Beta_250 Instrucciones De Uso

INTERPRETATION DU TEST

®

2Ème bande Ère

250

1 bande

NON VALIDE

-

+/-

NEGATIF

POSITIF

+ POSITIF

++

MECANISME REACTIONNEL Le test est basÈ sur líemploi díun rÈcepteur spÈcifique liÈ ‡ des particules díor. Au cours de la premiËre Ètape díincubation, les antibiotiques fl lactames, síils sont prÈsents dans líÈchantillon de lait, se lient au rÈcepteur. Pendant la deuxiËme Ètape díincubation, le lait migre sur un support immunochromatographique qui prÈsente deux bandes de capture. - La premiËre bande retient tous les rÈcepteurs qui níont pas liÈ díantibiotiques. - La seconde bande sert de rÈfÈrence. REACTIFS Le fleta s.t.a.r. 250 permet la rÈalisation de 250 analyses. Le coffret contient : - 250 flacons contenant le rÈcepteur sous forme lyophilisÈe. - 10 flacons blancs contenant chacun 25 tigettes. - 1 notice díinformation. PROCEDURE DU TEST 1. Retirer la boÓte du rÈfrigÈrateur . 2. Sortir un flacon du coffret et síassurer que tout le lyophilisat se trouve au fond du flacon. Remarque : pour faire descendre le lyophilisat au fond du flacon, frapper dÈlicatement le flacon sur une surface solide. 3. Enlever la capsule et le bouchon du flacon. 4. Placer un embout neuf sur une pipette calibrÈe de 200 µl. Immerger líembout sur un centimËtre dans líÈchantillon de lait prÈalablement mÈlangÈ. 5. Distribuer les 200 µl de lait ‡ tester dans le flacon contenant le rÈcepteur. Remettre le bouchon. Agiter doucement en tournant le flacon afin de dissoudre tout le lyophilisat. 6. Mettre le flacon dans un des puits de líincubateur stabilisÈ ‡ la tempÈrature de 47,5∞C. Incuber pendant 3 minutes. 7. Au bout de 3 minutes díincubation, les mains propres et sËches, ouvrir le flacon blanc. Prendre une tigette et la dÈposer dans le flacon. Veiller ‡ ce que les flËches de la tigette soient orientÈes vers le bas dans le flacon. Poursuivre líincubation ‡ 47,5∞C. Fermer le flacon blanc. 8. 2 minutes aprËs líintroduction de la tigette dans le flacon, retirer la tigette et interprÈter immÈdiatement. 9. La tigette peut Ítre archivÈe.

INTERPRETATIE VAN DE TEST

2de strookje 1ste strookje

POSITIF

NOTICE DíINFORMATION INTRODUCTION Le fleta s.t.a.r. est une mÈthode de type ´ Receptor Assay ª pour la recherche rapide, dans le lait, de rÈsidus actifs díantibiotiques de la famille des fl lactames (pÈnicillines, cÈphalosporines) utilisÈs dans la prÈvention et le traitement des maladies infectieuses des femelles laitiËres et en particulier les mammites.

Note : Le lait et les constituants du lait Ètant de nature biologique, on ne peut pas totalement exclure la possibilitÈ de rÈsultats incorrects. En cas de doute, ou lorsque de sÈrieuses consÈquences sont en jeu, il est recommandÈ de ne pas se fier au rÈsultat díun seul test mais de le confirmer, par exemple, par un test microbiologique. Equipement nÈcessaire : Un incubateur ‡ 47,5∞C. Une pipette calibrÈe ‡ 200 µl avec les embouts correspondants.

