Actividad Antiox.docx
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ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
Capacidad de una sustancia para inhibir la degradación oxidativa por ejemplo, la peroxidación lipídica
Los ensayos usados para la determinación de la actividad antioxidante de un alimento se basan en la capacidad de los compuestos antioxidantes para reaccionar con un radical libre o el potencial que tales compuestos tendrían para reducir un complejo formado entre iones Fe y el reactivo TPTZ (2, 4,6-tripiridil-s-triazina).
Método del ABTS
Método FRAP
(Ácido 2,2’-azinobis (3etilbenzotiazolín)-6- sulfónico). Para muestras hidrosolubles y liposolubles.
(Ión férrico Reducción de la energía antioxidante) Este mecanismo es de transferencia de electrones.
10 µL de muestra se adicionan a 990 µL de una solución de ABTS y se evalúa la capacidad de cada muestra para atrapar el radical catiónico, por medio de la disminución en la absorbancia leída luego de 30 minutos de reacción, a una longitud de onda de 732 nm.
Determina la capacidad antioxidante de forma indirecta. Se basa en el poder que tiene una sustancia antioxidante para reducir el Fe3+ a Fe2+ que es menos antioxidante.
El radical catiónico obtenido es un compuesto de color verde-azulado, estable y con un espectro de absorción en el UV-visible.
El complejo férrico-2, 4,6tripiridil-s-triazina (TPTZ) incoloro es reducido al complejo ferroso coloreado. Se trata de un método espectrofotométrico ya que se mide la absorbancia del Fe2+
DPPH Técnica que emplea el 2,2-difenil1-picrilhidrazilo como radical.
El DPPH es un radical libre que se puede obtener directamente disolviendo el reactivo en un medio orgánico. La reducción del DPPH se monitorea por la disminución en la absorbancia a una longitud de onda característica, es decir espectrofotométricamente.
La deslocalización del electrón también intensifica el color violeta intenso típico del radical, el cual absorbe en metanol a 517 nm y cuando sufre reducción por un antioxidante, esta absorción desaparece.
Método ORAC (Oxigen Radical Absorbance Capacity). (Capacidad de Absorción de Radicales de Oxígeno)
Se basa en la habilidad que tienen los compuestos antioxidantes para bloquear radicales libres por donación de un átomo de hidrógeno.
El radical artificial AAPH (2,2’-Azobis-(2aminopropano)dihidrocloruro) oxida a la fluoresceína de forma que esta pierde su fluorescencia.
Métodos de generación del radical ABTS: Enzimáticamente (mioglobina, peroxidasa de rábano). Químicamente (Dióxido de manganeso, persulfato potásico, radicales peroxilo). Electroquímicamente
Un volumen de 10 μL de la muestras, se mezcla con 90 μL de agua destilada y 900 μL del reactivo FRAP. La absorbancia se lee a 593 nm después de 7 minutos.
Es posible determinar la actividad antioxidante por una gran variedad de métodos. Sin embargo, el empleo del radical DPPH en el método espectrofotométrico posee ventajas en simplicidad, reproducibilidad y rapidez.
En el ensayo ORAC, los radicales peroxilo, generados a partir del azo-compuesto AAPH o ABAP ([2,2′azobis(2-amidinopropano]), reaccionan con fluoresceína como sustrato. Este método tiene una alta sensibilidad, precisión y responsabilidad.
Bibliografía Dobarganes Garcia, C., & Perez Camino, C. (s.f.). AGRIS. Obtenido de http://agris.fao.org/agris-search/search.do?recordID=US201302131157 Falquez, C. (s.f.). ACADEMIA. Obtenido de http://www.academia.edu/7885253/Determinacion_de_antioxidantes Instituto Salud Pública Chile. (7 de Julio de 2009). Obtenido de http://www.ispch.cl/documentorecnico/23469 M, M. J., & M., G. D. (s.f.). Universidad Autónoma de Querétaro. Obtenido de http://www.uaq.mx/investigacion/difusion/veranos/memorias2008/7VeranoUAQ/14MunozJuarez.pdf Moreno Gomez, E. (2014). Universidad Nacional. Obtenido de http://www.bdigital.unal.edu.co/48757/1/Trabajo%20finalELIZABETH%20MORENO.pdf NOTI JENCK. (Noviembre de 2010). Obtenido de https://www.notijenck.com.ar/aplicaciones/cuantificacion-de-la-vitamina-e-en-un-disolventeorganico-usando-ft-ir PORTAL ANTIOXIDANTES. (s.f.). Obtenido de http://www.portalantioxidantes.com/analisis-de-antioxidantes/ Salinas Arroyo, M. P. (2015). Pontificia Universidad Catolica del Ecuador. Obtenido de http://repositorio.puce.edu.ec/bitstream/handle/22000/8655/TRABAJO%20FINAL.pdf?sequence=1 Schüep, W. (s.f.). Depositos de documentos de la FAO. Obtenido de http://www.fao.org/docrep/010/ah833s/ah833s19.htm
Capacidad de una sustancia para inhibir la degradación oxidativa por ejemplo, la peroxidación lipídica
Los ensayos usados para la determinación de la actividad antioxidante de un alimento se basan en la capacidad de los compuestos antioxidantes para reaccionar con un radical libre o el potencial que tales compuestos tendrían para reducir un complejo formado entre iones Fe y el reactivo TPTZ (2, 4,6-tripiridil-s-triazina).
