Anemia Falciforme

Hesther de Macedo Bousquet Mayara Souza Martins Nígela Rodrigues Carvalho

Hemoglobina

Cadeias β – codificadas por um gene no cromossomos 11 Cadeias α – codificadas por dois genes no cromossomo 16

1)

Variações estruturais da hemoglobina

2)

Variaçoões na taxa de produção das cadeias da hemoglobina (Talassemias)

Mutação no gene da HBB: alteração na cadeia beta substituição da adenina por timina no sexto códon do gene beta 

GAG

GTG

Hemoglobina diferente

Ácido Glutâmico

Valina

Hemácias em foice

1)

Eletroforese em pH alcalino e ácido;

2)

Focalização isoelétrica;

3)

Eletroforese de cadeias globínicas;

4)

HPLC.



Mutações pontuais: detectadas através de enzimas de restrição (reconhecem o local específico onde está a mutação);



Anemia falciforme: ausência de um sítio de clivagem da enzima no gene da beta globina (Dde I);



Fragmentos gerados: separados pelo tamanho através de eletroforese em gel de agarose.



Beta-globina normal. A enzima Dde I corta a seqüência nas posições 27, 40, 62, 107, 287, 488, 576.



Beta-globina anormal. A enzima Dde I corta a seqüência nas posições 27, 40, 62, 107, 488, 576.

Normal

Afetado

3’CUCGGUGUGGAUCCCAAC 5’  5’AAGAGUCUUCUCUGUCUCC 3’ 



PCR



Enzima de Restrição (Ddel)



Normal



Afetado



Eletroforese em gel de agarose



O diagnóstico molecular é importante, pois fornece informações fundamentais sobre a condição do paciente e seu prognóstico;

É

muito importante no diagnóstico das hemoglobinopatias – anemia falciforme é uma das doenças genéticas mais freqüentes na população brasileira;

 Deve-se

utilizar uma metodologia adequada para o correto diagnóstico, para efetivo aconselhamento genético e tratamento destas desordens genéticas.