Brucella
Introducción… •El género Brucella, descrito en 1920 por Meyer y Shaw, está formado por bacterias parásitas intracelulares facultativas, que producen el aborto epizoótico en muchas especies domésticas de animales y una enfermedad febril septicémica o infecciones focalizadas en el hombre. •El género Brucella esta compuesto por seis especies, cuatro de ellas asociadas con brucelosis humana (Fiebre ondulante, fiebre de Malta).
Características morfológicas… • Cocobacilos pequeños de (0.5 x 0.6 a 1.5 µm) • Gramnegativos • Aerobios • No móviles • No encapsulados • No formadores de esporas
Características del crecimiento… • Adaptadas al hábitat intracelular. • Se inoculan en agar tripticasa y soja, o en medios de cultivo de sangre. • Brucella abortus requiere 5 a 10% de CO2. • Las 4 especies patógenas producen catalasa y oxidasa.
Patología… • En tejido linfático, hígado, bazo, médula ósea, aparecen nódulos granulomatosos que pueden convertirse en abscesos. •Osteomielitis
•Meningitis
•Colecistitis
Características de brucelosis humana…
Especie
Reservorio animal
Enfermedad clínica
Brucella melitensis Brucella abortus
Cabras, ovejas
Enfermedad grave, aguda y complicaciones comunes.
Brucella suis
Cerdos
Enfermedad supurada destructiva con manifestaciones crónicas (granulomas caseosos).
Brucella canis
Perros
Enfermedad leve y complicaciones supuradas raras.
Vacas
Enfermedad leve y complicaciones supuradas raras (granulomas no caseosos del sistema retículoendotelial).
Diagnóstico… • Serología • Microbiología • PCR
FEMS Immunology and Medical Microbiology 34 (2002) 147^151
Comparison of three di¡erent PCR methods for detection of Brucella spp. in human blood samples PRIMER
SECUENCIA DEL PRIMER.
FRAGMENTO AMPLIFICADO.
SENSIBILIDAD
JPF /JPR
(5PGCGCTA AGG CTG CCG ACG CAA-3P) (5P-ACC AGC CAT TGC GGT CGG TA-3P)
Fragmento de 193-bp de un gen que codifica una proteína de la membrana (omp-2)
Menor
B4/B5
B4 =(5P-TGGCTC GGT TGC CAA TAT CAA-3P) B5 (5P-CGCGCT TGC CTT TCA GGT CTG-3P)
Fragmento de 223-bp presente en un gen que codifica un antígeno de 31kDa de B. abortus
Intermedia
905-bp Derivado de una secunncia del rRNA de B. abortus
Mayor
F4/R2
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, Dec. 1995, p. 3087–3090 Vol. 33, No. 12 0095-1137/95/$04.0010 Copyright q 1995, American Society for Microbiology
Single-Step PCR for Detection of Brucella spp. from Blood and Milk of Infected Animals.
PRIMER
SECUENCIA
JPF/JPR for IS711 and B. abortus or B. melitensis .
(5’GCGCTCAGGCT GCCGACGCAA-3’)
FRAGMENTO AMPLIFICDO
193- bp omp-2)
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, Dec. 1995, p. 3087–3090
Single-Step PCR for Detection of Brucella spp. from Blood and Milk of Infected Animals.
Real-Time Multiplex PCR Assay for Detection of Brucella spp., B. abortus, and B. melitensis