FCN/ UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE QUERÉTARO CAMPUS JURIQUILLA
INMUNOLOGÍA Dr. Carlos Vega Practica #5: “PRUEBA ELISA” EQUIPO 1
Integrantes: Romero Juárez Ana Valeria Jasso Hernández Andrea Joseline
García Martínez Josué Alejandro Juárez Acosta Cruz Daniel
Marco teórico: Objetivo: Que todos los alumnos aprendamos el procedimiento y llevemos a cabo un ensayo indirecto en placa para la detección de anticuerpos contra Anaplasma Marginale en suero sanguíneo de bovinos. Metodología: PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS Toma de muestra sanguínea (identificación o etiquetado). Centrifugar a 10,000 rpm por 10 minutos Obtener el suero y almacenarlo en alícuotas a 4ºC hasta su uso.
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PREPARACIÓN DE LA PRUEBA Preparar soluciones amortiguadoras de bloqueo y diluciones
Atemperar placas, incubadora y controles
BLOQUEO DE LAS PLACAS Eliminar contenido Depositar 200 ul por pozo de la solución de bloqueo Tapar e incubar por 60 minutos a 37ºC
LAVADO
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REACCIÓN Ag-Ac
LAVADO Y CARGAR ANTICUERPO
LAVADO AGREGAR SUSTRATO Preparación de solución sustrato en 20 ml Eliminar el contenido de la placa Depositar 195 ul del sustrato por pozo Tapar e incubar 60 min a 37ºC
LECTURA DE DENSIDAD ÓPTICA EN ESPECTROFOMETRO Longitud de onda a 405 nm Resultados: Discusión:
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Conclusión:
Respuestas al cuestionario:
Bibliografías: