medio, que afecta a la conformación (estructura espacial) de la molécula enzimática.
Los azúcares reductores son aquellos que poseen un grupo carbonilo intacto y este puede reaccionar como reductor con otras moléculas. Las curvas tipo son una representación gráfica que mide en función de la concentración de un analito con respecto a la absorbancia. Resultados Tabla 1. Resultados de Absorbencia. Tubos
Absorbancia
T(Testigo) 1 2 3 4 5
0 0.094 0.169 0.229 0.556 0.614
Azúcar reductor (µmoles)/2.0 ml 0 1 2 4 8 10
Cálculos Glucosa [0.005 M] + Fructosa [0.005 M]=0.010 M
Discusión En el procedimiento de obtención de los valores de absorbancia para realizar la curva tipo de azúcares reductores se comparó una propiedad del analito, en nuestro caso fue una propiedad otorgada por el 3,5 – DNS, intensidad de color, con la de estándares de concentración conocida del mismo analito (o de algún otro con propiedades muy similares a éste). La etapa de calibración analítica se realizó mediante un modelo de línea recta que consiste en encontrar la recta de calibrado que mejor ajuste a una serie de “n” puntos experimentales, donde cada punto se encuentra definido por una variable “x” (variable independiente, generalmente concentración del analito de interés) y una variable “y” (variable dependiente, generalmente respuesta instrumental). La recta de calibrado se encuentra definida por una ordenada al origen (b) y una pendiente (m), mediante la ecuación y = mx + b.
El valor de la pendiente fue igual a 0.062 mientras que el valor de la ordenada al origen fue de 0.0187. Conclusiones
Bibliografía 1. Bionova, (2014), Tema 14: Enzimas, Sitio web: http://www.bionova.org.es/biocast/documento s/tema14.pdf 2. Upo, (2010), Cinética Enzimática, Sitio web: https://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/mie mbros/Web_Sofia/GRUPOS/Tema%207.pdf 3. Curvas de calibración, http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/C URVASDECALIBRACION_23498.pdf, 04/03/2019 Preguntas extras 1. ¿Para qué sirve una curva tipo? Una curva de calibración o curva tipo mide una señal en función de la concentración de un analito. La calibración incluye la selección de un modelo para estimar los parámetros que permitan determinar la linealidad de esa curva. y, en consecuencia, la capacidad de un método analítico para obtener resultados que sean directamente proporcionales a la concentración de un compuesto en una muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo. 2. ¿Qué es el equilibrio ceto - enol? Los tautómeros son dos isómeros que se diferencian sólo en la posición de un grupo funcional. Entre las dos formas existe un
equilibrio químico. En un equilibrio tautomérico hay migración de un grupo o átomo. Los enoles (compuestos que cuentan con un grupo hidroxilo unido a un carbono con un doble enlace carbonocarbono) resultantes de la migración formal de un hidrógeno de un carbono en posición alfa al oxígeno del grupo carbonilo.