Aucune bande rouge níapparaÓt, le test est non valide. La premiËre bande a une intensitÈ supÈrieure ‡ celle de la bande rÈfÈrence, líÈchantillon est classÈnÈgatif. La premiËre bande a une intensitÈ Èquivalente ou infÈrieure ‡ celle de la bande de rÈfÈrence, líÈchantillon contient des antibiotiques ‡ une faible concentration, il est classÈ positif. La premiËre bande est absente, líÈchantillon contient des antibiotiques ‡ une forte concentration, il est classÈ positif. REMARQUES Spectre de dÈtection : Tous les antibiotiques de la famille des fl lactames peuvent Ítre dÈtectÈs par le fleta s.t.a.r. La plupart des spÈcialitÈs vÈtÈrinaires autorisÈes pour le traitement par voie intramammaire renferment des antibiotiques de cette famille tels que la pÈnicilline G, la cloxacilline, líamoxicilline, la cÈphapirine, le cÈphalonium, ... TempÈrature díincubation : La tempÈrature díincubation idÈale est 47,5∞C +/- 0,5∞C. Au dessous de 46∞C, les rÈactions sont ralenties. Au dessus de 49∞C, les rÈactifs peuvent subir une dÈgradation. Dans les deux cas les performances du test sont modifiÈes et sa rÈponse devient incorrecte. PrÈcautions : Lors de la mise en oeuvre du test fleta s.t.a.r. 250, il convient díavoir les mains propres et sËches pour Èviter toute contamination des rÈactifs. Stockage des rÈactifs : ConservÈs au rÈfrigÈrateur entre 2∞C et 8∞C, les rÈactifs sont stables jusquí‡ la date de pÈremption inscrite sur líemballage du coffret. Cependant les rÈactifs peuvent Ítre maintenus hors du rÈfrigÈrateur pendant la durÈe des analyses. Avant son ouverture, le flacon blanc devra Ítre restÈ au moins dix minutes ‡ la tempÈrature normale. Environnement : Le rÈsultat díun test de recherche de rÈsidus díantibiotiques pouvant Ítre modifiÈ par la prÈsence accidentelle de molÈcules actives dans líenvironnement, il est recommandÈ díÈviter la mise en oeuvre du fleta s.t.a.r. par toute personne subissant un traitement ‡ base de fl lactames. Recommandations : Líabsence de migration du liquide sur la tigette conduit ‡ la non validitÈ du test. Cette situation peut se prÈsenter lorsque le test est effectuÈ sur un lait anormal tel quíun lait coagulÈ ou si la procÈdure nía pas ÈtÈ suivie correctement. Tous les Èchantillons classÈs non nÈgatifs feront líobjet díune seconde analyse avec le fleta s.t.a.r. Dans ce cas il est conseillÈ de rÈaliser en mÍme temps un test avec un Èchantillon tÈmoin nÈgatif. Si le rÈsultat du test avec líÈchantillon tÈmoin nÈgatif est incorrect, les rÈactifs peuvent Ítre dÈgradÈs, dans ce cas il est conseillÈ de refaire les analyses avec des rÈactifs neufs.

