Medio de enriquecimiento selectivo y diferencial para la detecció detección de microorganismos del grupo coliforme en diversos productos y para investigar la presencia de E. coli por fluorescencia y prueba confirmativa por indol. El reactivo DBC contiene el substrato Cromogé Cromogénico de la enzima 55-bromobromo-4-clorocloro-3 indolilindolil-B D-Galactopiranosida (X(X-GAL) para la detecció detección de BB-galactosidasa (una enzima indicativa del grupo de los coliformes). coliformes). En la hidró hidrólisis de la BB-D-galactosidasa, galactosidasa, XX-GAL desprende un compuesto Cromogé Cromogénico (indigo (indigoindigo-azul) que hace que el medio vire de amarillo claro a un color azulazul-verdoso. Ademá Además contiene el substrato fluorogenico de la enzima 44-metilmetil-umbelliferilumbelliferil-B-D-glucoronido (MUG) para la detecció detección de B - glucoronidasa (una enzima especí específica para E.coli). En la hidró hidrólisis de la B - glucoronidasa, glucoronidasa, MUG desprende 4 – metilumbelliferona que presenta fluorescencia cuando se expone a la luz ultravioleta. La fluorescencia fluorescencia distingue la presencia de E.coli del grupo de coliformes. coliformes.
PROCEDIMIENTO 1. Tomar la muestra en el frasco hasta 100mL. 2. Verter el contenido del polvo en el frasco con la muestra. 3. Agitar hasta integrar completamente el polvo. (ligeramente amarillo) amarillo) Incubar a 35 ± 2 º C 18 a 24 hrs.
INTERPRETACIÓ INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS. Despué Después del periodo de incubació incubación, examinar si existe cambio de color en el medio. a) ausencia ia de Si el medio no presenta cambio de color o es amarillo hay ausenc coliformes. b) Si se detecta un cambio de color verdeverde-azul indica la presencia de colifornes.
c)
La presencia de Escherichia coli se determina al iluminar al cultivo con luz U.V (366nm), si hay fluorescencia indica la presencia de E. coli (algunas especies de Shigella pueden dar positiva la fluorescencia). La confirmaci confirmació ón de E. coli se realiza mediante la detecció detección de la producció producción de indol al agregar unas gotas de reactivo de Kovacs al medio de cultivo. Si es positicvo se forma un anillo