Transcricao

TRANSCRIÇÃO

Transcrição em procariont es RNA polim erase: enzim a com plexa form ada por cinco subunidades – α2ββ’δ (holoenzim a). Subunidades α: form ação do cerne t et ram érico (α2ββ’) Subunidade β: sít io de ligação de ribonucleosídeo Subunidade β’: região de ligação ao DNA m olde Subunidade δ: início da t ranscrição – reconhecim ent o do prom ot or.

Transcrição em procariont es Início da sínt ese do RNA: Ligação da holoenzim a de RNA polim erase à região prom ot ora Desenrolam ent o dos dois filam ent os de DNA – filam ent o m olde Form ação de ligações fosfodiést er ent re os prim eiros ribonucleot ídeos da cadeia

Transcrição em procariont es Prom ot or: pequena seqüência de nucleot ídeos reconhecida por um a RNA polim erase com o pont o onde deve se ligar ao DNA para iniciar a t ranscrição. Ocorre em um posição específica logo ant es do gene a ser t ranscrit o

Transcrição em procariont es Prom ot ores apresent am se qüê ncia s de conse nso alt am ent e conservadas que são reconhecida pela enzim a.Essa seqüências ocorrem a cerca de 10 e 35 pares de nucleot ídeos ant es do sít io de início da t ranscrição.

Transcrição em procariont es Se q ü ê n cia s d e con se n so: -35: -10:

5’-TTGACA-3’ 5’-TATAAT-3’

A subunidade sigm a ( δ) se liga à seqüência –35 (seqüência de reconhecim ent o – com plexo prom ot or fechado) Seqüência –10: com plexo prom ot or fechado.

Transcrição em procariont es Se q ü ê n cia s d e con se n so: -35: -10:

5’-TTGACA-3’ 5’-TATAAT-3’

A subunidade sigm a ( δ) se liga à seqüência –35 (seqüência de reconhecim ent o – com plexo prom ot or fechado) Seqüência –10: com plexo prom ot or fechado.

Transcrição em procariont es Alonga m e nt o: realizado pelo cerne da enzim a após a liberação da subunidade δ. Ocorre dent ro da bolha de t ranscrição A polim erase cont inuam ent e desenrola o DNA a sua frent e e enrola o DNA que est á at rás do sít io de t ranscrição (já foi t ranscrit o)

Transcrição em procariont es Alonga m e nt o: A cadeia de RNA nascent e vai se se desligando do DNA à m edida que a RNA polim erase se m ove pela dupla hélice. A região de paream ent o DNARNA é m uit o curt a (cerca de 3 pares de bases)

Transcrição em procariont es Té r m in o: Ocorre quando a RNA polim erase encont ra um sinal de t érm ino – o com plexo de t ranscrição se dissocia e há liberação da m olécula de RNA. Exist em dois t ipos de t erm inadores em E. coli: t erm inadores dependent es de rô ( ) t erm inadores independent es de rô ( )

Transcrição em procariont es Té r m in o: Os t erm inadores independent es de apresent am seqüências nucleot ídicas capazes de form ar g r a m p os (dificult am o m ovim ent o da RNA polim erase pela cadeia de DNA) Os gram pos são seguidos de um a seqüência rica em A (a ligação A-U é facilm ent e rom pida facilit ando a liberação do RNA t ranscrit o)

Transcrição em procariont es Té rm ino: Os t erm inadores dependent es de t êm um m ecanism o ainda incert o de funcionam ent o: quando a RNA polim erase dim inui ou pára na seqüência de t erm inação, se liga à polim erase e ret ira o RNA da bolha de t rsncrição

Transcrição em eucariont es: Em eucariontes exist em 3 t ipos de RNA polim erases diferent es at uando na t rsncrição. Cada RNA polim erase é responsável pela transcrição de um a classe específica de genes

Transcrição em eucariont es: En z im a

Localiz ação

Prod u t os

RNA p olim eras e I

Nu cléolo

RNA rib os s ôm icos , excet o RNAr 5S

RNA p olim eras e II

Nú cleo

Pré RNA n u cleares

RNA p olim eras e III

Nú cleo

RNAt e p eq u en os RNA n u cleares

Transcrição em eucariont es: Os t ranscrit os prim ários dos genes que codificam prot eínas sofrem m odificações ant es de serem t ransport ados para o cit oplasm a: São adicionados revest im ent os (caps) de 7’ m et il guanosina às pont as 5’ dos t ranscrit os prim ários Caudas poli(A) são adicionada às pont as 3’ dos t ranscrit os Seqüências ínt rons são rem ovidas

Transcrição em eucariont es: A RNA polim erase precisa de fa t ore s de t ra nscriçã o para iniciar a sínt ese de RNA Se ligam à região prom ot ora e form am um com plexo de iniciação pra a ligação da RNA polim erase e início da t ranscrição.

Transcrição em eucariont es: Prom ot ores reconhecidos pela RNA polim erase II: elem ent os curt os conservados ant es do local da t ranscrição TATA box: TATAAAA na posição – 30 CAAT box: GGCCAATCT na posição –80

Transcrição em eucariont es: Fat ores de t ranscrição: TFIIX TFIID – é o prim eiro a int eragir com o prom ot or – prot eína de ligaçào ao TATA (TBP) TFIIA e TFII B TFIIF se liga à RNA polim erase II e depois ao com plexo de iniciação – desenrolam ent o do DNA TFIIE, TFIIH e TFIIJ

Transcrição em eucariont es: O alongam ent o da cadeia ocorre pelo m esm o m ecanism o das células procariont es No início do alongam ent o da cadeia ocorre a adição da 7-m et il guanosina (7MG): adicionado quando cerca de 30 nucleot ídeos já foram t ranscrit os Os 7-MG são reconhecidos por fat ores envolvidos no início da t radução a prot ege as cadeias nascent es de RNA da degradação por endonucleases.

Transcrição em eucariont es: As pont as 3’ do t ranscrit o são form adas pela clivagem do RNA e não por t érm ino da t ranscrição A t ranscrição segue at é 1000 ou 2000 nucleot ídeos além do sít io 3’ do t ranscrit o final Em seguida esse se g m e n t o t r a ile r é rem ovido. A rem oção ocorre pelo reconhecim ent o de um a seqüência AAUAAA pert o da pont a da unidade de t ranscrição

Transcrição em eucariont es: Após a clivagem ocorre a polia de nila çã o: acréscim o de cerca de 200 nucleot ídeos de adenosina m onosfofat o – aum ent a a est abilidade do RNA t em papel im port ant e no t ransport e do RNA do núcleo para a prot eína