Tinciones

TINCIONES Josué Rodríguez Longoria

• Se combinan químicamente con el protoplasma bacteriano (matan a la célula) • La mas usuales son sales • Tinciones básicas: catión coloreado + anión incoloro (ej. Cloruro– de azul de metileno +) • Tinciones acidas: (ej. Eosinatode sodio +)

• Los colorantes básicos (+) tiñen a las células bacterianas al combinarse con sus ácidos nucleicos (-) • Los colorantes ácidos no las tiñen, por eso pueden usarse para colorear el fondo con un color de contraste

Tinción de Gram • La reacción a esta tinción, por parte de las bacterias, se relaciona con muchas propiedades morfológicas de estas • Las bacterias que captan el colorante básico son Gram (+) • La que captan el colorante de contraste son Gram (-)

Tinción acidorresistente • Las bacterias acidorresistentes captan la carbolfucsina, aun cuando se usa decolorante • se cubre el frotis con carbolfucsina y se calienta en baño de vapor • Se agrega alcohol acido

• Finalmente se aplica un colorante de contraste (azul o verde) • Las bacterias acidorresistentes se tiñen de rojo: • Micobacterias • Actinomicetos

Tinción negativa • Se tiñe el fondo con colorante de contraste para dejar a las células incoloras en contraste • El colorante mas usado es nigrusina • Sirve para observar bacterias o estructuras difíciles de teñir con técnicas directas

Tinción de Flagelos • Se logra con una suspensión coloidal inestable de sales de acido tanico • Esto forma un precipitado denso en la pared celular y los flagelos • Con esto su diámetro aumenta y se tiñen con fucsina básica, lo que los hace visibles con el microscopio óptico

• En bacterias peritricas los flagelos se agrupan en forma de manojo en durante el movimiento y pueden ser suficientemente gruesos para observarse con: • Microscopia de campo oscuro • Contraste de fases

Tinción de la capsula • Coloración negativa o una modificación de esta • Método de Welch: solución caliente de cristal violeta • Lavado con sol’n de sulfato de cobre (para remover exceso de colorante). Además imparte color al fondo

• La célula y el fondo se tiñen de color azul oscuro • La capsula aparece de color azul claro

Tinción del Núcleo

• Tinción de Feulgen • Especifica para el DNA

Tinción de las Esporas • Se observan como cuerpos refringentes intracelulares en suspensiones sin teñir • O como zonas incoloras dentro de células tenidas con métodos habituales • La pared de la espora se puede colorear si se calienta la preparación

• La impermeabilidad de su pared evita la decoloración por el alcohol • Pueden ser contrastadas • Por lo regular se tinen con verde de malaquita o carbolfucsina