Micologia

Métodos Básicos en el Laboratorio de Micología Identificación de Hongos Filamentosos

Dra. Gloria M. González G. Dpto. Microbiología Fac. Medicina, UANL.

Secreción vías resp. bajas

Sangre

Secreción heridas Biopsias

ESPECIMENES CLINICOS

Médula ósea Exudado mucosas

Orina

Cutáneas (pelo, piel, uñas)

Diagnóstico Micológico ¾ Toma de muestras (adecuada y abundante) ¾ Recursos del laboratorio (reactivos, medios de cultivo, equipo) ¾ Personal con experiencia

Toma de Muestras/Tiñas

Toma de Muestras/Tiñas

Toma de Muestras/Pitiriasis Versicolor

Examen Directo

¾ KOH (10-40%) ¾ KOH-DMSO ¾ KOH-calcofluor ¾ Solución salina

Examen Directo

Hidróxido de potasio: Hidróxido de potasio..........20 gr Glicerol..............................20 ml Agua destilada...................60 ml

Examen Directo Hidróxido de potasio-dimetilsulfóxido: Hidróxido de potasio.........10 gr Dimetilsulfóxido...............40 ml Agua destilada...................50 ml

Examen Directo Solución salina: Cloruro de sodio.......... 0.85 gr Agua destilada............. 100 ml

Examen Directo

Examen Directo

Examen Directo/Cabello

Examen Directo/Cabello

Examen Directo/Limitaciones ¾ Sitio anatómico afectado ¾ Cantidad de muestra examinada ¾ Número de microorganismos ¾ Tipo de paciente ¾ Calidad del personal del laboratorio

Examen Directo/Artefactos

Cultivo de la Muestra

¾ Medios de cultivo ¾ Tipo de contenedores ¾ Tiempo de incubación ¾ Temperatura de incubación

Medios de Cultivo ¾ Agar Sabouraud ¾ Agar Micosel o Micobiótico ¾ Agar papa dextrosa ¾ BHI + antibióticos ¾ BHI

Medios de Cultivo

¾ Refrigeración (2-8 °C) ¾ Bolsas de plástico

* 2 meses

Tipo de Contenedores

Medios de Cultivo/Técnica de Sembrado

Tiempo de Incubación ¾ Levaduras

24-48 horas

¾ Hongos filamentosos (no patógenos)

2-4 días

¾ Hongos filamentosos (patógenos)

6-15 días

* Revisiones diarias

Temperatura de Incubación ¾ 25-30 °C ¾ 37 °C

Identificación de hongos filamentosos Estudios microbiológicos ƒ Características de la colonia ƒ Estructuras asexuales

Morfología macroscópica

Morfología microscópica

ƒ Características fisiológicas

Identificación de hongos filamentosos Características de las colonias ƒ Color ƒ Topografía ƒ Textura ƒ Tasa crecimiento

Examen de un Cultivo ¾ Textura (altura de hifas aéreas): ¾ Algodonosa ¾ Aterciopelada ¾ Granular o polvorienta ¾ Glabrosa

Examen de un Cultivo ¾ Topografía (colinas y valles): ¾ Rugosa ¾ Umbonada ¾ Verrucosa ¾ Aplanada

Examen de un Cultivo ¾ Color

Examen de un Cultivo

¾ Técnica de cardaje ¾ Técnica de cinta adhesiva ¾ Microcultivo

Examen de un Cultivo Azul de algodón y lactofenol: Fenol, concentrado...........20 ml Acido láctico....................20 ml Glicerol............................40 ml Azul de algodón...............0.50 gr Agua destilada.................20 ml

Examen de un Cultivo/Técnica de Cardaje

Examen de un Cultivo/Técnica Cinta Adhesiva

Examen de un Cultivo/Microcultivo 1

3

2

4

Examen de un Cultivo/Microcultivo 5

7

6

8

Examen de un Cultivo ¾ Hifas ¾ Conidias ¾ Célula conidiógena ¾ Estructura de sostén ¾ Cuerpos fructíferos ¾ Otros

Trichophyton rubrum

Trichophyton tonsurans

Trichophyton mentagrophytes

Microsporum canis

Epidermophyton floccosum

Pitiriasis Versicolor

Coccidioides immitis

Fase tisular 37 °C

Fase micelial 25-30 °C

Aspergillus spp.

Morfología colonial

Medios de cultivo

- Agar de Sabouraud - Agar papa dextrosa - Agar extracto de malta - Agar Czapek-Dox

Cont.

Morfología microscópica

hifas conidóforo vesícula métula cabeza conidial fiálides conidias esclerotia células de Hülle cleistotecios asca ascosporas

¾ Estructuras