BIJSLUITER INLEIDING fleta s.t.a.r. is een ìreceptor assayî-methode voor een snelle opsporing in melk van actieve residuís van fl lactam antibiotica (penicillinen, cefalosporinen) die worden gebruikt in de preventie en de behandeling van infectieziekten bij zogende wijfjesdieren en vooral bij uierontsteking. REACTIONEEL MECHANISME De test berust op het gebruik van een specifieke aan goudpartikels gebonden receptor. Tijdens de eerste incubatiefase binden de eventuele fl lactam antibiotica in het melkmonster zich aan de receptor. Tijdens de tweede incubatiefase migreert de melk op een immunochromatografische drager die twee captatiestroken vertoont. - De eerste strook capteert alle receptoren die geen antibiotica hebben gebonden. - De tweede strook dient als referentie. REAGENTIA Met de fleta s.t.a.r. 250 kan men 250 analyses uitvoeren. Het koffertje bevat: - 250 flesjes met de receptor in gevriesdroogde vorm - 10 witte flesjes met elk 25 teststrookjes - 1 bijsluiter TESTPROCEDURE 1. De doos uit de koelkast nemen 2. Een flesje uit het koffertje halen en nagaan of het lyofilisaat zich op de bodem van het flesje bevindt. Opmerking: Om het lyofilisaat tot op de bodem van het flesje te doen zakken, het flesje voorzichtig tegen een stevig oppervlak tikken. 3. De capsule en de stop van het flesje verwijderen. 4. Een nieuwe afsluiter op de pipet plaatsen. Het uiteinde 1 cm in het melkmonster brengen. 5. De 200 µl van de te onderzoeken melk aan het flesje toevoegen.De stop terug op het flesje plaatsen. Het flesje voorzichtig schudden en draaien om het lyofilisaat volledig op te lossen. 6. Het flesje in ÈÈn van de putjes van de incubator, gestabiliseerd bij een temperatuur van 47,5∞C, plaatsen. Incuberen gedurende 3 minuten. 7. Na 3 minuten incubatie het witte flesje met droge zuivere handen openen. Een teststrookje nemen en in het flesje brengen. De pijltjes van het teststrookje moeten naar beneden wijzen. De incubatie bij 47,5∞C voortzetten. Het witte flesje sluiten. 8. Het teststrookje 2 minuten na inbrengen in het flesje weer verwijderen en onmiddellijk aflezen. 9. Het teststrookje kan in een archief bewaard worden.

ONGELDIG

-

+/-

+

++

NEGATIEF

POSITIEF

POSITIEF

POSITIEF

Er verschijnt geen rode strook: de test is niet geldig. De eerste strook is donkerder gekleurd dan de referentiestrook: het monster is negatief. De eerste strook is even donker of minder donker dan de referentiestrook: het monster bevat antibiotica in lage concentratie en is positief. De eerste strook ontbreekt: het monster bevat antibiotica in hoge concentratie en is positief. OPMERKINGEN Detectiespectrum Alle fl lactam antibiotica kunnen met de fleta s.t.a.r . worden opgespoord. De meeste diergeneeskundige specialiteiten die voor de behandeling langs intramammaire weg zijn toegelaten, bevatten fl lactam antibiotica, zoals penicilline G, cloxaciline, amoxicilline, cefapirine, cefalonium, enz. Incubatietemperatuur De ideale incubatietemperatuur bedraagt 47,5 ± 0,5∞C. Onder 46∞C verlopen de reacties trager. Hoger dan 49∞C kunnen de reagentia worden afgebroken. In beide gevallen zijn de prestaties van de test gewijzigd en is het antwoord bijgevolg incorrect. Voorzorgen Men moet zorgen dat de handen droog en zuiver zijn bij het uitvoeren van een fleta s.t.a.r. 250-test om contaminatie van de reagentia te voorkomen. Bewaring van de reagentia Bij bewaring in de koelkast tussen 2 en 8∞C zijn de reagentia stabiel tot de vervaldatum die op de verpakking van het koffertje vermeld staat. Maar de reagentia mogen tijdens de duur van de analysen buiten de koelkast blijven. Het witte flesje moet vÛÛr opening minstens 10 minuten op kamertemperatuur worden gehouden. Omgeving Aangezien het testresultaat van de opsporing van residuís van antibiotica kan veranderen bij accidentele aanwezigheid van actieve moleculen in de omgeving, verdient het aanbeveling de fleta s.t.a.r. niet te laten uitvoeren door personen die een behandeling met fl lactam antibiotica krijgen. Aanbevelingen Als de vloeistof niet op het teststrookje migreert, is de test niet geldig. Dit kan het geval zijn wanneer de test wordt uitgevoerd op een abnormale melk, zoals gestolde melk, of als de procedure niet correct werd gevolgd. Alle niet-negatieve monsters moeten een tweede maal met de fleta s.t.a.r. worden geanalyseerd. Het verdient aanbeveling tegelijkertijd een test met een negatief controlemonster uit te voeren. Als het resultaat van de test met het negatieve controlemonster verkeerd is, kan er een probleem zijn met de reagentia. In dit geval verdient het aanbeveling de analysen met nieuwe reagentia te herhalen. BAPR14/01

