Toxicidad Oral Del Miverd Cap

Evidenciar la Toxicidad oral del MIVERD Capsulas mediante el método de clases tóxicas agudas Abel Poleo I, Angel Riera Navarro II, Iraima Rodríguez III, Gregoria Guanipa IV I

Medico Cirujano. Especialista Universitario en Medicina del Envejecimiento. Universidad Autónoma de Barcelona, España. Pasantía Dermatología Tropical. IPK.Cuba.e-mail: [email protected], II Medico Cirujano. Especialista en Psiquiatría Clínica. Director Hospital Psiquiátrico. Caracas. Venezuela. E-mail: [email protected]; III Medico Cirujano. Diplomado en Toxicología Clínica. Hospital Civil de Maracay. Estado Aragua. Venezuela. E-mail: [email protected] ; IV Medico Cirujano. Diplomado Salud Publica. Médico Corposalud, Maracay. Venezuela. e-mail: [email protected]

RESUMEN Introducción: El miverd capsulas, esta ideado como un potente antioxidante y regenerador celular, regulando la apoptosis celular e inhibiendo los procursores de la inflamación. Basándose en el origen neurogénico de algunas patologías dermatológicas, se ha demostrado su eficacia en pacientes con vitíligo y psoriasis. Sus principios activos esta conformado por: Ganoderma lucidum, Vitis vinífera y Rosa canina. Objetivos: realizar los estudios de toxicidad aguda oral a extracto acuoso del Miverd Capsulas. Métodos: el ensayo de toxicidad aguda oral se llevó a cabo en ratas Wistar hembras mediante el método de las clases tóxicas agudas, con la dosis máxima de 2 000 mg/kg. Resultados: La administración del extracto acuoso no provocó signos tóxicos ni mortalidad. Ni modificación en los tejidos, evidenciados macroscópicamente y microscópicamente. Este extracto se clasifico en la categoría de rango de toxicidad de una DL50> 2 000 mg/Kg., muy bajo. Conclusiones: El Miverd capsulas, mostró un bajo potencial tóxico agudo por vía oral, lo que determina que su uso en humanos es inocuo.

Palabras clave: Miverd, Ganoderma lucidum, Rosa canina, Vitis vinífera, Fito terapia.

ABSTRACT Introduction: miverd the capsule is designed as a powerful antioxidant and regenerative cells, regulating cell apoptosis and inhibiting the procursors of inflammation. Based on the neurogenic origin of some skin diseases, has proven effective in patients with vitiligo and psoriasis. Its active ingredients comprises: Ganoderma lucidum, Vitis viniferous and Rosa canina. Objectives: To study the acute oral toxicity of aqueous extract of Miverd capsules. Methods: The acute oral toxicity test was conducted in female Wistar rats using the acute toxic class, with the maximum dose of 2 000 mg / kg. Results: The administration of the aqueous extract caused no toxic signs or mortality. Neither changes in the tissues, as evidenced macroscopically and microscopically. This extract is classified in the category of a range of toxicity LD50> 2 000 mg / kg, very low. Conclusions: Miverd capsule, showed a low potential acute oral toxicity, which determines that its use is safe in humans.

Keywords: Miverd, Ganoderma lucidum, Rosa canina, Vitis vinifera, phyto therapy.

INTRODUCCIÓN El miverd capsulas, esta ideado como un potente antioxidante y regenerador celular, regulando la apoptosis celular e inhibiendo los precursores de la inflamación. Basándose en el origen neurogénico de algunas patologías dermatológicas, se ha demostrado su eficacia en pacientes con vitíligo y psoriasis. Sus principios activos esta conformado por: a.- El Ganoderma lucidum ( Figura 1) muy estudiada en todo el continente Asiático, donde se ha utilizado en la medicina tradicional china como un medicamento por más de 4.000 años, lo que la convierte en la seta mas antigua de uso medico conocido en la historia, hoy día confirmado por los avances de la investigación biomédica. Debido a sus presuntos beneficios para la salud y la aparente ausencia de efectos secundarios, ha logrado una reputación en el Oriente, en última instancia, como sustancia vegetal. (1) La palabra lingzhi, es chino, significa "hierba de la potencia espiritual", y también ha sido descrito como "el hongo de la inmortalidad". Se ha descrito en diferentes ensayos clínicos su potencialidad como anti tumoral. (2)

Las evidencias clínicas y experimentales sobre la actividad antitumoral del Ganoderma lucidum, últimamente están apareciendo estudios de laboratorio que ponen de manifiesto efectos antineoplásicos ante diversos tipos de cánceres. También en algún ensayo en humanos (3, 4) ha mostrado resultados prometedores.

