Aula 8

Enzimologia Marcus Aurélio Miranda de Araújo.

Estabilidade das proteínas/enzimas „

Podem ser desnaturadas por mudanças de vários parâmetros externos: „ „ „ „

Temperatura, pH, Pressão, [ ] de desnaturantes: Uréia ou GdmCl.

Fluorescência „

Triptofano: „ „

Absorve a 290-295 nm Emite: „ „

Enterrado a 339 nm Exposto a 318-320 nm

“Os coeficientes de absorção para luz polarizada circularmente para a esquerda e para a direita serão diferentes se os elétrons que participam na transição para o estado excitado sentirem um ambiente dissimétrico. Essa expressão da atividade óptica é chamada de dicroísmo circular (CD).”

“é a expressão da atividade óptica” „

„

As proteínas são opticamente ativas porque são dissimétricas. Dois tipos de dissimetria: „ „

„

Configuração Conformação

Ultravioleta distante 170 nm a 240 nm

„

„

Para α-hélice – CD negativo a 208 nm e 222 nm e CD positivo 192 nm. Para arranjo aleatório CD negativo a 199 nm.

Desnaturação por GdnHCL