Opmerking Aangezien melk en de melkbestanddelen van biologische aard zijn, kan men de mogelijkheid van onjuiste resultaten niet volledig uitsluiten. In geval van twijfel of als de gevolgen ernstig kunnen zijn, verdient het aanbeveling niet te vertrouwen op het resultaat van ÈÈn enkele test, maar deze test bijv. met een microbiologische test te bevestigen. Benodigdheden : Een incubator ingesteld op 47,5º C Een pipet geijkt op 200 µl met passende afsluiters. PRODUKTINFORMATION

METHODE Der Test basiert auf einem spezifischen Beta-Lactam-Rezeptor, der an Goldpartikel gebunden ist. Bei der ersten Inkubationsstufe des Rezeptors mit kontaminierter Milch werden aufgrund einer Interaktion Beta-Lactam-Antibiotika an den Rezeptor gebunden. In einem zweiten Schritt wird die Lˆsung auf eine immunochromatographische Membran ¸bertragen. Die erste Bande mit dem Medium bindet alle freien Rezeptoren (die nicht durch Beta-Lactam-Antibiotika gebunden sind). Die zweite Bande mit dem immunochromatographischen Medium dient als Referenz und zeigt an, daβ der Test korrekt gearbeitet hat.

250

TESTDURCHF‹HRUNG 1. Den Testkit im K¸hlschrank aufbewahren. 2. F¸r die Testdurchf¸hrung ein Reaktionsgef‰β vorsichtig klopfen. Das Lyophilisat muβ sich am Gef‰βboden befinden. 3. Vorsichtig die Versiegelung und den Gummistopfen vom Reaktionsgef‰β entfernen. 4. Eine neue Spitze auf eine kalibrierte Pipette von 200 µl setzen. Die Spitze ca. 1 cm in die vorher gemischte Milch probe eintauchen. 5. Die 200 µl der zu untersuchenden Milch in das Reaktiongef‰β geben. Das Gef‰β wieder mit den Gummistopfen verschlieβen. Durch Drehen des Gef‰βes den Inhalt vorsichtig mischen um eine vollst‰ndige Auflˆsung des Lyophilisats zu erreichen. 6. Jetzt das Reaktionsgef‰β f¸r 3 Minuten bei 47,5∫C +/- 0,5∫C im Heizblock inkubieren. 7. Das weiβe Rˆhrchen ˆffnen und einen Teststreifen entnehmen. Den Teststreifen mit den blauen Pfeilen nach unten in das Reaktionsgef‰β mit der Lˆsung stecken, das sich weiterhin im Heizblock befindet. Weiβes Rˆhrchen wieder verschlie βen. 8. Das Reaktionsgef‰β mit dem Teststreifen fur weitere 2 Minuten bei 47,5∫C+/- 0,5∫C bebr¸ten. Nach 2 Minuten Bebr¸tung den Teststreifen aus dem Gef‰βe entnehmen und das Ergebnis ablesen. 9. Der Teststreifen kann durch Einkleben archiviert werden.

INFORMATION NOTICE INTRODUCTION ßeta s.t.a.r. is a receptor assay for rapid determination of ß lactam antibiotics (penicillin, ampicillin, etc Ö) extensively used in the prevention and treatment of dairy cattle diseases, particularly mastitis.

zweite Bande erste Bande

UNG‹ LTIG

EINLEITUNG βeta s.t.a.r. ist ein Test zum Schnellnachweis von Beta-LactamAntibiotika in Milch (z.B. Penicillin, Ampicillin). Diese Wirkstoffe werden haupts‰chlich zur Vorbeugung und Behandlung von Eutererkrankungen wie z. B. Mastitis eingesetzt.