Este efecto antitumoral del Ganoderma lucidum parece que se debe a distintos mecanismos o modos de actuación: Acción mediadora sobre las cito quinas, inhibiendo la angiogénesis, situación que se observa en la Psoriasis, induciendo la apoptosis (muerte espontánea y natural de las células) de las células tumorales. También estos efectos pueden ser debidos a otros mecanismos, como inhibir el crecimiento de células con receptores hormonales masculinos o femeninos (andrógenos y estrógenos) negativos, lo que reviste particular interés cuando se trata del cáncer de mama o de próstata.

Asimismo se ha invocado otro tipo de acciones antitumorales del Ganoderma lucidum, actúa como agente directamente citotóxico (acabando con células tumorales). O impidiendo la migración de las células tumorales, frenando o dificultando la aparición de metástasis. Merced a todos estos mecanismos de acción y otros, la acción del Ganoderma lucidum se ha evidenciado en los cánceres de mama, próstata y pulmón, colon, recto y otros. Su actividad anti-oxidante, destruyendo los radicales libres, ha sido ampliamente estudiada en Asia. (5, 6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16 ).

b) Rosa canina, (Figura 2) es estudiada desde hace años, entre sus componentes se ha comprobado que son alto en contenido de: catalasa (CAT), Glutatión Peroxidasa (GPX) y glutatión –S- transferasa (GST), así como Malonilaldehido (MDA). Lo que demuestra su actividad antioxidante, antiinflamatoria y relajante, con lo que se confirma su captura de radicales libres. (17). Por análisis de espectrografía se determino que la Rosa canina, posee glucósidos flavonoides, como el Kaemferol y el glucopyranosoide, con alta bioactividad antioxidante. (18). Se conoce que la Rosa Canina, tiene alto contenido de vitamina C, (19), su potencial antioxidante no solo se debe a la presencia de esta vitamina sino a su estructura polifenolítica, que le confiere una capacidad para reducir las especies reactivas de Oxigeno, tan perjudiciales al organismo cuando son originadas en exceso. (19). También se demostró su participación en la migración de macrófagos tan involucrados en las patologías dermatológicas inflamatorias. c) Vitis vinífera, (Figura 3) Este extracto es una mezcla de proantocianidinas (estructuras de taninos condensados) extraídas de las semillas de uva de la Vitis vinífera L. (Vitaceae). Se considera a las procianidinas como antioxidantes hidrosolubles que actúan como inhibidores no competitivos de la actividad de la xantin oxidasa, la enzima que estimula la cascada de radicales oxi-. A partir de los estudios disponibles se ha establecido que las procianidinas de Vitis vinífera se absorben con facilidad en el tracto gastrointestinal. El resveratrol tiene propiedades antioxidantes, anticancerígenas y modula el metabolismo de las lipoproteínas.

Además tiene una actividad neuroprotectora. Ésta es mediada por la disminución en la formación de placas de beta amiloide en la enfermedad de Alzheimer Otras dos acciones de utilidad terapéutica en dermatología, son su rol fotoprotector y en la prevención del envejecimiento. Estudios In Vitro han demostrado su actividad fotoprotectora frente a la UVB. Su acción antienvejecimiento la ejerce activando a la Sirtuína. Ésta es un sensor del estado de antioxidación de la célula y de la respuesta frente al stress. La SIRT1 (SIR: Regulador Silente de la Información) favorece la longevidad mediante la deacetilación de los factores de transcripción FOXO (forkhead box O). La deacetilación activa la transcripción de genes de reparación del ADN y de enzimas antioxidantes, como la superóxido dismutasa, y suprime la transcripción de genes proapoptóticos como el gen BIM. De esta manera, la SIRT1 regulan vías metabólicas, proliferativas y de respuesta celular frente al stress (20)

Figura 1: Ganoderma lucidun

Figura 2: Rosa canina

MÉTODOS

Tóxico, el peso corporal se anotó al inicio del estudio y semanalmente.

