Article 6 Presentation

Нестабильный интермедиат, несущий информацию от генов к рибосомам для синтеза белка François Jacob Sydney Brenner

Matthew Stanley Meselson

“Nature”, May 13, 1961

Три модели переключения белкового синтеза с бактериального на фаговый

МОДЕЛЬ I Неинфецированная клетка

Инфецированная клетка

МОДЕЛЬ II Неинфецированная клетка

Инфецированная клетка

МОДЕЛЬ III Неинфецированная клетка

Инфецированная клетка

Разделение в градиенте плотности CsCl рибосом 15N13C32P и 14 12 31 N C P, выделенных из клеток Е.coli в присутствии 0,01 M Mg2+  рибосомы без радиоактивной метки  рибосомы с радиоактивной меткой

Разделение в градиенте плотности CsCl рибосом 15N13C32P и 14 12 31 N C P после двух последовательных диализов: против 0, 0005 M Mg2+ и против 0,01 M Mg2+

Клетки E.coli B6 (ауксотрофы по Arg и U) были инфецированы фагом T4 и затем помещены в среду с 14C-U. Полученная биомасса была разделена на две половины: из одной половины были выделены рибосомы (левая картинка), во втором случае в среду был добавлен двухсоткратный избыток 13C-U с последующим выделением рибосом (правая картинка).

Разделение в градиенте плотности CsCl рибосом, выделеныых из клеток E.coli: -

выращенных в среде 15 13 31 N C P с дальнейшим последовательным инфецированием фагом T4, переносом в среду 14 12 N C и добавлением избытка 32P -

выращенных в среде 14 12 31 N C P

Клетки E.coli были выращены в среде с 15N, затем инфецированы фагом T4 и помещены в среду с 14N, в которую через 2 мин добавили 33 SO4. Полученная биомасса была разделена на две половины: из одной половины были выделены рибосомы (левая картинка), во втором случае в среду был добавлен избыток 32SO4 и 32Met с последующим выделением рибосом (правая картинка). Стрелками отмечены ожидаемые положения A и B полос 14Nрибосом.

Выводы: • после инфецирования клеток Е.coli фагом не происходит синтеза новых рибосом • наблюдается синтез новых нестабильных РНК с нуклеотидным составом, соответствующим фаговой ДНК, и связывающихся с ранее существующими в клетках рибосомами. Понижение концентрации ацетата магния в среде позволяет отделить РНК от рибосом. • синтез белка в инфецированных клетках происходит на ранее существующих в клетках рибосомах.