INHALT EINES KITS Eine Schachtel enth‰lt die Reagenzien f¸r Untersuchungen: - 250 Reaktionsgef‰βe mit lyophilisiertem Rezeptor - 10 Rˆhrchen mit 25 jeweils Untersuchungsstreifen - 1 Produktinformation

ABLESEN DER TESTERGEBNISSE

-

NEGATIV

+/-

POSITIV

+

POSITIV

++

POSITIV

Sollte keine rote Bande sichtbar sein, ist das Ergebnis ung¸ltig. Ist die erste Bande grˆ βer als die Referenzbande, ist das Ergebnis f¸r die untersuchte Probe negativ, also als BetaLactam-Antibiotika-frei zu sehen. Ist die erste Bande genauso groβ oder etwas kleiner als die Referenzbande, wird die Probe als positiv bewertet. Ist die erste Bande nich sichtbar, ist das Untersuchungsergebnis f¸r die Probe stark positiv. HINWEISE Alle Beta-Lactam-Antibiotika werden durch βeta s.t.a.r erfaβt. Innerhalb dieser Gruppe werden f¸r die Mastitisbehandlung haupts‰chlichPenicillin G, Ampicillin, Amoxicillin, Cloxacillin, Oxacillin, Naphcillin, Cephapirin und Cephalosporin verwendet. Inkubationstemperatur Die richtige Inkubationstemperatur f¸r βeta s.t.a.r. ist 47,5∫C +/ - 0,5∫C. Temperaturen unterhalb von 46∫C verlangsamen die Reaktion von βeta s.t.a.r. und Temperaturen ¸ber 49∫C zerstˆren die Reagenzien des T ests. Vorsichtsmaβnahmen Stellen Sie sicher, daβ ihre H‰nde sauber und trocken sind. Lagerbedingungen Bei einer Lagertemperatur zwischen + 2 und + 8∫C gilt das auf der Verpackung angegebene Mindesthaltbarkeitsdatum. Der Test kann w‰hrend der Untersuchung auβerhalb des K¸hlschrankes gelagert werden. Es wird sogar empfohlen, die Schachtel etwa 10 Minuten bei Raumtemperatur stehenzulassen, bevor mit der Untersuchung begonnen wird, um Kondenswasserbildung zu vermeiden. Sonstige Vorsichtsmaβnahmen Das Testergebnis zur Bestimmung von Antibiotika in Milch kann durch andere aktive Hemmstoffe aus der Umwelt beeinfluβt werden. Aus diesem Grund empfehlen wir Personen, die mit Beta-Lactam-Antibiotika behandelt werden, den Kontakt mit βeta s.t.a.r. zu vermeiden. Empfehlungen Das Testergebnis ist ung¸ltig: Wenn die Fl¸ssigkeit nicht in den T eststreifen aufgenommen wird. Diese Situation kann auftreten, wenn z. B. dickgelegte oder klumpige Milch zur Untersuchung eingesetzt wurde. Positives Ergebnis: Alle Proben, die mit Hilfe des βeta s.t.a.r. als positiv identifiziert wurden, sollten erneut untersucht werden. Dieser Wiederholungstest sollte mit einer Referenzmilchprobe, die antibiotikafrei ist, im Vergleich angesetzt werden. Anmerkungen Ergebnisse, die durch βeta s.t.a.r. ermittelt wurden, dienen als Qualit‰tsmanagementhilfe. In F‰llen, in denen Zweifel bestehen, empfehlen wir eine Nachuntersuchung durch anerkennte Tests. Erforderliches Zubehˆr Heizblock mit 47,5∫C. Eine 200 µl Pipette mit entsprechenden Spitzen.