Ensayo ejecutado, en Julio del 2007, bajo el financiamiento de Logan-Fontaine Casa de Al concluir el período experimental se sacrificaron los Representación. Se emplearon los extractos siguientes: animales por sobredosis de pentobarbital sódico, se realizó la autopsia y un examen macroscópico y 1. Extracto seco de la combinación original que Microscópico, de órganos y tejido (riñón, pulmón, reporta cada capsula de Miverd, con hígado, bazo, estómago). Los resultados del peso Ganoderma lucidum, Rosa canina y Vitis corporal fueron procesados estadísticamente mediante jifera. Con conteo microbiológico previo y un análisis de varianza de clasificación simple (ANOVA), con un nivel de significación de p< 0,05 a análisis físico – químico. 2. Al extracto seco se convirtió en un extracto cada ejemplar que entro en el ensayo. fluido acuoso con Agua mineral de origen Estudio histológico comercial, para obtener un extracto fluido, Animales

Los animales sacrificados, los órganos fueron extraídos y colocados inmediatamente en fijador (formaldehído al 10%). Se incluyeron los órganos en Paraplas, resina sintética, se practicaron cortes de tejido de 4 a 5 micras de espesor. La observación microscópica se realizó con la coloración morfológica de Hematoxilina-Eosina.

Para el ensayo de toxicidad aguda oral se emplearon ratas Wistar hembras, con peso corporal entre 150 y 200 g, procedentes de la Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Central de Venezuela. Estado Aragua. Venezuela. Los animales se mantuvieron en una sala con temperatura controlada de 22 ± 2 ºC y ciclo luz oscuridad de 12/12 h. La alimentación consistió en dieta estándar para ratas y ratones y para conejos, según corresponde. Los ensayos fueron realizados de acuerdo con las buenas prácticas de laboratorio.

RESULTADOS

Ensayo de toxicidad aguda oral

Ensayo de toxicidad aguda oral

El ensayo fue conducido según el método de las clases tóxicas agudas descrito en el OECD Guideline For Testing of Chemical «Acute Oral Toxicity Acute Toxic Class Method». (21) Se confecciono un grupo de 4 animales cada uno, por cada extracto, a los cuales se le administró por vía oral la sustancia de prueba a la dosis de 2 000 mg/kg de peso corporal, sobre la base de los sólidos totales.

No se observó muerte de los animales durante el estudio con la sustancia ensayada. La administración oral del extracto acuoso no provocó la aparición de ningún síntoma tóxico. El comportamiento del peso corporal, fue para el grupo de fue de 40,3 ± 3,9 g.

La administración del extracto se llevó a cabo, previa ayuna de 16 h, de acuerdo con la preparación En la autopsia efectuada no se observaron alteraciones siguiente: 1, la administración del extracto acuoso se macroscópicas de órganos y tejidos para ninguno de realizó mediante 2 tomas del extracto sin dilución a la los grupos experimentales. dosis de 25 ml/Kg. separadas por un intervalo de 4 h. Las observaciones Microscópicas no evidenciaron Los animales fueron observados constantemente ninguna modificación y ausencia de signos de durante 24 h y después una vez al día durante 14 d; se inflamación, como se observa en las figuras 3 y 4. registró la aparición y duración de cualquier síntoma En el presente trabajo se evaluaron en ensayos de primera barrera los posibles efectos tóxicos que podía provocar la administración oral del Miverd Capsulas. El ensayo de toxicidad aguda por vía oral en ratas mostró que el extracto acuoso de Miverd capsulas,

posee un bajo potencial tóxico dado por la ausencia de mortalidad, signos tóxicos y alteraciones macroscópicas y microscópicas en órganos y tejidos a la dosis de 2 000 mg/kg. Por lo que se concluye que el miverd Capsulas no es toxico ni tiene efectos perjudiciales en los animales experimentales y por lo tanto se deduce que no es toxico al consumo humano. (Como se ha demostrado en su uso en estudios clínicos, de doble ciego).

Figura 3: Tejido Hepático de Rata Wistar, con dieta suplementada con Miverd Capsulas, se observa, Mitocondria conservada, y la estructura nuclear del hepatocito de aspecto normal. 12 000 X

Figura 4: Tejido Renal, de rata wistar con dieta suplementaria con Miverd capsulas, se observa normal (Membrana basal glomerular) 12000 X

10. Lu H, Kyo E, Uesaka. et als. Prevention of development of N, N’ –dimethylhydralazine-induced colon tumors by a water-soluble extract from cultured 1.- http://www.Ganoderma-Online.com medium of Ganoderma lucidum (Rhei-shi) mycelia in 2. Kimura Y, Taniguchi M and Baba K. Antitumor ICR mice. Int J Mol Med 2002; 9:113-7 and ant metastatic effects on liver of tripertenoid fractions of Ganoderma lucidum: mechanism of action 11. Hong KJ, Dunn DM, Shen CL et als. Effects of and isolation on an active substance. Anticancer Res Ganoderma lucidum an apoptotic and anti-inflamatory function in HT-29 human colonic carcinoma cells. 2002; 22:3309 Phytother Res 2004; 18:768-770 3. Gao Y, Tang W, Dai X et. als. Effects of water – soluble Ganoderma lucidum polysaccharides on the 12. Xie JT, Wang CZ, Wicks S et als. Ganoderma immune functions of patients with advanced lung lucidum extract inhibits proliferation of SW 480 human colorectal cancer cells. cancer. J Med Fod 2005; 8: 159-169 . REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

