Reconstrução Tridimensional
Representação de Estruturas Celulares
A. VAN LEEUWENHOEK (1630 - 1723)
Drawing by Marcello Malpighi (1628-1694): anatome plantarum
Técnicas de Visualização
Campo Claro
Técnicas de Visualização
Nomarsky/DIC
Campo Claro
Nomarsky/DIC
Campo claro
Contraste de fase
Nomarski
Campo escuro
Processamento Digital de Imagens
Correção de Brilho e Contraste
Processamento Digital de Imagens
Subtração de Background
Técnicas de Seccionamento de Material
Micrótomo
Técnicas de Seccionamento de Material
Criostato
Obtenção de cortes seriados
Microscopia de Fluorescência Marcadores Fluorescentes
Aumento de Resolução
Deconvolução Digital
Microscopia Confocal a Laser
Músculo de Rato, Neurônio Motor
Convencional
Confocal
Princípio de Funcionamento
Princípio de Funcionamento
Neurônio
Capacidade de Fazer “Cortes Ópticos”
Grão de Pólen Reconstruído
Renderização de Imagens
Modelo de Grão de Pólen
Reconstrução a Partir de Cortes Seriados (Microscopia Óptica ou Eletrônica) A
B
nPOD Organ Trimming, Paraffin Blocks, and IHC Workplan Head Body Tail
D
C
Ultramicrotomia
Cortes Seriados
Estimando a Espessura do Corte
Interference reflection angle from Sjöstrand (1967)
O que uma seção de corte Representa?
Cortes Seriados
Modelo Reconstruído
Delineamento das Estruturas de Interesse
Alinhamento e Reconstrução
Wild Types Images
Mutant Images
Modelagem
Modelo de Neurônio
Levedura de Fissão
Tomografia
Microscópio Eletrônico de Alta Voltagem
400KeV – 3MeV
50KeV – 200KeV
Dendrito com Coloração Seletiva
Dendrito
O espécimen é girado em diferentes ângulos
0˚
60˚
Imagem Resultante
Modelo Tridimensional
Tomografia Eletrônica de Mitocôndria http://www.sci.sdsu.edu/TFrey/MitoMovies/MitoRecon.ht