REACTION MECHANISM The test involves a specific ß lactam receptor linked to gold particles. The preliminary incubation of a specific amount of the receptor with milk containing antibiotics will result in the interaction of the antibiotics present with the receptor. In a second stage the solution is transferred onto an immuno chromatographic medium. - The first band of this medium will capture all the receptors which have not seen any antibiotic during the first incubation. - The second band on the immuno chromatographic medium serves as a reference band. REAGENTS The box for performing 250 tests contains : - 250 individual vials of lyophilized receptor - 10 containers with 25 dipsticks each - an information notice TEST PROCEDURE 1. Take the box out of the fridge. 2. Take out one individual receptor vial and gently tap the bottle against a solid surface in order to bring the solid material down to the bottom. 3. Carefully remove tear off seal and rubber cap from receptor vial. 4. Place a fresh disposable tip on the 200 µl calibrated pipette. Place end of the tip one centimeter into the beforehand mixed milk sample. 5. Add the 200 µl of the milk to be tested into the receptor vial. Replace cap. Gently swirl the vial in order to dissolve the solid material. 6. Place the vial into preheated incubator. Incubate 3 minutes at 47.5ºC. 7. After 3 minutes of incubation, with clean and dry hands, open the white container, take a dipstick and place it in the incubation vial still in the incubator. The arrows on the dipstick should be oriented downwards in the incubation vial. Continue the incubation at 47.5ºC. Close the white container. 8. After 2 minutes of the second incubation, take the dipstick out of the vial and interpret the results immediately. 9. The dipstick can be saved in a file. INTERPRETATION OF THE TEST

2nd band 1st band

NON VALID

-

NEGATIVE

+/-

POSITIVE

+

POSITIVE

++

POSITIVE

- If no red band occurs, the test is considered as being non valid. - If the first band is more intense than the reference band, the sample is interpreted as negative. - If the first band has an intensity close or lower than that of the reference band, the sample will be interpreted as positive. - If the first band is absent, the sample will be interpreted as highly positive. REMARKS Antibiotics detected by ßeta s.t.a.r. : Generally speaking, all ß lactam antibiotics can be detected with ßeta s.t.a.r.. Among them are the most generally used antibiotics for the treatment of mastitis i.e. Penicillin G, Ampicillin, Amoxicillin, Cloxacillin, Oxacillin, Nafcillin, Cephapirin, Cephalosporin, etc Ö Incubation temperature : The correct ßeta s.t.a.r. incubation temperature is 47.5ºC+/0.5∞C. Incubation temperatures bellow 46∞C will slow down the ßeta s.t.a.r. reaction while incubation temperatures above 49∞C will result in the destruction of the ßeta s.t.a.r. reagents. Both these extreme situations will impair the proper performance of the test. Precautions : When handling the ßeta s.t.a.r. test, make sure hands are clean and dry. This will protect contamination of ßeta s.t.a.r. test reagents. Storage conditions : If the reagents are kept in the fridge between 2 and 8∞C, they will be stable at least until the expiration date indicated on the kit. However, the reagents can be kept out of the fridge during the duration of the analysis. Before opening the white container, it should stay at least 10 minutes at room temperature. Environmental information : The result of a test for detecting antibiotics in milk can be influenced by the accidental presence of active molecules in the environment. Therefore it is recommended to avoid the performance of the ßeta s.t.a.r. test by a person that is under ß lactam antibiotic treatment. Recommendations : Non validity of the test : The non migration of the liquid on the dipstick will result in the non validity of the test. This situation will happen when the test is performed on abnormal milk like for instance clotted milk or if the procedure has not been performed properly. In this case, we will recommend to repeat the test. Positive samples : All the samples interpreted as positive must be confirmed with the ßeta s.t.a.r. In this case we suggest a procedure in which the presumed positive sample is run together with a control antibiotic free milk sample. If the result of the test with the control antibiotic free milk sample turns out to be positive, the reagents may be degraded and in this case it is recommended to make a new analysis with new reagents. Note : Results of a single ßeta s.t.a.r. test should not be regarded as fully conclusive. In case where doubt exists or severe consequences could be involved, the test results should be confirmed by a microbiological assay. Equipment needed : An incubator at 47.5ºC. A 200 µl calibrated pipette with corresponding tips. UCB-Bioproducts Chemin du Foriest B-1420 BRAINE LíALLEUD (Belgium) Tel. +32.2.386.21.11. Fax +32.2.386.29.91.