Cia -timo En Diferentes Etapas Del Desarrollo

Estudio Preliminar del Timo Humano en Diferentes Etapas del Desarrollo Piuzzi, María L. - Cerdera Noguera, Américo - Soto de Ferrini Susana Viudes, Laura - Thompson, Carlos - Rossi, Luis Cátedra l de Histología y Embriología . Facultad de Medicina . U.N.N.ESargento Cabral 2001 (3400) Corrientes - Argentina Tel.: +54 (03783) 439624

ANTECEDENTES El timo es una glándula clave en la constitución del sistema inmunológico por ser el órgano de maduración de los linfocitos T; células imprescindibles por su actividad en la inmunidad celular .Se desarrolla a partir de la 5ª semana, de esbozos del intestino faríngeo en forma de rudimento epitelial de origen endodérmico . Células oriundas del hígado y médula ósea colonizan el órgano. A partir de allí, el desarrollo es progresivo, llegando a su máxima expresión aproximadamente a los 10 (diez) años; para luego comenzar a involucionar en la pubertad ,momento en que el órgano disminuye su volúmen y su parénquima es reemplazado parcialmente por tejido adiposo . Desde el punto de vista histológico es un órgano encapsulado , bilobulado . La cápsula presenta tejido conectivo denso, irregular que envía tabiques a los lóbulos y los subdivide en lobulillos incompletos. Cada lobulillo presenta corteza y una médula común, estroma retículo epitelial y un parénquima predominantemente linfocitario . En la zona cortical se agrupan densamente la mayoría de los timocitos inmunoincompetentes en fase de proliferación, mientras que en la médula se ubican los inmunocompetentes, lo que implica que existe un gradiente de diferenciación de la corteza a la médula. Contiene diferentes tipos celulares de acuerdo a su estructura , función y fenotipo: -Células epiteliales corticales : -Células epiteliales reticulares de tipo I: separan la corteza de la cápsula de tejido conectivo y a las trabéculas ,y rodean a los elementos vasculares de la corteza .Los núcleos polimorfos y nucleolos evidentes. - Células epiteliales reticulares de tipo II :localizadas en la corteza media ,poseen largas proyecciones a manera de vainas que dividen la corteza tímica en compartimientos pequeños llenos de linfocitos. Los núcleos son grandes, pálidos y con poca heterocromatina. El citoplasma es pálido y con abundantes tono-filamentos. - Células epiteliales reticulares de tipo III :localizadas en la parte profunda de la corteza y a nivel de la unión cortico-medular, con amplias proyecciones a manera de vainas que forman compartimentos llenos de linfocitos. Permiten aislar corteza y medula. Citoplasma y núcleos más densos . La médula ,de color mucho más claro que la corteza, contiene una población de linfocitos no tan profuso y gran número de células epitelio- reticulares (interdigitadas). -Células epiteliales reticulares de tipo IV : se encuentran en la región cortico-medular. Los núcleos presentan cromatina burda .El citoplasma es oscuro y rico en tono-filamentos. -Células epiteliales reticulares de tipo V: forman el citorretículo de la médula. Núcleos polimorfos, bien definidos y cromatina perinuclear evidente. -Células epiteliales reticulares de tipo VI : presentan núcleo eucromático con un nucleólo prominente, citoplasma pálido. Estas células forman estructuras típicas y características del timo: los corpúsculos de Hassall , son de aspecto redondeado, compuestos por células que se disponen conformando láminas concéntricas, las que pueden presentar necrosis o queratinización.

MATERIAL Y MÉTODOS - Se obtuvieron timos humanos de individuos en distintas etapas del desarrollo, provenientes del laboratorio privado de anatomía patológica del Dr. Cerdera Noguera y de la morgue judicial . -Se los clasificaron en 3 grupos etarios diferentes : Estrato A : Nacimiento hasta 5 años. Estrato B : Niño de 5-10 años Estrato C : Adulto - Se los fijó en formol tamponado durante 48 hs - Se procesaron siguiendo la técnica histológica de rutina. Se obtuvieron seis (6) cortes en forma aleatoria de cada taco. El espesor de cada uno de ellos fue de 5 a 7 micras. - Se realizó la tinción de los cortes utilizando la técnica hematoxilina - eosina, observando con microscopio óptico las preparaciones. -Se seleccionó el más representativo de cada estrato y con ellos se realizaron técnicas de inmunoperoxidasa utilizando como sistema de detección: avidina-biotina y como revelador diaminobencidina. Los anticuerpos monoclonales utilizados para la determinación de los distintos tipos celulares fueron: UCHL-1 (CD45RO): marcador de timocitos. CD68 : marcador de histiocitos. AE1-AE3 (CK): marcador de citoqueratinas en células epiteliales. S-100: marcador de células retículo-epiteliales e histiocitos. ACL: antígeno leucocitario común.