4. Cheuk W, Cahn JK, Nuovo G et als. Regression of gastric large B-Cell-lymphoma accompanied by a florid lymphoma –like T-cell reaction: immunomodulatory effect of Ganoderma lucidum (Lingzhi)? Int J Surg Pathol 2007; 15:180-6

13. Lin SB, Li CH, Lee SS et als. Triterpene-enriched extracts from ganoderma lucidum inhibit growth of hepatoma cellsvia suppressing protein kinase C, activating-mitogen-activated protein kinases and G2phase cell cycle arrest. Life Sci 2003; 72:2381-90

14. Weng CJ, Chau CF, Hsieh YS et als. Lucidenic acid inhibits PMA induced invasion of human hepatoma cells through inactivating MAPK/ERK signal transduction pathway reducing binding activities of NF-kappaB and AP-1. Carcinogenesis 6.Tang W, Liu JW, Zao WM et als. Ganoderic acid T 2008; 29:147-56 fro Ganoderma lucidum mycelia induces mithochondria mediated apoptosis in lung cancer cells. 15. Cheuk W, Cahn JK, Nuovo G et als. Regression of gastric large B-Cell-lymphoma accompanied by a Life Sci. 2006; 80: 205-211 florid lymphoma –like T-cell reaction: immunomodulatory effect of Ganoderma lucidum 7. Yue QX, Xie FB, Guan SH et als. Interaction of (Lingzhi)? Int J Surg Pathol 2007; 15:180-6 Ganoderma triterpenes with doxorubicin and proteomic characterization of the possible molecular targets of ganoderma triterpenes. Cancer Sci 2008; 16. Müller CI, Kumagai T, O’Kelly J. et als. Ganoderma lucidum causes apoptosis in leukaemia, 99:1461-70 lymphoma, and multiple myeloma cells. Leuk Res 8. Kim KC, Jun HJ, Kim JS et als. Enhancement of 2006; 30: 841-8 radiation response with combined Ganoderma lucidum and Duchesnea chrysanta extracts in human leukaemia 17. Özmen, S. Ercişli, Y. Hızarcı, E. Orhan. INVESTIGATION OF ANTIOXIDANT ENZYME HL-60 cells. Int J Mol Med. 2008; 21:489-98 ACTIVITIES AND LIPID PEROXIDATION OF ROSA CANINA. U:S:A 2000

5. Cao QZ, Lin ZB. Ganoderma lucidum polysaccharides peptide inhibits the grow of vascular endothelial cell and induction of VEGF in human lung cancer cell. Life Sci 2006; 78: 1457-1463

9. Lu H, Uesaka T, Katoh O, Kyo E. et als. Prevention of paraneoplastic lesions, aberrant crypt foci, by a water-soluble extract from cultured medium of Ganoderma lucidum (Rhei-shi) mycelia in male F344 rats. Oncol Rep 2001; 8:1341-5

18. Kumarasamy Yashodharan ; COX Philip J. ; Jaspars Marcel ; RASHID Mohammad A. ; Sarker Satyajit D. Glucósidos flavonoides bioactivos de las semillas de Rosa canina . Biología farmacéutica ISSN 1388-0209. 2003, vol. 41, N º 4, pp. 237-242 [6 página (s) (artículo)] (25 ref.)

19. DA-Daels Rakotoarison , B. Gressier , F. Trotin , C. Brunet , M. Luyckx , Cenar T. , F. Bailleul , M. Cazin , JC. Cazin 1 Efectos de la Rosa canina extracto de frutas respiratorio de neutrófilos en ráfaga. 2Laboratoire de Pharmacognosie, Faculté des Sciences et pharmaceutiques Biológicas, BP 83, 59006 Lille Cedex, Francia 20. Satyanarayana Sreemantula, Srinivas Nammi, Rajabhanu Kolanukonda, Sushruta Koppula, and Krishna M Boina . . Adaptogenic and nootropic activities of aqueous extract of Vitis vinifera (grape seed): an experimental study in rat model. BMC Complement Altern Med. 2005; 5: 1. Published online 2005 January 19. doi: 10.1186/1472-6882-5-1 21.- García G, Palacios M, Gazapo R, Pérez L. Elaboración de una metodología para la evaluación de la irritabilidad oftálmica y validación con diferentes métodos. Rev Cubana Farm. 1988;22:5.