Método del ABTS
Método FRAP
(Ácido 2,2’-azinobis (3etilbenzotiazolín)-6- sulfónico). Para muestras hidrosolubles y liposolubles.
(Ión férrico Reducción de la energía antioxidante) Este mecanismo es de transferencia de electrones.
10 µL de muestra se adicionan a 990 µL de una solución de ABTS y se evalúa la capacidad de cada muestra para atrapar el radical catiónico, por medio de la disminución en la absorbancia leída luego de 30 minutos de reacción, a una longitud de onda de 732 nm.
Determina la capacidad antioxidante de forma indirecta. Se basa en el poder que tiene una sustancia antioxidante para reducir el Fe3+ a Fe2+ que es menos antioxidante.
El radical catiónico obtenido es un compuesto de color verde-azulado, estable y con un espectro de absorción en el UV-visible.
El complejo férrico-2, 4,6tripiridil-s-triazina (TPTZ) incoloro es reducido al complejo ferroso coloreado. Se trata de un método espectrofotométrico ya que se mide la absorbancia del Fe2+
DPPH Técnica que emplea el 2,2-difenil1-picrilhidrazilo como radical.
El DPPH es un radical libre que se puede obtener directamente disolviendo el reactivo en un medio orgánico. La reducción del DPPH se monitorea por la disminución en la absorbancia a una longitud de onda característica, es decir espectrofotométricamente.
La deslocalización del electrón también intensifica el color violeta intenso típico del radical, el cual absorbe en metanol a 517 nm y cuando sufre reducción por un antioxidante, esta absorción desaparece.
Método ORAC (Oxigen Radical Absorbance Capacity). (Capacidad de Absorción de Radicales de Oxígeno)
Se basa en la habilidad que tienen los compuestos antioxidantes para bloquear radicales libres por donación de un átomo de hidrógeno.
El radical artificial AAPH (2,2’-Azobis-(2aminopropano)dihidrocloruro) oxida a la fluoresceína de forma que esta pierde su fluorescencia.
Métodos de generación del radical ABTS: Enzimáticamente (mioglobina, peroxidasa de rábano). Químicamente (Dióxido de manganeso, persulfato potásico, radicales peroxilo). Electroquímicamente
Un volumen de 10 μL de la muestras, se mezcla con 90 μL de agua destilada y 900 μL del reactivo FRAP. La absorbancia se lee a 593 nm después de 7 minutos.
Es posible determinar la actividad antioxidante por una gran variedad de métodos. Sin embargo, el empleo del radical DPPH en el método espectrofotométrico posee ventajas en simplicidad, reproducibilidad y rapidez.
En el ensayo ORAC, los radicales peroxilo, generados a partir del azo-compuesto AAPH o ABAP ([2,2′azobis(2-amidinopropano]), reaccionan con fluoresceína como sustrato. Este método tiene una alta sensibilidad, precisión y responsabilidad.
Bibliografía Dobarganes Garcia, C., & Perez Camino, C. (s.f.). AGRIS. Obtenido de http://agris.fao.org/agris-search/search.do?recordID=US201302131157 Falquez, C. (s.f.). ACADEMIA. Obtenido de http://www.academia.edu/7885253/Determinacion_de_antioxidantes Instituto Salud Pública Chile. (7 de Julio de 2009). Obtenido de http://www.ispch.cl/documentorecnico/23469 M, M. J., & M., G. D. (s.f.). Universidad Autónoma de Querétaro. Obtenido de http://www.uaq.mx/investigacion/difusion/veranos/memorias2008/7VeranoUAQ/14MunozJuarez.pdf Moreno Gomez, E. (2014). Universidad Nacional. Obtenido de http://www.bdigital.unal.edu.co/48757/1/Trabajo%20finalELIZABETH%20MORENO.pdf NOTI JENCK. (Noviembre de 2010). Obtenido de https://www.notijenck.com.ar/aplicaciones/cuantificacion-de-la-vitamina-e-en-un-disolventeorganico-usando-ft-ir PORTAL ANTIOXIDANTES. (s.f.). Obtenido de http://www.portalantioxidantes.com/analisis-de-antioxidantes/ Salinas Arroyo, M. P. (2015). Pontificia Universidad Catolica del Ecuador. Obtenido de http://repositorio.puce.edu.ec/bitstream/handle/22000/8655/TRABAJO%20FINAL.pdf?sequence=1 Schüep, W. (s.f.). Depositos de documentos de la FAO. Obtenido de http://www.fao.org/docrep/010/ah833s/ah833s19.htm
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