RESULTADOS Los resultados obtenidos por medio de la observación microscópica fueron: -Estrato A : niño de 10 (diez) meses, sano (muerte accidental). Con la técnica de hematoxilina- eosina se observa una muy delgada cápsula de tejido conectivo que emite gran cantidad de trabéculas .La población linfocitaria es abundante y se notan los distintos estadíos de proliferación de éstas células. Hay una notoria definición entre la zona cortical y medular . Se evidencian las células retículo-epiteliales, con las características nucleares y ubicación, descriptas en el órgano . Se visualizan corpúsculos de Hassall en su mayor parte con la estructura conservada y sobresalen algunos con aspectos pseudoquísticos. Con la técnica de inmunoperoxidasa se observó: positividad en el componente retículo-epitelial y en corpúsculos de Hassall con AE1 - AE3, en linfocitos presentes con ACL y UCHL-1 (CD45RO), en histiocitos con CD 68 y S-100 y en células reticulo-epiteliales interdigitadas también con S-100 -Estrato B : niño de 10 (diez) años , sano (muerte accidental). Con la técnica de hematoxilina - eosina se observa que el timo presenta una estructura conservada , donde se destaca predominio de la cortical sobre la medular, con células linfocitarias proliferantes. En la corteza, se visualizan células reticulares tipo I y de tipo II. Ambas conservan las características histológicas descriptas anteriormente. Se observan numerosas formaciones pseudoquísticas bien delimitadas, de hasta 300 (trescientos) micrómetros conteniendo material amorfo ; en muchos de ellos aparecen focos de calcificación distrófica y escasos corpúsculos de Hassall típicos ( células reticulares de tipo VI). Con la técnica de inmunoperoxidasa se observó: positividad en el componente retículo-epitelial y en corpúsculos de Hassall con AE1 - AE3, en linfocitos presentes con ACL y UCHL-1 (CD45RO), en histiocitos con CD 68 y S-100 y en células reticulo-epiteliales interdigitadas también con S-100 -Estrato C: hombre de 64 (sesenta y cuatro) años de edad, que presentó una pericarditis crónica. Se distinguen islotes de tejido tímico con corteza y medula diferenciadas. Con la técnica de hematoxilina - eosina, se

puede distinguir el órgano con un marcado reemplazo adiposo; zonas de tejido conectivo denso y otras de tejido conectivo laxo, (trabéculas), éstas, en relación directa con los adipocitos y delimitando la zona cortical En. las trabéculas se pueden observar células retículo-epiteliales , lo mismo que en la zona medular. La población linfocitaria está conservada en relación con la escasa cantidad de parénquima tímico. La población macrofágica es abundante. Escasos corpúsculos de Hassall pequeños y compactos ; que conservan su estructura laminar concéntrica . Con la técnica de inmunoperoxidasa se observó: positividad en el componente retículo-epitelial y en corpúsculos de Hassall con AE1 - AE3, en linfocitos presentes con ACL y UCHL-1 (CD45RO), en histiocitos con CD 68 y S-100 y en células reticulo-epiteliales interdigitadas también con S-100

CONCLUSIONES - La celularidad disminuye y es reemplazada por tejido adiposo en relación con la involución del órgano, quedando corpúsculos de Hassall rudimentarios pero con respuesta positiva al inmunomarcado (AE1AE3).Disminuyen también las células reticulares interdigitadas . -La presencia de los pseudoquistes encontrados , con marcada necrosis central , constituyen un aspecto morfológico de la involución de los corpúsculos de Hassall en las distintas edades.. -Si suponemos que los corpúsculos de Hassall, son derivados de las células interdigitadas, que algunos autores las consideran nueroectodérrmicas ( derivadas de la cresta neural) y que se han marcado como tales en nuestro laboratorio ¿porque no se marcaron con S-100 los corpúsculos de Hassall , cuando lo lógico es que sean S100 positivos; interrogante que nos abren expectativas para nuevas líneas de investigación . Si bien histológicamente hemos encontrado marcadas diferencias en los timos de distintas edades, coincidentes con otros trabajos realizados , no encontramos con las técnicas de inmunomarcación diferencias significativas; por lo que deducimos que el timo aún en etapa involutiva, conserva potencialmente su importancia funcional.

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