Cara Kerja

I.

CARA KERJA I.1. Pembuatan fasa gerak (Pelarut). Sebanyak

420

mL KH2PO4-

0,01Sebanyak 420 mL KH2PO4- 0,01 - ditambahkan metanol 20 mL -

ditambahkan asetonitril 30 mL

-

ditambahkan isopropil alkohol 30 mL

-

saring menggunakan membran whatman filter PTFE 0,2 μm

-

disonikasi selama 30 menit. (Larutan Fasa Gerak sudah tersedia)

HASIL I.2. Pembuatan larutan induk parasetamol Ditimbang seksama 25 mg Parasetamol p.a dan12,5 mg kafein p.a -

dimasukkan kedalam labu 50 mL

-

Tambahkan pelarut sebanyak 20 mL, disonikasi selama 15 menit

-

diencerkan dengan pelarut hingga garis tanda batas.

-

Hitunglahkonsentrasilarutanindukparasetamol dankafein

HASIL

I.3. Pembuatan deret larutan standar parasetamol + kafein Pipet larutan induk parasetamol dan kafein masing-masing sebanyak 1 ; 2 ; 3 ; 4 ;5 dan 6 mL -

masukkan ke dalam labu ukur 10 mL.

-

Tambahkan pelarut hingga tanda batas.

-

Lakukan sonikasi selama 5 menit, dilakukan degassing apabila masih terdapat gelembung dalam larutan

-

Injeksikan ke sistem HPLC dengan volume penyuntikan 20 μl

-

Selanjutnya dibuat kurva kalibrasi.

HASIL

I.4. Pembuatan Larutan Sampel (Bodrex) Tentukan berat rata-rata tablet(2 tablet) -

Menimbang 100mg sampel, dimasukkan kedalam labu ukur 25 ml ditambahkan pelarut sampai batas labu ukur.

-

dikocok lalu disaring menggunakan kertas saring

-

diambil 10ml, dimasukkan dalam labu ukur 25ml ditambahkan pelarut sampai batas labu.

HASIL

I.5. Penyiapan Instrumen HPLC Pastikan kabel penghubung listrik telah tersambung dengan benar -

Tekan tombol “ON” pada sakelar listrik

-

Isi botol fasa gerak dengan volume yang memadai dan kosongkan botol penampung.

-

Tekan tombol “ON” pada alat, berturut-turut untuk power, detektor dan pompa.

-

Lakukan pemrograman alat dengan computer. Ikuti langkahnya sesuai instruksi dalam komputer.

-

Pilihlah mode yang akan digunakan sesuai dengan parameter kondisi instrumen.

-

Alirkan fasa gerak.

-

Apabila responkromatogram tidak muncul lagi, artinya alat telah menunjukkan base line yang mendatar, maka instrumen siap digunakan.

-

Injeksikan berturut-turut larutan standar (mulai dari konsentrasi terendah), dan terakhir larutan sampel

-

Cetak hasil pengukuran, catat kondisi percobaannya.

-

Setelah selesai digunakan, matikan pompa dengan menyoroti tanda pompa dalam computer.

-

Tutup file sesuai petunjuk, lalu matikan computer.

-

Untuk mematikan, tekan tombol “Off” pada pompa, detector dan power secara berurutan. Putuskan sambungan listrik.

HASIL